舒林酸在防治小鼠大肠癌中对p53和 p21WAF1影响的初步研究

目的：细胞凋亡受到抑制与大肠癌的发生有密切联系。近年来发现长期应用舒林酸等非甾体抗炎药（NSAID）对人的结肠癌、直肠癌和癌前病变的发生发展有预防作用。本实验试图通过对凋亡调控基因的观察，初步探讨舒林酸抗肿瘤作用可能存在的分子机制。方法：利用二甲肼诱发的小鼠实验性大肠癌动物模型，采用TUNEL原位杂交和免疫组化染色的方法，分别标记细胞凋亡、p53、p21阳性细胞，多阶段地动态观察诱癌过程中蛋白表达的变化和舒林酸对它们的影响。结果：p53蛋白表达阳性细胞密度随着病变加重而增加，p21阳性细胞密度升高趋势不明显，预防组、治疗组的p53和p21阳性率都与模型组无显著性差异（P＞0．05）。预防组和治疗组中p53低于模型组（P＜0．05），p21表达则高于模型组（P＜0．05）。结论：舒林酸可以通过上调p21的表达，抑制突变型p53的表达，诱导细胞凋亡，抑制肿瘤形成和进展。     

应用小干扰RNA下调CXCR4抑制乳腺癌增殖及迁移

目的:验证CXCR4对乳腺癌细胞增殖及迁移功能的影响.方法:以Western-blot筛选出高表达CXCR4的乳腺癌细胞系MDA-MB-231作为研究对象,将合成的CXCR4-siRNA序列转染至细胞内,下调CXCR4表达,通过Western-blot验证干扰效果,利用细胞增殖实验和划痕实验检测下调组与阴性对照组细胞的增殖及迁移功能.结果:MDA-MB-231细胞表达CXCR4水平较高,小干扰RNA下调CXCR4基因表达效果好,同时下调的CXCR4基因表达的细胞增殖能力低于阴性对照组(P＜0.01),且迁移能力有所下降.结论:下调CXCR4对乳腺癌转移及增殖有一定程度的抑制作用.     

急性炎症对黑色素瘤血管生成的影响作用研究

目的：研究急性炎症对黑色素瘤血管生成的影响。方法：C57BL小鼠,构建B16F10小鼠黑色素瘤动物模型,待肿瘤生长至0．8cm×0．8cm×0．8cm时构建伤口模型,分为单纯肿瘤组、同侧伤口＋肿瘤组（局部组）和对侧伤口＋肿瘤组（全身组）,比较肿瘤微血管密度（MVD）,免疫组织化学染色检测肿瘤组织VEGF的表达。结果：局部组和全身组肿瘤微血管密度明显低于对照组,结果具有统计学意义（P〈0．05）;VEGF阳性表达率在局部组和全身组均低于对照组（P〈0．05）。结论：急性炎症可影响肿瘤组织VEGF的表达,明显抑制黑色素瘤血管生成。     

大肠上皮恶性转化不同阶段中Fas/FasL表达及在凋亡逃逸中的意义

目的 :试图通过对大肠黏膜上皮恶性转化不同阶段中Fas及其配体FasLmRNA的表达及上皮和浸润性淋巴细胞凋亡变化规律的观察 ,探讨大肠癌中Fas反击机制的可能的分子机制。方法 :收集石蜡包埋的大肠腺癌组织37例 ,腺瘤恶变组织26例 ,管状绒毛状腺瘤30例 ,管状腺瘤24例 ,以6例非肿瘤大肠黏膜作为对照。通过原位杂交及TUNEL等技术 ,原位观察不同病变组织大肠上皮中的FasmRNA,FasLmRNA及细胞凋亡的密度及相互关系。结果 :随着病程进展 ,FasmRNA在腺瘤中有上升趋势 ,而在恶性病变中有下降趋势(P<0.001),FasLmRNA有逐渐上升趋势 (P<0.001) ,局部凋亡的浸润性淋巴细胞密度有逐渐上升趋势(P<0.01),凋亡上皮细胞密度在腺瘤中明显升高 ,在非肿瘤黏膜及恶性病变中较低 (P<0.001)。腺癌中FasLmRNA阳性表达细胞密度与局部凋亡的浸润性淋巴细胞密度呈正相关(r=0.672,P<0.001)。结论 :在大肠上皮恶变进程中 ,Fas反击机制是逐步形成的 ,癌细胞表达FasL,并通过Fas -FasL相互作用 ,促使浸润性淋巴细胞凋亡而逃逸机体的免疫监视。而且癌细胞可下调Fas表达 ,抵御免疫效应细胞及癌细胞自身表达FasL所传递的死亡信号 ,形成“Fas抵抗” ,并因此抑制癌细胞凋亡。推测“Fas反击”和与之配合的“Fas抵抗”机制 ,与大肠癌的形成及进展     

中心体相关激酶Nek2与乳腺癌前病变及早期癌变的相关性研究

目的:探讨中心体相关蛋白激酶Nek2蛋白及DNA水平在乳腺上皮恶变过程中各阶段的作用。方法:选取正常乳腺组织20例、重度不典型导管上皮增生/外周型乳头状瘤病伴导管上皮不典型增生20例、导管内癌20例,浸润性导管癌20例。采用免疫组织化学的方法分别检测4组样本组织冻切片Nek2蛋白的表达情况,采用荧光实时定量聚合酶链式反应检测4组样本组织Nek2拷贝数扩增情况。结果:Nek2蛋白表达在4组样本之间差异性显著(P=0.000)。荧光实时定量PCR结果显示Nek2的DNA拷贝数在各组之间的表达有统计学差异(P=0.000)。Nek2蛋白表达随着肿瘤恶性程度的提高而增加,同时DNA拷贝数随着肿瘤恶性程度的提高而扩增,二者存在正相关性(r=0.887,P<0.01)。结论:Nek2蛋白表达在导管内癌组显著高于癌前病变组,说明Nek2蛋白表达免疫组化检测结果可作为乳腺癌早期诊断和高危人群筛选的辅助指标。Nek2基因扩增同蛋白表达呈正相关性,变化趋势一致,提示蛋白过表达可能来自于基因扩增。Nek2异常同中心体异常变化趋势一致,作为中心体相关激酶,通过对中心体的调节作用,可造成中心体数量、结构和功能的异常,从而导致肿瘤的发生。     

肝癌血管生成拟态分子机制的研究

目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)中血管生成拟态(VM)形成的分子机制.方法 收集临床资料和随访资料完整、手术切除并死于HCC的病例99例,对99例HCC进行VEGF、MMP-2、MMP-9免疫组织化学染色,采用Mattern积分法评价三者在99例HCC中的表达,通过比较VM组和无VM组HCC中三者表达水平的差异来研究VM形成的分子机制.结果 MMP-2与MMP-9主要以弥漫型或颗粒状在肝癌细胞胞浆内表达,在癌巢的周边伴有组织浸润的部位高表达;VM组比无VM组有更高的MMP-2(t=3.184,P=0.002)与MMP-9的表达(Z=2.659,P=0.009);VEGF阳性表达主要位于肝癌细胞胞浆内,毗邻坏死区域的肝癌细胞有较强表达,HCC中VM组与无VM组之间VEGF表达的差异不具有统计学意义(t=-1.387,P=0.169).结论 MMP-2、MMP-9在肝癌细胞中高表达,降解并重塑细胞外基质,可能参与VM的形成.     

免疫组化指标在宫颈微偏腺癌诊断中的应用

宫颈微偏腺癌（MDA)是一种原发于宫颈的特殊类型腺癌,发病率较低。虽然肿瘤细胞分化很好,但是该种肿瘤患者预后极差。由于缺乏恶性细胞学特征,细胞学检查（TCT）几乎无法做出诊断;且由于活检组织标本较小、腺体形态及结构均类似于正常宫颈腺体,活检病理检查也极易漏诊。近年来多项免疫组化指标的联合应用有助于对MDA做出正确的病理诊断,本文对这些免疫组化指标在宫颈微偏腺癌中的应用进行了归纳总结。     

CD105和VEGF在水泡状胎块中的表达与意义

目的:研究CD105及VEGF在水泡状胎块与水肿性流产的绒毛滋养细胞中的表达差异及意义。方法:采用免疫组化SP法检测20例正常妊娠(NP),30例水肿性流产(HA),20例部分性水泡状胎块(PHM)和20例完全性水泡状胎块(CHM)患者绒毛滋养细胞中CD105和VEGF的表达水平。结果:①CD105在NP、HA、PHM和CHM中的阳性表达率分别是55.00%、36.67%、85.00%、95.00%,CD105在HM中阳性表达率明显高于HA和NP(P<0.05);②VEGF在NP、HA、PHM和CHM中的阳性表达率分别是50.00%、33.33%、25.00%、15.00%,VEGF在HM中阳性表达率低于HA和NP(P<0.05);③经Spearman等级相关检验,CD105和VEGF在HA与HM中表达呈负相关(r=-0.447,P<0.05)。结论:CD105和VEGF可作为标记绒毛滋养细胞的免疫组化标记物,用于水泡状胎块和水肿性流产的鉴别诊断。     

P16 P53 CyclinD1在卵巢浆液性癌中的表达及意义

  目的  探讨卵巢高、低级别浆液性癌中P16蛋白、P53蛋白、CvclinDl蛋白的表达情况及意义。  方法  应用免疫组化法对45例卵巢浆液性癌(低级别19例, 高级别26例)及25例卵巢交界性浆液性囊腺瘤组织进行P16、P53、CvclinD1蛋白检测, 并分析其意义。  结果  P53在低级别癌中阳性表达率为5%, 显著低于高级别癌中的69%(P < 0.05), 而CyclinD1在低级别癌中阳性表达率为89%, 显著高于高级别癌中的15%(P < 0.05), P53和CvclinDl表现为负相关(r=0.211)。P16在低、高级别癌肿的阳性表达率分别为84%和92%, 高级别癌阳性率高于低级别癌, 但差异无统计学意义(P>0.05)。  结论  P53和CyclinDl在卵巢高、低级别浆液性癌中的表达有显著差异, 对于形态上介于高、低级别之间的浆液性癌, 二者可能成为分级的辅助手段。