肿瘤坏死因子凋亡相关配体基因的克隆和表达

目的：克隆、表达和鉴定肿瘤坏死因子凋亡相关配体(TRAIL)．方法：从培养的人外周血淋巴细胞中提取总RNA，经RT-PCR获得TRAIL基因．将该基因克隆到pGEM-Teasy载体中，测序鉴定．将TRAIL基因插入pBV220表达载体中，42℃诱导表达4～5h，进行SDS-PAGE分析．免疫印迹法鉴定TRAIL蛋白的表达．结果：DNA测序证明，获得了TRAIL基因，其序列与GenBank中报道序列完全一致．SDSPAGE分析表明，TRAIL蛋白获得高效表达，分子质量为17ku，表达量约占菌体总蛋白的300k，．免疫印迹法鉴定显示，该蛋白可与鼠抗人TRAIL mAb产生阳性反应．结论：成功克隆和表达了TRAIL基因．     

浅析医学人才流失的成因及对策

人才流失是人才流动态势中"进"与"出"失衡的特定现象。人才的流失意味着自己培养且需要的人才不能继续为本单位服务,特别是高质量人才的流失,对医院技术建设会产生严重的不良后果。本文以21世纪知识经济为背景,探讨医学人才流失的成因,初步提出了挽留人才、保护人才的对策。     

Ese-3基因对皮肤角质形成细胞增殖的影响

目的:研究表皮特异性转录因子Ese-3在皮肤鳞状细胞癌中的表达及靶向沉默Ese-3基因表达对皮肤角质形成细胞HaCaT细胞增殖的影响.方法:免疫组化方法检测Ese-3在皮肤鳞状细胞癌及癌旁组织中的表达.利用慢病毒干扰系统感染HaCaT细胞,建立Ese-3基因敲减的HaCaT细胞系,MTT实验检测Ese-3敲除后细胞增殖的变化,流式细胞术检测Ese-3敲减后对细胞周期的影响.结果:免疫组化结果显示,Ese-3在皮肤鳞状细胞癌组织中表达显著低于癌旁皮肤组织.MTT和流式细胞术结果显示,下调Ese-3表达后,HaCaT细胞增殖加快,S期细胞增多,G0-G1期细胞和G2/M期细胞减少.结论:Ese-3在皮肤鳞状细胞癌中表达降低,抑制Ese-3基因表达可促进HaCaT细胞生长,提示Ese-3表达缺失可能通过促进细胞恶性增殖进而促进皮肤癌的发生发展.     

原发性肺癌521例临床特点分析

目的：分析原发性肺癌的临床特点.方法：回顾性分析521例确诊为原发性肺癌且有完整资料患者的临床特点.结果：男377例,女144例,年龄15-80岁,中位年龄58岁.鳞癌、腺癌、小细胞癌和其他病理类型肺癌分别占32.44％、35.12％、25.14％和7.29％.女性患者腺癌发生率高于男性,鳞癌发生率较男性低.吸烟主要与鳞癌的发生有关.男性患者的平均发病年龄高于女性患者.最常见的转移部位从高到低依次为骨、脑、对侧肺及肝脏,其中腺癌的骨、脑、肺转移发生率均高于其他病理类型.结论：腺癌仍是目前肺癌的主要病理类型,吸烟、性别均是肺癌病理类型的影响因素,骨、脑是肺癌最常见的转移部位.     

安罗替尼后线治疗晚期结直肠癌的疗效及安全性

目的:探索晚期结直肠癌患者接受安罗替尼(anlotinib)三线及以上治疗的临床疗效和安全性。方法:选择唐都医院肿瘤内科2020年11月至2023年05月期间收治的50例晚期结直肠癌患者,这些患者既往曾接受过两种或以上不同的标准方案治疗,予以口服盐酸安罗替尼胶囊治疗,按RECIST 1.1版标准评估疗效,按CTCAE5.0版标准评估不良反应。结果:共入组50例患者,其中1例患者部分缓解,26例患者疾病稳定,23例患者疾病进展。中位随访时间10.0个月,中位无进展生存期为2.0个月,中位总生存期为6.0个月。药物相关的不良反应以高血压(18.0%)、AST升高(10.0%)、蛋白尿(6.0%)和黄疸(6.0%)最为常见,绝大多数不良反应为1-2级,1例患者出现3级以上消化道出血。结论:在晚期结直肠癌三线及以上治疗中,安罗替尼显示出良好的疗效及安全性,安罗替尼可用于晚期结直肠癌的临床治疗。     

肺癌骨转移278例临床特点分析

目的:分析肺癌骨转移的临床特点,为疾病诊治提供参考。方法:回顾性分析278例确诊为肺癌骨转移且有完整资料患者的临床特点。结果:在278例肺癌骨转移患者中,男185例,女性93例。年龄26～85岁,中位年龄58岁。病理类型中,腺癌、鳞癌、小细胞肺癌及其他类型分别占50.36%、17.27%、21.22%和11.15%。一般情况ECOG评分为2~4分的患者有194例,占69.78%。肺癌骨转移最常见部位是脊柱、胸部和骨盆。结论:肿瘤的病理类型可能与肺癌骨转移相关。对于肺癌怀疑骨转移的患者建议常规行ECT筛查,必要时进一步行CT、MRI确诊,以免漏诊,有条件者可行PET-CT检查。     

结肠癌细胞中Ese-3对树突状细胞分化成熟的影响

目的:利用体外共培养实验,观察结肠癌细胞SW480中上皮特异性转录因子Ese-3表达水平的改变对树突状细胞（dendritic cell,DC）分化成熟的影响。方法:利用慢病毒系统获得过表达Ese-3的结肠癌细胞SW480（SW480 Ese-3）及其对照细胞株（SW480 NC）。利用磁珠分选方式,从人外周血单个核细胞（PBMC）中获得CD14+细胞,经rhGM-CSF、rhIL-4刺激获得不成熟的DC（iDC）。通过Transwell小室将SW480 Ese-3和SW480 NC细胞分别与iDC进行间接共培养。流式细胞术检测共培养后的DC细胞中HLA-DR、CD14、CD83、CD86 的表达。ELISA检测细胞培养上清中IL-12p70的水平。结果:SW480 Ese-3/DC共培养组DC细胞表面标志物HLA-DR、CD83、CD86水平,较SW480 NC/DC共培养组升高,CD14水平降低;SW480 Ese-3/DC共培养组上清中IL-12p70水平较对照组升高。结论:在体外共培养实验中,SW480细胞过表达Ese-3可促进DC细胞分化成熟。     

BLCAP蛋白表达与骨肉瘤恶性程度的关系

目的：了解BLCAP蛋白表达与骨肉瘤恶性程度的关系。方法：采用SABC法，对临床收集骨肉瘤病理标本进行检测，观察BLCAP蛋白表达情况，结合临床随访结果，判断BLCAP蛋白表达与骨肉瘤恶性程度之间的关系。结果：BLCAP蛋白在原发骨肉瘤组织中表达阳性率约为65．6％，而在复发性骨肉瘤组织中表达阳性率只有25．0％。结论：BLCAP蛋白表达水平与骨肉瘤恶性程度之间有一定的相关性，对临床判断骨肉瘤的预后有一定参考价值。     

survivin启动子调控siRNA真核表达载体的构建及对HeLa细胞中stathmin基因的干涉作用

目的：探讨survivin基因启动子调控的siRNA真核表达载体对HeLa细胞中stathmin基因表达的肿瘤特异性封闭作用。方法：合成针对人stathmin基因的siRNAcDNA寡核苷酸链退火形成双链，连接入经BamHI和HindIII双酶切后的pSilencer4．1-CMVneo真核表达载体。PCR扩增suvivin基因启动子并测序，用EcoRI和BamHl分别双酶切，连接至经相同内切酶消化的载体，获得survivin启动子调控的siRNA真核表达载体，酶切及测序鉴定。脂质体法转染重组质粒人HeLa细胞，G418筛选。RT-PCR扩增stathmin基因，检测其对stathmin基因表达的干涉效果；流式细胞仪分析转染后HeLa细胞增殖周期的改变。结果：经酶切及测序鉴定，成功构建重组质粒；RT—PCR结果显示所构建的干涉载体可有效封闭stathmin基因表达；流式细胞仪分析结果显示，Hale细胞在stathminsiRNA作用下G2／M期细胞的比例明显增加。结论：survivin基因启动子调控的siRNA真核表达载体可有效地封闭HeLa细胞中stathmin基因表达并使HeLa细胞阻断于G2／M期，为以stathmin基因为靶点的恶性肿瘤生物治疗奠定了理论基础。     

17β雌二醇对人桡动脉舒张作用的体外实验

目的:研究17β雌二醇(17β-estradiol,E2)对人桡动脉(RA)的舒张作用及其机制.方法:采用离体血管灌流的方法,观察E2对人RA的舒张作用以及NO合成酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester,L-NAME),8-Br-cGMP和鸟苷酸环化酶抑制剂美蓝(MB)对这一过程的影响.结果:观察到E2(0.1～100 μmol/L)可剂量依赖性地舒张血管且具有内皮依赖性;8-Br-cGMP(0.1～1×103 μmol/L)也可引起剂量依赖性的血管舒张效应.10 μmol/L MB使E2舒张人RA的作用完全消失.10 μmol/L L-NAME能部分抑制E2舒张TA的作用.结论:E2对RA的急性舒张作用具有内皮依赖性.此作用是E2通过非基因组方式使血管内皮细胞分泌NO、进而可能引起血管平滑肌细胞内的cGMP水平升高实现的.