凝胶迁移阻滞法分析人类端粒酶的DNA结合特性

目的 采用凝胶迁移阻滞法分析研究人类端粒酶DNA结合特性。方法 以地高辛标记的人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物进行结合反应，以未参与结合反应的单纯标记寡核苷酸作为参照。实验所设的3组样品中，第一组和第二组标记寡核苷酸加端粒酶，第一组显示一条阻滞性条带，第二组显示两条条带，前方的一条与第一组条带平行，为单纯探针条带，后方的一条迁移率被阻滞，应为探针与纯化的蛋白复合体相结合的结果；第三组为标记寡核苷酸加端粒酶阴性洗涤液，只显示单一探针条带。结果 只有人端粒序列寡核苷酸与人端粒酶提取物结合反应管显示特异的凝胶迁移阻滞性电泳条带。结论 人端粒酶具有和端粒DNA片段结合的特性。     

Ezrin及其与恶性肿瘤关系的研究进展

埃兹(Ezrin)为膜细胞骨架连接蛋白,是连接细胞膜和细胞骨架之间的ERM(Ezrin-Radixin-Moesin,埃兹-根蛋白-膜突蛋白)家族成员之一,表达后主要分布于细胞膜内侧。研究发现其在细胞的运动、黏附、信号传导、细胞坏死等方面有重要作用,而其在肿瘤发生、发展、尤其在侵袭、转移等方面的作用也逐渐受到重视。     

CEA-rV对小鼠巨噬细胞抗原呈递功能的影响

目的：探讨癌胚抗原重组痘苗病毒（CEA－rV)对巨噬细胞（MΦ）抗原呈递功能的影响。方法：采用混合淋巴细胞反应（MLR），检测接种CEA－rV小鼠MΦ的抗原呈递功能。采用流式细胞术（FCM）检测MΦMHC－I（H－2K^b)、MHC－Ⅱ（I－A^b)及B7（B7－2）分子的表达。采用荧光抗体直接染色法，检测CEA^ 肿瘤细胞H－2K^b和I－A^b分子的表达。结果：腹腔接种CEA－rV小鼠MΦ组（CEA－rV MΦ组）T细胞分泌IL－2的水平较接种-VV株及NS组显著增强（P＜0．01）。小鼠腹腔MΦ上I－A^b和B7－2分子的固有表达较低（分别为41．7％和13．7％）。接种W－VV株后，I－A^b及B7－2分子的表达改变不明显（分别为44．3％和15．1％）；而接种CEA－rV后，I－A^b及B7－2分子的表达明显增强（分别为87．2％和39．5％）。各组CEA^ 肿瘤细胞MHC－I分子呈强表达，但却无MHC－Ⅱ分子。结论：腹腔接种CEA－rV小鼠的MΦ，可使MΦ其抗原呈递功能显著增强。MΦ的MHC－Ⅱ与B7－2分子表达的增强，可能是其抗原呈递功能增强的主要原因，提示MHC－Ⅱ与B7－2分子可能与CEA－rV的抗瘤作用密切相关。     

α2A-肾上腺素能受体基因调控区单核苷酸多态性对基因转录活性的影响

[目的]探讨α_(2A)-肾上腺素能受体基因-1296位单核苷酸多态性对受体基因转录活性的影响。[方法]以基因组 DNA为模板,扩增α_(2A)-肾上腺素能受体基因 5’侧翼序列(2 085 bp),-1296位分别为g或c,与报告基因载体pGL3-enhancer相连接,构建重组载体,分别与pRL-CMV共转染人绒癌细胞JEG-3,检测荧光素酶相对表达量。[结果]成功构建重组质粒 pGL3FSg/pGL3FSc,荧光素酶检测结果显示,当5侧翼-1296位为g时,荧光素酶基因表达量高,而为c时,荧光素酶基因表达量低。[结论]a_(2A)-肾上腺素能受体基因5’侧翼-1296位为g时,基因转录活性较高;为c时,基因转录活性较低。     

非同位素标记pAW101探针作人流胚胎组织的亲权鉴定

DNA限制性片段长度多态性(RFLPs)技术的经典方法是用酚抽提DNA,同位素标记探针。本文研究选用N_aCI盐析分离DNA的技术,结合地高辛配基标记pAW101探针方法,作了11例无争议的胚胎组织的亲权鉴定,同时测定4种同Ⅰ酶型,在不违反孟德尔遗规律的前提下,按Essen-Moller公式计算父权概率(均>99.73％),达到确定亲生关系的标准。本方法简单、易于掌握,结果稳定可靠,适宜于一般实验室开展工作。     

CEA-重组痘苗病毒预防CEA阳性肿瘤的动物实验研究

目的：探讨ＣＥＡ－重组痘苗病毒对ＣＥＡ阳性肿瘤的预防作用。方法：构建ＣＥＡ阳性小鼠Ｈｅｐａ肝癌细胞模型。将实验鼠分为４组,先分别皮下接种痘苗病毒３次,再分别颈背部皮下注射ＣＥＡ阳性或ＣＥＡ阴性同源鼠Ｈｅｐａ肝癌细胞。观察动物反应并在接种癌细胞后每周测量一次肿瘤大小。结果：３个对照组各级部皮下均可见有瘤块形成,并且以相近速度快速增长,３组之间无统计学上的显著差异,而接种ＣＥＡ－ｒＶ／Ｈｅｐａ－ＣＥＡ     

人癌胚抗原重组痘苗病毒在接种动物体内的表达

免疫治疗是肿瘤治疗的新模式［１］,主要通过一定技术增强肿瘤抗原或肿瘤相关抗原的免疫原性,诱导机体产生肿瘤特异性的免疫反应,杀伤肿瘤细胞。由于肿瘤细胞自身的复杂性和机体内多种因素的影响,诱发有效的肿瘤特异性免疫反应是免疫治疗的关键。肿瘤相关抗原是肿瘤免疫治疗的靶向物质基础,癌胚抗原（ＣＥＡ）是重要的肿瘤相关抗原［２］,９０％的胃肠道肿瘤,７０％的非小细胞性肺癌和５０％的乳腺癌中有高水平表达,上述肿瘤为ＣＥＡ表达型肿瘤。ＣＥＡ主要分布在细胞浆和胞膜,它的免疫原性很弱,无法激活机体产生ＣＥＡ特异性的免…     

癌胚抗原阳性肿瘤基因治疗的研究进展

癌胚抗原(CEA)阳性肿瘤是一类严重危害人类健康的常见肿瘤,既可采用通用的基因治疗方法又可利用CEA阳性肿瘤的特殊性进行靶向基因治疗.随着基因治疗方法的推广,CEA阳性肿瘤的基因治疗已在基因调控治疗(反义RNA抑制癌基因表达)、基因矫正治疗(引入抑癌基因、矫正癌基因突变)、肿瘤免疫治疗(导入CEA重组质粒和各种细胞因子)以及“自杀”基因治疗(TK/GCV、CD/5FC系统和cd-tk融合基因)等方面取得了很大的进展.本文综述了国内外这方面研究的进展.     

吗啡增强备用根大鼠脊髓后角组织提取液对培养鸡胚背根节的促神经突起生长的作用

用组织培养方法，探讨备用很大鼠手术侧和非手术侧脊髓后角组织提取液对鸡胚背根节（ＤＲＧ）神经突起的促生长作用，以及应用吗啡对此作用的影响。结果显示：备用根大鼠手术侧脊髓后角组织提取液作用的ＤＲＧ神经突起密度（３６．４２±４．６９），比非手术侧的（２３．９６±３．４７）明显增大。提示去初级传入纤维的脊髓后角组织具有促进ＤＲＧ神经突起生长的神经营养活性作用。应用吗啡的备用根大鼠手术侧脊髓后角组织提取液作用的ＤＲＧ神经突起密度（６４．１９±９．２４），又比备用根大鼠手术侧的大。这表明，吗啡具有进一步增强去初级传入纤维支配的脊髓后角组织提取液促进培养的ＤＲＧ神经突起生长的效应。