备用根大鼠脊髓后角提取液中神经营养活性组分的分离及生物活性测定

制作备用根大鼠脊髓后角提取液，取其分子量大于10kD的组分进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，发现手术侧和非手术侧的电泳区带数目大致相同，但手术侧样品的第四条蛋白质区带扫描的吸收峰面积百分比大于非手术侧样品的第四条区带，两者在量上可能有差别。将手术侧样品经交联葡聚精G-75凝胶层析，得到两个洗脱峰．第一峰洗脱液有促进体外培养的背根节神经元存活及其突起生长的作用，其电泳分析显示4条主带，分子量在40～80kD之间．实验结果提示部分去传入纤维支配的脊髓后角组织含有神经营养活性物质，该物质的分子量约在40～78kD之间．     

吗啡增强备用根大鼠脊髓后角组织提取液对培养鸡胚背根节的促神经突起生长的作用

用组织培养方法，探讨备用很大鼠手术侧和非手术侧脊髓后角组织提取液对鸡胚背根节（ＤＲＧ）神经突起的促生长作用，以及应用吗啡对此作用的影响。结果显示：备用根大鼠手术侧脊髓后角组织提取液作用的ＤＲＧ神经突起密度（３６．４２±４．６９），比非手术侧的（２３．９６±３．４７）明显增大。提示去初级传入纤维的脊髓后角组织具有促进ＤＲＧ神经突起生长的神经营养活性作用。应用吗啡的备用根大鼠手术侧脊髓后角组织提取液作用的ＤＲＧ神经突起密度（６４．１９±９．２４），又比备用根大鼠手术侧的大。这表明，吗啡具有进一步增强去初级传入纤维支配的脊髓后角组织提取液促进培养的ＤＲＧ神经突起生长的效应。     

凝胶迁移阻滞法分析人类端粒酶的DNA结合特性

目的 采用凝胶迁移阻滞法分析研究人类端粒酶DNA结合特性。方法 以地高辛标记的人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物进行结合反应，以未参与结合反应的单纯标记寡核苷酸作为参照。实验所设的3组样品中，第一组和第二组标记寡核苷酸加端粒酶，第一组显示一条阻滞性条带，第二组显示两条条带，前方的一条与第一组条带平行，为单纯探针条带，后方的一条迁移率被阻滞，应为探针与纯化的蛋白复合体相结合的结果；第三组为标记寡核苷酸加端粒酶阴性洗涤液，只显示单一探针条带。结果 只有人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物结合反应管显示特异的凝胶迁移阻滞性电泳条带。结论 人端粒酶具有和端粒DNA片段结合的特性。     

CEA重组痘苗病毒对实验性CEA阳性肝癌的预防和治疗作用

目的：探讨CEA重组痘苗病毒(CEA—rV)对小鼠CEA阳性肿瘤的预防和治疗作用。方法：①预防作用观察：将实验小鼠分为4组，第1、2组和第3、4组分别皮下接种野生型痘苗病毒(W—VV)和CEA—rV3次，末次接种后，第1、3组皮下注射同源鼠CEA阴性肝癌细胞(Hepa—CEA)，第2，4组接种Hepa—CEA^ 。肿瘤细胞接种后每周测量肿瘤体积，共6周。②治疗作用观察：第1、2组先皮下注射Hepa—CEA^-，3、4组接种Hepa-CEA^ ，7d后1、3组皮下接种W—VV，2，4组接种CEA—rV。肿瘤细胞接种后每周测肿瘤体积，共6周。结果：①预防作用：接种CEA—rV和Hepa—CEA^ 组(第4组)小鼠在观察期内无肿瘤形成，其他小鼠皮下均有肿瘤形成，并且以相近速度增长。②治疗作用：接种Hepa—CEA^ 和CEA—rV组(第4组)小鼠皮下肿瘤生长缓慢，瘤块较小，其他3组肿瘤生长迅速，瘤块较大。整个实验过程中各组小鼠均未表现出其他任何不良反应。结论：CEA—rV对实验性CEA阳性肿瘤具有良好的预防和治疗作用，而且预防作用更佳。     

CEA-rV治疗CEA阳性肿瘤的实验和应用研究

目的：探讨CEA重组基因痘苗病毒（CEA-rV）对实验动物CEA阳性肿瘤的预防和治疗作用。方法：1）预防组：将实验鼠分为4组．先皮下接种痘苗病毒（1、2组野生型W-VV，3、4组CEA-rV）3次，再分别皮下注射同源鼠肝癌细胞（1、3组Hepa-CEA^-，2、4组Hepa-CEA^＋）。2）治疗组：同样4组，先皮下注射肝癌细胞（1、3组Hepa-CEA^-，2、4组Hepa-CEA^＋），7d后再分别皮下接种痘苗病毒（1、2组W-VV，3、4组CEA-rV）。以后每周测量一次肿瘤大小，并观察动物反应。结果：1）预防组：接种CEA-rV／Hepa-CEA^＋组各鼠在观察期限内无肿瘤形成，而3个对照组各鼠皮下均有肿瘤形成，并且以相近速度快速增长（肿瘤体积平均3．5cm^3）。2）治疗组，接种Hepa-CEA^＋／CEA-rV组小鼠皮下肿瘤生长缓慢，瘤块较小（平均1cm^3），而3个对照组肿瘤生长迅速，瘤块较大（平均5cm^3）。无论预防组和对照组小鼠在整个实验过程中均未表现有毒副反应。结论：CEA-rV对实验性阳性肿瘤具有良好的预防和治疗作用，而且预防作用更佳。     

阳离子脂质体介导pE-CEA-cd-tk对CEA阳性肺癌的杀伤作用

目的：增强E.coli cd/HSV-1 tk自杀基因的细胞毒性，实现阳离子脂质体介导pE-CEA-cd-tk/5-FC GCV体系靶向杀伤CEA阳性肺癌，方法：PCR法分别扩增出CMV增强子，CWA启动子，cd-tk，构建真核表达载体pE-CEA-cd-tk;MTT法检测pE-CEA-cd-tk/5-FC GCV体系的体外细胞毒性，体内实验采用肺腺癌细胞SPC－A－1裸鼠皮下移植瘤模型，通过肿瘤局部或鼠尾静脉注射脂质体／pE-CEA-cd-tk复合物，腹腔注射GCV＋5－FC前体药物进行治疗。结果：阳离子脂质体介导pE-CEA-cd-tk/5-FC GCV体系体外可靶向杀伤CEA阳性肺癌细胞，这种杀伤作用存在显著的细胞差异；体内可抑制小鼠皮下肺肿瘤结节的生长，荷瘤鼠存活期延长。结论：阳离子脂质体介导pE-CEA-cd-tk/5-FC GCV体系体内外对CEA阳性肺癌均具有较强的杀伤作用，有望用于CEA阳性肺癌的治疗。     

非同位素标记pAW101探针作人流胚胎组织的亲权鉴定

DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)技术的经典方法是用酚抽提DNA,同位素标记探针。本文研究选用N_aCI盐析分离DNA的技术,结合地高辛配基标记pAW101探针方法,作了11例无争议的胚胎组织的亲权鉴定,同时测定4种同Ⅰ酶型,在不违反孟德尔遗规律的前提下,按Essen-Moller公式计算父权概率(均>99.73％),达到确定亲生关系的标准。本方法简单、易于掌握,结果稳定可靠,适宜于一般实验室开展工作。     

人癌胚抗原cDNA-重组痘苗病毒接种动物的研究

将构建的表达人癌胚抗原（ＣＥＡ）的重组痘苗病毒接种于纯种新西兰兔，在兔血清中测到高水平的ＣＥＡ以及高滴度抗ＣＥＡ抗体，而在兔的非淋巴组织器官中未检测到ＣＥＡ的表达及免疫复合物的沉积，接种后的兔也没有明显的毒副反应，显示痘苗病毒作载体在体内应用是安全可行的。     

CEA-重组痘苗病毒预防CEA阳性肿瘤的动物实验研究

目的：探讨ＣＥＡ－重组痘苗病毒对ＣＥＡ阳性肿瘤的预防作用。方法：构建ＣＥＡ阳性小鼠Ｈｅｐａ肝癌细胞模型。将实验鼠分为４组,先分别皮下接种痘苗病毒３次,再分别颈背部皮下注射ＣＥＡ阳性或ＣＥＡ阴性同源鼠Ｈｅｐａ肝癌细胞。观察动物反应并在接种癌细胞后每周测量一次肿瘤大小。结果：３个对照组各级部皮下均可见有瘤块形成,并且以相近速度快速增长,３组之间无统计学上的显著差异,而接种ＣＥＡ－ｒＶ／Ｈｅｐａ－ＣＥＡ