分泌抗H_(815)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

制备兔抗正常615小鼠肝癌细胞免疫血清,以此处理615小鼠肝癌细胞用处理过的瘤细胞免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与Sp2/0融合,以间接免疫荧光法和细胞ELISA二种方法检测,建立两株分泌抗615小鼠肝癌细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞系。两杂交瘤细胞系所产生的单克隆抗体与正常615小鼠的肝、脾、肺、肾、脑、心肌、横纹肌、胸腺组织细胞和多     

增强PHA-LAK细胞诱导激活新途径的研究

自1995年在上海召开第四届全国肿瘤生物治疗会议以来,我国的肿瘤生物治疗研究和应用发展迅速并取得了新的进展;与此同时,国外又涌现出许多新的理论和方法.因此,召开一次有关的全国性专业学术会议将对我国肿瘤生物治疗的深入研究及临床应用乃至未来的发展具有重要意义.由中国免疫学会肿瘤免疫与生物治疗专业委员会、中国抗癌协会肿瘤生物治疗专业研究会及中华医学会肿瘤学会联合主办的“第五届全国肿瘤生物治疗会议”于1997年9月21～25日在四川成都召开.这次会议共收到稿件429篇,为历届肿瘤生物治疗会议之最,也表明目前国内肿瘤生物治疗研究之兴盛.其中,21篇作了大会发言;203篇以摘要形式在《中国肿瘤生物治疗杂志》上发表;120篇参加了分组讨论.这次会议的主要议题是:(1)总结和交流自第四次全国肿瘤生物治疗会议以来我国肿瘤生物治疗领域的基础研究及临床工作,对此作出恰当的评价并增进对国外最新进展的了解;(2)介绍各单位在肿瘤生物治疗领域的研究及临床工作,从而加强国内同行彼此之间的交流与合作;(3)学习肿瘤生物治疗的规范化要求、新药技术的审评要求以加强对肿瘤生物治疗研究及应用的管理;(4)通过了解与学习国外该领域的最新进展,根据我国的国情以及研究基础提出国内肿瘤生物治疗领域今后的发展     

JNK/SAPKs信号转导通路在榄香烯抗肝癌效应中的作用

目的:探讨JNK/SAPKs信号转导通路在榄香烯抗肝癌效应中的作用,为阐明榄香烯抗癌效应的分子机制提供参考.方法:气相色谱法检测榄香烯在Hca-F肝癌细胞内的分布.透射电镜观察SMMC7721凋亡细胞的超微结构变化.利用Western-blotting对榄香烯处理的HepG2肝癌细胞JNK/SAPKs进行的活性分析.利用RT-PCR检测榄香烯处理的SMMC7721肝癌细胞的DAXX基因表达.结果:榄香烯标准品在8.42 min时出现洗脱峰.榄香烯处理3 h后,SMMC7721细胞开始发生具有凋亡特征的变化.榄香烯处理组HepG2细胞的JNK/SAPKs激酶活性次于热休克处理组,高于对照组.榄香烯处理的SMMC7721细胞组未见DAXX基因的表达.结论:榄香烯能够进入细胞内.其引起的肿瘤细胞凋亡可能是通过活化JNK/SAPKs来诱导的.DAXX传人途径在榄香烯诱导的JNK/SAPKs活化过程中可能不起主要作用.     

热处理对人肝癌细胞HepG2基因表达谱的影响

肿瘤的热疗已成为近年来肿瘤治疗学的一个热点[1] 。为了从基因水平上深入研究热杀灭细胞机制 ,本文应用基因点数为 12 5 5 0的人类基因表达谱芯片 ,筛查经热处理的人肝癌细胞ＨｅｐＧ2 出现表达变化的基因 ,探索这些基因的变化与热杀伤肿瘤细胞的内在联系与规律 ,为肿瘤的热疗提供分子生物学依据。一、材料与方法1.主要试剂及设备 :Ｔｒｉｚｏｌ试剂盒、Ｔ7 (Ｔ) 2 4引物、ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔⅡＲｅｖｅｒｓｅＴｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ、ＤＮＡｌｉｇａｓｅ、ＤＮＡ多聚酶Ⅰ、ＲＮＡ酶Ｈ(Ｇｉｂｃｏ) ;ＭＥＧＡｓｃｒｉｐｔＴ7ＩｎＶ…     

体外构建的HTA-HSP70BCG冲激的树突状细胞疫苗的抗肿瘤作用

 目的 观察体外构建的榄香烯复合瘤苗抗原-卡介苗热休克蛋白70复合物（H_TA—HSP70_BCG）诱导的树突状细胞疫苗的抗肿瘤效应。方法 来源于小鼠的肝癌Hca-F榄香烯复合疫苗的抗原（HTA）与卡介苗来源的HSPT0（HSP70_BCG）在体外构建成HTA—HSP70_BCG复合物，用GM-CSF和IL-4诱导树突状细胞（DCs），分别用HTA—HSP70_BCG、HTA和HSP70麟对其冲激。用舯法检测该DCs刺激的全脾细胞的增殖活性及被刺激的脾细胞的细胞毒活性。用流式细胞仪检测DCs表面（瑚6和CD40的表达。结果 体外构建HTA—HSP70_BCG可以诱导DCs成熟，表现为DCs表达CD86和CD40上调，该DCs可以刺激全脾细胞增殖并使其产生特异性杀瘤活性，其强度明显大于HTA。结论 体外构建HTA—HSP70麟复合物可以诱导DCs成熟，该DCs可以激活脾细胞产生较强的特异性抗瘤效应。     

siRNA表达框架对TNF-α和IL-1的特异性抑制

[目的]利用siRNA表达框架研究RNA干扰技术对小鼠腹腔活化巨噬细胞分泌TNF-α和IL—1的抑制作用及其干扰序列的特异性。[方法]原代培养小鼠腹腔巨噬细胞，构建针对小鼠TNF—α和IL-1的siRNA表达框架，转染细胞，用ELISA方法检测TNF-α和IL-1分泌情况。[结果]TNF-α干扰组TNF-α分泌量（21．87±1．20）pg／mL较IL-1干扰组（28．02±1．03）pg／mL及对照组（27．64±1．92）pg／mL均明显降低，差异有显著性意义（P〈0．05）。IL-1干扰组IL-1分泌量（40．37±4．02）pg／mL较TNF—α干扰组（57．86±3．91）pg／mL及对照组（59．55±3．57）pg／mL均明显降低，差异有显著性意义（P〈0．05）。[结论]构建的针对TNF-α和IL-1的siRNA表达框架能够明显抑制巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1，且干扰作用具有序列特异性。     

PHA-LAK/rIL-2疗法的应用与评价——60例实体瘤患者临床试验分析

获得较大量高细胞毒活性的LAK细胞,是LAK/IL-2继承性细胞免疫疗法的重要问题之一。为此我们进行了多年的实验研究,采用健康“O”型供血者外周血单个核细胞(PBMC)制备PHA-LAK细胞(即经PHA预刺激48小时然后用rIL-2诱导的LAK细胞),并与直接用rIL-2诱导的常规LAK细胞(C-LAK)的生物学特性进行了较全面的对比。结果发现PHA-LAK的增殖能力强,这与其IL-2R表达水平较高有关;同时PHA-LAK的细胞毒活性也高于常规LAK细胞。FACS表型分析表明:PHA-LAK的表型以CD_3~ⅠCD_8~Ⅰ为主,而常规LAK则以CD_3~ⅠNKH_1~Ⅰ为主,且PHA-LAK IL-2R的表达水平高于常规LAK。在此基础上,我们将PHA-LAK-/rIL-2应用于60例实体瘤患者的治疗,其中肾癌24例、恶性淋巴瘤5例、肝癌5例、肺癌12例、结肠癌5例及其它恶性肿瘤(包括膀胱癌、乳癌、胃癌、食道癌等)9例。     

PHA-LAK／rIL-2疗法的应用与评价——60例实体癌患者临床试验分析

获得较大量高细胞毒活性的LAK细胞，是LAK／IL-2继承性细胞免疫疗法的重要问题之一。为此我们进行了多年的实验研究，采用健康“O”型供血者外周血单个核细胞(PBMC)制备PHA-LAK细胞(即经PHA预刺激48小时然后用rIL-2诱导的LAK细胞)，并与直接用rIL-2诱导的常规LAK细胞(C-LAK)的生物学特性进行了较全面的对比。     

APOPTOSIS OF TUMOR CELLS IN LECTIN－DEPENDENTLYMPHOKINE－ACTIVATED KILLER CELLMEDIATED CYTOTOXICITY

ＡＰＯＰＴＯＳＩＳＯＦＴＵＭＯＲＣＥＬＬＳＩＮＬＥＣＴＩＮ－ＤＥＰＥＮＤＥＮＴＬＹＭＰＨＯＫＩＮＥ－ＡＣＴＩＶＡＴＥＤＫＩＬＬＥＲＣＥＬＬＭＥＤＩＡＴＥＤＣＹＴＯＴＯＸＩＣＩＴＹＤｏｎｇＨａｉｄｏｎｇ董海东；ＸｉｎｇＲｏｎｇ邢嵘；ＧｕｏＬｉａｎｙｉｎ...