食管鳞癌中LncRNA DLEU1的表达及对食管鳞癌细胞增殖和迁移的影响

目的研究长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因1(DLEU1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达,及其对肿瘤细胞增殖和迁移的影响。方法收集58例手术切除的ESCC及其相应癌旁组织,RT-qPCR检测ESCC组织和细胞中DLEU1的表达水平。Log rank Test法分析ESCC组织中DLEU1的表达与患者临床病理特征的关系。Kaplan-Meier法分析DLEU1表达与ESCC患者生存的相关性。多变量Cox回归模型评估DLEU1对ESCC患者预后的影响。采用CCK-8和划痕愈合实验检测DLEU1对Eca9706细胞增殖和迁移的影响。结果ESCC组织中DLEU1高表达(P<0.01),其高表达与ESCC患者肿瘤大小、TNM分期和淋巴结转移呈显著相关性(均P<0.05)。DLEU1高表达与ESCC患者预后不良呈负相关(P<0.01),且是影响ESCC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。与对照组相比,体外敲低DLEU1的表达可显著抑制Eca9706细胞的增殖和迁移能力(P<0.01)。结论DLEU1在ESCC组织中高表达,是影响ESCC患者预后的独立危险因素,且具有促进肿瘤细胞增殖和迁移的能力。     

miR-142-5p通过影响上皮间质转化抑制肺腺癌H1650细胞的侵袭与迁移

目的：探讨肺腺癌组织中miR-142-5p的表达及其对H1650细胞增殖、侵袭、迁移及上皮间质转化（epithelieal-mesenchymal transition，EMT）的影响及其作用机制。方法：收集2014年1月至2015年1月在河北医科大学第四医院胸外科行肿瘤切 除并经病理证实的107例肺腺癌患者的癌组织及其癌旁组织标本，以及人肺腺癌细胞系H1650、HCC827、 A549、 H1975、PC9和人 支气管上皮细胞BEAS-2B， 用qPCR实验检测肺腺癌组织及细胞中miR-142-5p的表达水平及其与患者临床特征的关系。分别用 miR-142-5p模拟物（mimics）、miR-阴性对照质粒（miR-NC）转染H1650细胞后， 用CCK8、细胞划痕愈合和Transwell侵袭实验分 别检测H1650细胞的增殖、侵袭和迁移能力。使用生物信息学工具预测miR-142-5p的靶基因，通过双荧光素酶报告基因实验验 证miR-142-5p对靶基因的调控作用，Western blotting检测细胞周期蛋白依赖性激酶5（cyclin-dependent kinase 5，CDK5）及EMT 相关蛋白的表达水平。结果：肺腺癌组织及细胞系中miR-142-5p表达水平显著低于癌旁组织及BEAS-2B细胞（均P<0.01）；107 例肺腺癌组织中， 61例（57.01%）低表达miR-142-5p，其表达水平与患者的TNM分期、淋巴结转移密切相关（均P<0.01）。转染 miR-142-5p模拟物后， H1650细胞中miR-142-5p高表达，细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低（均P<0.05或P<0.01）。生物信息 学工具预测CDK5是miR-142-5p的靶基因，经双荧光素酶报告基因验证，miR-142-5p可显著降低H1650细胞中CDK5的表达水 平，显著提高E-cadherin表达，降低N-cadherin和Snail的表达水平（均P<0.01）。结论：miR-142-5p在肺腺癌组织和细胞中呈低表 达状态，其通过下调CDK5表达影响EMT抑制H1650细胞的侵袭与迁移能力。     

运用MALDI-TOF MS方法建立食管癌患者血清蛋白指纹图谱诊断模型

 目的 本研究利用基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱（matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS）技术检测食管癌患者血清蛋白指纹图谱,建立食管癌诊断模型,探讨其临床应用价值。方法采用弱阳离子蛋白芯片（WCX磁珠）对血清进行分析前处理,运用MALDI-TOF MS技术检测119例标本（75例食管癌和44例健康对照）血清蛋白质谱图,通过蛋白芯片数据分析系统进行数据处理,以遗传算法结合支持向量机运算建立食管癌与健康对照组、早期食管癌与中晚期食管癌组诊断模型,随机抽取79例建模标本（50例食管癌和29例健康对照）进行训练与交叉验证,并选择新病例（30例食管癌和23例健康对照）血清标本进行测试。结果采集食管癌患者和健康对照者的血清蛋白质纹图谱,经数据分析找到75个有显著性差异的质荷比峰（P<0.05）和71个有非常显著性差异的质荷比峰（P<0.01）;软件包运算后,建立两个诊断模型：模型1：区分食管癌与健康对照组,由11个蛋白质峰（2 087,2 210,3 258,3 973,4 283,4 645,4 092,4 210,1 985,2 818和2 046 Da）组成,该诊断模型检测食管癌的敏感度为92.4%,特异性为87.4%;模型2：区分早期食管癌与中晚期食管癌组,由8个蛋白质峰（4 195,4 074,4 268,2 106,4 905,5 965,2 863 和 3 953 Da）组成,该诊断模型检测食管癌的敏感度为87.5%,特异性为89.7%。结论运用MALDI-TOF MS技术结合磁珠分选的方法可检测食管癌血清质谱图,建立具有较高的敏感度和特异性食管癌诊断模型。     

SRSF1通过调控VEGFA mRNA可变剪接促进食管鳞状细胞癌Eca9706细胞增殖、侵袭和迁移

背景与目的:丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)与肿瘤的发生、发展密切相关.食管癌是常见的消化系统恶性肿瘤,但SRSF1在食管癌中的作用罕有报道.检测SRSF1在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carc...     

lncRNA DGCR5通过上调EGFR表达促进食管鳞状细胞癌TE1细胞的恶性生物学行为

目的：探讨长链非编码 RNA（long non-coding RNA，lncRNA）DiGeorge 综合征临界区基因 5（digeorge syndrome critical region gene 5，DGCR5）对食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell carcinoma，ESCC）TE1细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法：采用qPCR检测ESCC细胞系 TE1、Yes-2、KYSE150 和 Eca9706 中 DGCR5 的表达水平。将siRNA-DGCR5（si-DGCR5）和阴性对照组（si-NC）质粒转染进TE1细胞，用CCK-8、划痕愈合、Transwell小室法分别检测TE1细胞增殖、迁移和侵袭能力。依据GEPIA数据库资料分析食管癌组织中 DGCR5 表达与细胞表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor，EGFR）的相关性，并用qPCR和Western blotting（WB）检测ESCC细胞系中EGFR mRNA和蛋白表达水平，进一步用WB实验检测转染 si-DGCR5 前后 TE1细胞中EGFR蛋白的表达水平。结果：DGCR5 在 ESCC 细胞系中均高表达（均 P<0.01），转染siDGCR5组TE1细胞中DGCR5的表达水平明显低于si-NC组（P<0.01）。敲低DGCR5后,TE1细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著低于si-NC组细胞（均 P<0.01）。GEPIA 数据库的分析显示，食管癌组织中 DGCR5 表达水平与 EGFR 的表达呈正相关（P<0.01）。敲低DGCR5后TE1细胞中EGFR蛋白表达水平明显下降（P<0.01）。结论：lncRNA DGCR5在ESCC细胞中呈高表达，可能通过上调EGFR表达来促进TE1细胞的增殖、侵袭和迁移等恶性生物学行为。     

c-Myc 和 Bin1 在人食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的： 研究人食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancer, ESCC）组织及其癌旁组织中 c-Myc和 Bin1 基因的表达情况,并分析其临床意义。 方法： 收集2013年4月至2014年3月在河北医科大学第四医院胸外科行肿瘤切除并经病理证实的ESCC患者肿瘤组织和相应癌旁组织标本各54例,使用RT-PCR和免疫组织化学法检测ESCC组织和癌旁组织中c-Myc和 Bin1 基因的mRNA和蛋白的表达。 结果： 与癌旁组织相比,ESCC组织中的 c-Myc mRNA表达水平和蛋白阳性表达率均显著升高\[（0.34±0.29） vs （0.17±0.16）, P <0.001;55.56% vs 33.33%, P =0.033\], Bin1 mRNA表达水平和蛋白阳性表达率均显著降低\[（0.25±0.19） vs （0.33±0.20）, P <0.001;57.41% vs 84.48%, P =0.007\]。ESCC组织中 c-Myc mRNA的表达与 Bin1 mRNA的表达呈显著负相关关系（ r =0.790, P <0.001）,c-Myc蛋白表达与Bin1蛋白表达也呈显著负相关关系（ P =0.019）。c-Myc和 Bin1蛋白表达均与患者TNM分期、肿瘤侵犯深度、分化程度、淋巴结转移相关。 结论： 人ESCC患者肿瘤组织中c-Myc呈高表达,而Bin1呈低表达,两者表达呈负相关,均与ESCC进展和淋巴结转移有关联。     

过继性免疫治疗对非小细胞肺癌患者外周血T细胞亚群的影响

目的 研究细胞因子诱导的杀伤（cytokine-induced killer,CIK）细胞治疗对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者外周血T细胞亚群及一般情况的影响。方法 采集非小细胞肺癌患者外周血,常规方法体外扩增CIK细胞,分三次回输患者体内,流式细胞仪检测非小细胞肺癌患者治疗前与治疗3次后T细胞亚群的变化,分析其与健康对照组相比外周血T细胞亚群的差异,并观察CIK细胞治疗前后患者一般情况变化。结果 与对照组相比,NSCLC患者外周血中CD3⁺ T 细胞比例、CD3⁺CD4⁺T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺ 比值显著下降（P<0.05）,CD3⁺CD8⁺ T细胞比例显著升高（P<0.05）。CIK细胞治疗后与治疗前,CD3⁺ T 细胞比例、CD3⁺CD4⁺ T细胞比例、CD4⁺/CD8⁺ T细胞比值显著升高（P<0.05）,CD3⁺CD8⁺ T细胞比例显著降低（P<0.05）。CIK细胞治疗后与对照组相比,CD3⁺ T 细胞比例、CD4⁺/CD8⁺T细胞比值显著下降（P<0.05）。CD3⁺CD4⁺ T细胞比例、CD3⁺CD8⁺ T细胞比例升高,但差异无统计学意义（P>0.05）。CIK细胞治疗前Tregs较对照组显著升高（P<0.05）。CIK细胞治疗后与治疗前相比,Tregs比例显著下降（P<0.05）。结论 CIK细胞输注治疗可以增强NSCLC患者的免疫功能,并改善患者的一般情况,提高生活质量,且未见明显不良反应。     

lncRNA DGCR5 在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨长链非编码RNA DiGeorge 综合征临界区基因5（digeorge syndrome critical region gene 5，DGCR5）在食管鳞状细胞癌（esophageal squamous cell cancinoma，ESCC）组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性。方法：利用生物信息学方法对TCGA数据库中ESCC数据集的DGCR5 表达进行分析。收集2016 年8 月至2017 年3 月河北医科大学第四医院手术切除60 例ESCC患者的癌及癌旁组织标本，用qPCR检测ESCC组织中DGCR5 的表达水平，分析DGCR5 表达与ESCC患者临床病理特征和预后的相关性。结果：TCGA数据库分析结果显示，DGCR5 在ESCC组织中的表达水平显著高于正常食管组织（P<0.01）。ESCC组织中DGCR5 表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。DGCR5 表达水平与ESCC患者TNM分期和淋巴结转移呈显著性相关（均P<0.05）。Kaplan-Meier 单因素分析显示，高表达DGCR5 的ESCC 患者2 年生存率显著低于低表达DGCR5 患者（P<0.05）。结论：DGCR5 在ESCC组织中呈高表达状态，共表达与TNM分期、淋巴结转移及预后不良密切相关，可能成为ESCC早期诊断及预后判断的分子标志物。     

五味子提取物预防辐射所致免疫损伤的实验研究

目的:研究中药五味子(Schisandra Chinensis,SC)提取物对辐射所致小鼠免疫功能的影响,探讨SC对辐射所致免疫功能损伤的保护作用。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为SC预处理组(SC灌胃后照射)、生理盐水组(NS灌胃后照射)、SC对照组(只给SC,不照射)和正常对照组(只给NS,不照射)。6 Gy~(60)Co照射后24 h进行外周血白细胞和淋巴细胞计数;流式细胞仪检测小鼠外周血中CD4~+、CD8~+T细胞的百分比,用免疫浊度法检测小鼠血清IgG及补体C3的含量。结果:与正常对照组相比,NS组照射24 h后外周血白细胞总数[(3.73±1.05)×10~9]和淋巴细胞数量[(2.06±0.57)×10~9]均明显下降(P0.01),而SC预处理组白细胞总数[(6.43±0.76)×10~9]和淋巴细胞数量[(4.15±0.95)×10~9]较NS均明显升高(P0.01);照射后小鼠外周血中CD3~+、CD4~+和CD8~+T细胞百分比、IgG及补体C3水平较正常对照组明显降低(P0.01);SC预处理组较NS组小鼠外周血中CD4~+和CD8~+T细胞绝对值、IgG及补体C3水平均明显升高(P0.01)。结论:SC提取物能够预防辐射所致淋巴细胞减少和免疫功能损伤。     

桥接整合因子1在上皮性卵巢癌组织和细胞中的表达及其临床意义

目的:探讨桥接整合因子1 (BIN1)在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达及其临床意义,以及BIN1对EOC细胞A2780增殖、迁移和侵袭的影响.方法:收集2017年7月至2018年1月河北医科大学第四医院手术切除的67例EOC患者的肿瘤组织及同期因其他妇科疾病手术切除的30例非肿瘤患者的卵巢组织(正常对照组)标本.用...