PRAME基因在急性白血病中的表达及临床意义分析

本研究检测黑色素瘤优先表达抗原(PRAME)基因在不同类型急性白血病(acute leukemia,AL)中的表达及其与病情发展的相互关系.用建立的检测PRAME基因的SYBR Green Ⅰ荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(RQ-RT-PCR)方法,对55例急性白血病患者(急性髓系白血病43例、急性淋巴细胞性白血病9例、其它类型的白血病3例)的骨髓样本进行PRAME基因表达情况的检测.同时选择7例非恶性血液疾病患者的骨髓样本和8例正常人外周血样本作为阴性对照,并用白血病细胞系K562作为阳性对照.结果表明35例急性白血病患者中检测出不同水平的PRAME基因表达,在其余20例急性白血病患者及15例对照样本中均未检测出PRAME基因,总阳性率64%,两组之间具有非常显著的差异(p＜0.005).在35例PRAME基因阳性表达的患者中,AML 28例,阳性检出率为65%,其中以M3、M4和M2亚型的阳性检出率较高,分别为90%、70%、67%;ALL 5例,阳性检出率为56%.在31例融合基因阳性患者中,PRAME基因阳性患者为23例,而在24例融合基因阴性患者中,PRAME基因阳性患者达到12例.比较各种临床因素与PRAME表达水平的相关性未发现明显相关.短期观察5例PRAME基因阳性表达的患者显示出经化疗达到完全缓解(CR)后,患者PRAME基因表达均转阴,下降水平为63-23921/106×GAPDH拷贝.长期观察1例M3患者显示化疗后PRAME基因水平逐渐下降并转阴,患者至今仍处于CR状态.结论PRAME基因在65%的急性白血病中呈阳性表达,其中以M3、M4和M2亚型最常见,在正常个体和非恶性血液病患者中不表达.不同白血病个体之间PRAME基因表达水平不同,随病情缓解其表达水平降低或转阴.PRAME基因可以成为微小残留病(MRD)检测的一种分子标志.     

紫杉醇联合重组人粒细胞集落刺激因子动员 乳腺癌患者外周血干细胞的效果及影响因素

 目的研究紫杉醇联合重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）动员乳腺癌患者外周血干细胞（peripheral blood stem cell,PBSC）的效果及影响因素分析。方法2006年2月至2009年6月我科收治行紫杉醇动员的26例乳腺癌患者,紫杉醇（PTX,175 mg/m2 持续静脉滴注24 h）化疗后,白细胞降至1.0×109/L左右时使用rhG-CSF 5 μg /(kg·d) 动员至采集结束。并进一步分析患者年龄,化疗后白细胞最低数,采集前各类血细胞数,术后分期以及既往化疗等因素对采集单个核细胞（mononuclear cell,MNC）、CD34+细胞数的影响。结果白细胞计数于紫杉醇化疗后中位7d降至1.0×109/L 左右,皮下注射rhG-CSF中位4d进行外周造血干细胞采集,采集总MNC平均(7.89±1.45)×108/kg,采集总CD34+细胞平均(4.88±1.54)×106/kg。年龄与采集CD34+细胞数显著相关。而其他因素对MNC及CD34+细胞数均无显著影响（P>0.05）。所有患者均未出现严重不良反应。结论PTX（175 mg/m2 持续静脉滴注24h）联合rhG-CSF为转移性乳腺癌患者动员的有效安全方案。患者年龄显著影响CD34+细胞的采集数量。     

常见白血病融合基因筛查在白血病诊断与分型中的意义

目的:分析病人白血病细胞染色体畸变涉及的86种融合基因和临床白血病类型的相关性,探讨常见融合基因筛查法在临床诊断和分型中的应用价值.方法:收集161例初发或者复发的白血病患者及8例骨髓增生异常综合征(MDS)患者的骨髓细胞,提取RNA,用32条特异性引物逆转录为cDNA,利用白血病29种染色体畸变形成的融合基因的86种mRNA剪接变异体引物,分8管进行多重RT-PCR,筛查白血病融合基因.结合临床状态和形态学观察了解融合基因与白血病类型的关系.结果:白血病中115例(71%)分别检测出10种白血病常见融合基因,包括AMLl/ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、dupMLL、MLL/AF6、MLL/AF10、CBFβ/MYHll、BCR/ABL、Hoxll、Evil.其中52例慢性粒细胞白血病(CML)100%检出BCR/ABL;25例急性早幼粒细胞白血病(APL)中88%检出融合基因,其中21例APL检测出PML/RARα,1例APL检测出PLZF/RARα;AMLl/ETO阳性的17例急性白血病(AL)16例为FAB-M2亚型,1例为混合型白血病;CBFβ/MYH11阳性的4例AL 3例为FAB分型的M4,1例为M5,属于向粒单细胞系统分化的白血病.16例AL检测出MLL基因异常,其中MLL/AF6白血病均为FAB分型的M5,具有典型的原始单核细胞白血病的特征.17例急性淋巴细胞白血病(ALL)5例检测出BCR/ABL.8例MDS病人中2例检测出融合基因,其中AMLl/ETO阳性的MDS-RAEB很快发展为AML.结论:这种以多重RT-PCR为基础的白血病常见融合基因筛查法可以准确、快速而且可靠地确定白血病的分子类型,提供白血病诊断和治疗的依据.     

自体外周血造血干细胞支持下高剂量化疗对晚期乳腺癌患者的生活质量研究

目的分析自体外周血造血干细胞支持下高剂量化疗对于晚期乳腺癌化疗前后生活质量影响,为选择有效改善患者生活质量的干预措施提供依据。方法回顾性分析25例病例组行自体外周血造血干细胞支持下高剂量化疗的晚期乳腺癌患者临床资料,同期选取接受常规方案化疗的22例晚期乳腺癌患者为对照组。采用简明健康状况调查量表SF-36(MOS36-item short forum health survey)的缩减版本SF-12量表作为问卷调查表。在第1个时间点(T1)为治疗前,第2个时间点(T2)为第2周期高剂量化疗前和第4周期常规治疗前,第3个时间点(T3)为高剂量化疗结束3月随访时和常规剂量化疗结束后3月进行调查随访。采用t检验进行统计分析。结果高剂量化疗组和常规剂量组患者生活质量8个维度评分T2较T1均显著下降(P<0.05),T3较T1两组患者活力和社会功能维度仍显著下降(P<0.05),其他维度差异无统计学意义。T2时间点高剂量化疗组较常规剂量化疗组总体健康、生理功能、活力和社会功能维度显著下降(P<0.05),T1和T3时间点高剂量化疗组和常规剂量组差异无统计学意义。结论自体外周血造血干细胞支持下高剂量化疗导致乳腺癌患者总体健康、生理功能、活力和社会功能显著下降,但患者高剂量化疗缩短了治疗时间,使患者可更快的恢复正常生活。     

乳腺癌恶性胸腔积液的临床特征及预后因素分析

目的研究有症状乳腺癌恶性胸腔积液患者的临床特征及影响疗效的相关因素。方法回顾性总结分析了2008年11月至2010年12月我科收治的36例有症状胸腔积液乳腺癌患者的一般临床资料[年龄、东部肿瘤协作组(ECOG)、手术病理分期、手术后无病生存期(DFS)、胸腔积液是否为初次复发部位、是否复发后一线化疗、是否伴有其他积液、是否双侧胸腔积液],胸腔积液的情况[是否血性胸腔积液、胸水细胞数、胸水单核细胞数、乳酸脱氢酶(LDH)、癌胚抗原(CEA)、CA153、CA125、蛋白、胸水量]及胸腔积液的治疗情况(胸腔局部治疗方式、胸腔局部化疗药物、是否使用IL-2)中各种因素对于胸腔积液疗效及控制时间的影响。结果患者手术至出现胸腔积液的中位时间44月(0～180月)。手术至出现胸腔积液的时间>44月有效率显著高于手术后DFS≤44月者(P=0.046),分别为66.7%,33.3%;复发后一线化疗者有效率显著高于复发后二线及以上化疗者(P=0.044),分别为65.0%和31.3%;胸水单核细胞数>1×106/L的患者有效率显著高于胸水单核细胞数≤1×106/L(P=0.046)的患者,分别为66.7%,33.3%。胸腔积液中位控制时间为4月,胸腔积液LDH≤400 u/ml较LDH>400 u/ml的患者的胸腔积液控制时间显著延长(P=0.032),胸腔积液中位控制时间分别为6月和2月。结论胸腔积液是乳腺癌患者常见的临床表现,术后DFS时间长、复发后一线化疗及胸水单核细胞高者有效率高,胸腔积液LDH浓度高是胸水控制时间短的不良预后因素。     

多西他赛联合塞替派与多西他赛联合卡培他滨治疗转移性乳腺癌的随机、对照临床研究

目的：比较多西他赛联合塞替派方案和多西他赛联合卡培他滨方案治疗转移性乳腺癌的临床疗效及其安全性。方法：选择北京大学临床肿瘤学院乳腺肿瘤内科2006年8月至2008年9月收治的女性乳腺癌患者共46例,采用多西他赛联合塞替派（A组）或卡培他滨（B组）方案进行随机、对照临床治疗试验, A组第1、8天多西他赛35 mg/m² 静脉滴注,第1天塞替派60～65 mg/m² 静脉滴注,B组第1、8天多西他赛35 mg/m²静脉滴注,第1~14天卡培他滨1 000 mg/m²,口服,每日2次。21 d为1个周期,至少应用2个周期。结果：多西他赛联合塞替派组22例,多西他赛联合卡培他滨组24例,两组患者基线情况一致。可评价疗效多西他赛联合塞替派组21例,多西他赛联合卡培他滨组22例。两组疗效分别为部分缓解9.52% vs. 27.27%（2/21例,6/22例）,稳定52.38% vs. 31.82%（11/21例,7/22例）,进展38.10% vs. 40.91%（8/21例,9/22例）,疾病控制率分别为61.90% vs. 59.09%（13/21例,13/22例）,中位无进展生存期分别为7.9个月（95%CI 0.77～15.03）vs. 8.3个月（95%CI 4.01～12.59）,1年生存率分别为88.2% vs. 81%,P值均>0.05,每两组间差异无统计学意义。无化疗相关死亡病例。多西他赛联合塞替派组和多西他赛联合卡培他滨组最常见的不良反应为骨髓抑制,主要不良反应Ⅲ~Ⅳ度发生率分别为白细胞减少45.45% vs. 26.09%,中性粒细胞减少45.45% vs. 21.74%,血小板减少9.09% vs. 0%,手足综合征0% vs. 13.04%,P值均>0.05,每两组间差异无统计学意义。结论：多西他赛联合塞替派方案治疗转移性乳腺癌有一定近期疗效,不良反应可耐受,可以作为经济、有效的解救方案。     

多西他赛联合重组人粒细胞集落刺激因子动员乳腺癌患者外周血干细胞的效果及影响因素分析

 目的研究多西他赛联合重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）在乳腺癌患者动员外周血干细胞 （peripheral blood stem cell,PBSC）的效果及影响因素。方法2006年2月—2009年6月我科收治的55例 行多西他赛（商品名多帕菲,TXT,120 mg/m2 持续静脉滴注3 h）动员的乳腺癌患者,化疗后白细胞降至 1.0×109/L左右时使用rhG-CSF 5 μg /(kg·d) 动员至采集结束。并进一步分析患者年龄、化疗后白细 胞最低数、采集前各类血细胞数、内脏、骨转移情况及化、放疗情况对采集单个核细胞（mononuclear cell,MNC）和CD34+细胞的影响。结果多西他赛化疗动员后中位7d白细胞降至1.0×109/L 左右,皮下注 射rhG-CSF中位3d,采集总MNC平均(5.51±1.24)×108/kg,采集总CD34+细胞平均(2.90±1.38)×106/kg 。年龄、化疗后白细胞最低数与采集CD34+细胞均显著相关（P<0.05）。化疗的周期数≤6的患者采集平均 CD34+细胞数较周期数≥6患者显著增高（P<0.05）。无1例患者出现严重不良反应。结论TXT（120 mg/m2 持续静脉滴注3 h）联合rhG-CSF为转移性乳腺癌患者动员的有效安全方案。患者年龄、既往化疗周期数显 著影响患者CD34+细胞的采集数量。患者化疗后白细胞最低数可作为采集CD34+细胞数量的预测指标。     

GCDFP-15对乳腺癌卵巢转移的诊断价值

目的 探讨特异性大囊肿病液体蛋白-15 (gross cystic disease fluid protein-15, GCDFP-15)和mammaglobin在乳腺癌卵巢转移诊断中的价值。方法 收集1995年11月～2007年12月我院收治的4704例乳腺癌中12例经病理证实的乳腺癌卵巢转移患者及10例乳腺和卵巢双原发癌患者的临床病理资料,以免疫组织化学法探讨最具有鉴别诊断价值的分子标志。结果 乳腺癌卵巢转移患者的中位年龄为45岁[（28～53)岁]。在诊断卵巢转移之前,12例(100％)均有卵巢外转移。该病术前影像学检查阴性者为9例（75％）,术前漏诊率亦高达75％。乳腺癌发生卵巢转移以双侧多见(9例),仅表现为镜下转移的占75％。乳腺癌卵巢转移患者的GCDFP-15和mammaglobin的表达较卵巢原发上皮性癌患者的高,分别是75％、0(P＜0.001)和50％、0(P＝0.033),差异有统计学意义。血清学检查乳腺癌卵巢转移患者和乳腺、卵巢双原发癌患者的CA153、CA125均有上升,但CA153数值无差异（128.6u/mlvs.56.48u/ml,P＝0.315CA125在乳腺癌卵巢转移患者轻微升高,中位数值81.88u/ml [（47.15～966.9)u/ml],在卵巢原发癌患者中明显升高,中位数值1073u/ml [（134.3～1821)u/ml],差异有统计学意义（P＝0.003）。结论 乳腺癌卵巢转移常见于绝经前年轻女性患者,且大部分患者在出现卵巢转移以前已经有其他部位的转移。卵巢转移病变一般非常微小,通常是镜下转移,术前容易被误诊或漏诊;免疫组织化学联合检测特异性分子GCDFP-15、mammaglobin、WT1和CA125有助于与原发性卵巢癌相鉴别,卵巢双侧病变及血清CA125的轻微上升也有助于诊断乳腺癌的卵巢转移。     

米氮平预防大剂量顺铂化疗的恶心和呕吐的临床研究

目的观察米氮平对大剂量顺铂化疗引起的恶心和呕吐的预防效果和安全性。方法采用自身交叉对照方法。63例大剂量顺铂（60 mg/m2或75 mg/m2）联合吉西他滨化疗者在第一周期时随机分配至对照（A）周期或米氮平（B）周期;第2周期用药互相交叉。A和B两周期化疗方案相同。d1~d5代表化疗周期的第1~5天。恶心、呕吐或食欲减退明显减少的患者比例用控制率表示;完全控制（complete response,CR）率代表无恶心、无呕吐或无食欲减退的比例。共观察d1~d5的恶心、呕吐、食欲减退的控制率。A周期采用恩丹西酮联合地塞米松二药预防恶心和呕吐;B周期在A周期用药基础上联合米氮平。药物用法：（1）恩丹西酮8 mg,iv,每天3次,于d1和d2给药;（2）地塞米松5 mg,iv,每天1次,于d1和d2给药;（3）米氮平15 mg,每天1次,于d1~d5睡前口服;（4）吉西他滨1000 mg/m2或1250 mg/m2,iv,于d1、8给药;（5）顺铂60 mg/m2或75 mg/m2,iv,分2天（于d1、d2）给药。结果米氮平（B）周期与A周期的恶心、急性呕吐、迟发性呕吐、食欲减退控制率分别为71.4%（45/63例）与65.1%（41/63例）（P〈0.01）、79.4%（50/63例）与68.3%（43/63例）（P〈0.01）、88.9%（56/63例）与61.9%（39/63例）（P〈0.01）、50.8%（32/63例）与25.4%（16/63例）（P〈0.05）。B与A周期的恶心、急性呕吐、迟发性呕吐、食欲减退控制率的CR率分别为52.4%（33/63例）与46.0%（29/63例）（P〉0.05）、74.6%（47/63例）与60.3%（38/63例）（P〈0.01）、49.2%（31/63例）与22.2%（19/63例）（P〈0.01）、47.6%（30/63例）与23.8%（15/63例）（P〈0.05）。B与A周期之间迟发性呕吐控制率差值明显高于急性呕吐控制率差值（27.0%vs.11.1%,P〈0.01）。B与A周期中均未见严重副作用。结论米氮平可有效控制大剂量顺铂化疗所致的恶心、呕吐和食欲减退;而迟发性呕吐改善相对更明显。     

非小细胞肺癌治疗原则、现状和进展

临床上根据肿瘤的分子特征、病理和分期来决定肺癌治疗策略。实体瘤病情程度大致分为可行根治手术、局部晚期和转移性（主要指血行转移）肿瘤三类。肿瘤驱动基因与临床的关系明晰,使非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer,NSCLC）的治疗模式发生了革命性变化,患者生存得到延长。