SELDI-TOF-MS技术在预测肿瘤化疗敏感性中的应用

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术是新一代蛋白质组研究技术,它使用特殊的增强表面直接捕获待测样本中的蛋白质分子,能够快速、敏感地发现并鉴定蛋白,提供一个高通量和高灵敏度的检测平台。最初主要应用于疾病早期诊断相关的蛋白质标志物。目前在预测肿瘤化疗敏感性方面的应用也逐渐增多。本文除对表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术做详尽的介绍外,重点阐述其在预测肿瘤化疗敏感性方面的应用,并对其优缺点和发展前景进行评估。     

非小细胞肺癌化疗疗效相关血清小分子蛋白的初步研究△

目的:寻找非小细胞肺癌化疗耐药与敏感患者血清中的差异小分子蛋白,通过分离纯化进行质谱鉴定。方法:用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,分别检测14例化疗敏感和26例化疗耐药的非小细胞肺癌血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质谱。Clinprot磁珠分离纯化后,进行基质辅助激光吸附电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)鉴定。结果:SELDI-TOF-MS检测到100个有效蛋白峰,其中P<0.05的差异蛋白峰23个,联合质荷比(m/z)为3193.14Da和3263.61Da的差异蛋白建立预测非小细胞肺癌化疗耐药模型,敏感性90.23%,特异性98.56%。进行MALDI-TOF/TOF-MS鉴定,质荷比(m/z)为3263.61Da的蛋白为DNA结合相关蛋白。结论:SELDI-TOF-MS技术可以筛选非小细胞肺癌化疗疗效相关蛋白。     

双腔气管插管致双侧支气管损伤1例报告并文献复习

双腔气管插管导致气管及支气管膜部的穿透性损伤是一种较为罕见、危害性极大的置管并发症。如处理不及时,可能造成严重后果,甚至死亡。本文以一例双腔导管插管后致左右     

nm23-H1及热休克蛋白27在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

 目的　分析nm23-H1和热休克蛋白27（HSP27）在非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展及转移中的作用。方法　应用免疫组织化学法检测75例NSCLC组织及28例良性肺病变中nm23-H1和HSP27的表达情况,并将检测结果与临床病理特征进行综合分析。结果　nm23-H1和HSP27的表达主要定位于细胞质,nm23-H1和HSP27在NSCLC中表达的阳性率分别为41.3 %（31／75）和80.0 %（60／75）,明显高于良性肺病变7.1 %（2／28）和46.4 %（13／28）（χ2＝10.946,P＝0.001;χ2＝11.131,P＝0.001）。NSCLC中HSP27蛋白的表达与肿瘤分化程度密切相关（χ2＝4.191,P＝0.041）。肺癌组织中nm23-H1、HSP27 的表达水平有相关性（r＝0.284,P＝0.013）。结论　nm23-H1、HSP27与NSCLC的发生、发展有关,二者联合检测对肺癌的诊断和生物学行为判断有一定的意义。     

组织蛋白酶-B和MMP-9在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨组织蛋白酶-B（CB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在非小细胞肺癌发生、发展及转移中的作用。方法应用免疫组织化学法检测75例非小细胞肺癌组织及28例肺良性病变中CB和MMP-9的表达情况,并与临床病理特征进行综合分析。结果 CB和MMP-9的表达主要定位于细胞质,CB和MMP-9在非小细胞肺癌中表达的阳性率明显高于肺良性病变;且MMP-9的表达与有无淋巴结转移情况密切相关;CB和MMP-9的表达水平呈显著正相关。结论 CB和MMP-9在非小细胞肺癌中的表达上调,联合检测CB和MMP-9对肿瘤的诊断和预后判断有一定的临床意义。     

应用蛋白芯片技术筛选肺腺癌化疗敏感血清蛋白标志物

目的 探讨肺腺癌化疗敏感患者与化疗耐药患者血清蛋白质质谱的不同,筛选肺腺癌化疗敏感血清蛋白标志物。方法 用WCX2蛋白芯片结合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,检测22例肺腺癌化疗敏感的患者和21例化疗不敏感的血清蛋白质谱,筛选出差异表达蛋白质。结果 发现利用M/Z(质荷比)为16083.50Da,7963.17Da,16121.50Da,15921.60Da,8066.79Da,8040.17Da和3394.57Da的7个差异蛋白可区分标准含铂类方案化疗敏感组和耐药组,联合m/z为7963.17Da与16083.50Da的差异蛋白建立预测模型,可预测肺腺癌标准含铂类方案化疗敏感/耐药性,其敏感性86.36%和特异性80.95%。结论 SELDI-TOF-MS技术是寻找肺腺癌化疗敏感血清诊断标志物的有效工具。     

联合检测非小细胞肺癌中nm23-H1和CB的表达及意义

目的探讨转移抑制基因nm23-H1和组织蛋白酶B(CB)在非小细胞肺癌发生及转移中的作用。方法用免疫组织化学法检测手术证实的97例非小细胞肺癌组织及28例良性肺病变中nm23-H1和CB的表达情况,将检测结果与患者临床病理特征进行综合分析。结果 nm23-H1和CB的表达主要定位于细胞质,nm23-H1和CB在非小细胞肺癌中表达的阳性率明显高于良性肺病变。非小细胞肺癌中nm23-H1和CB蛋白的表达与肿瘤分化程度及淋巴结转移无明显相关,但CB阳性表达率在低分化组及有淋巴结转移组有升高趋势。肺癌组织中nm23-H1和CB的表达水平显著相关。结论 nm23-H1和CB在非小细胞肺癌中表达上调,联合检测nm23-H1和CB对肿瘤的诊断和预后判断有一定的临床意义。     

肺腺癌细胞PC9/GR中miR-21抑制剂可逆转吉非替尼耐药

目的 本研究的目的是筛选及鉴定肺腺癌细胞中与吉非替尼耐药相关的miRNA.方法 RT-PCR验证肺腺癌细胞株PC9与其吉非替尼耐药细胞株PC9/GR中miR-21、miR-7、miR-128、miR-574-3p、miR-542-5p的表达差异;将miRNA的模拟物/抑制剂转染至耐药细胞株PC9/GR中,使miRNA的表达水平恢复至PC9中的水平;CCK8法检测PC9/GR中miRNA表达水平恢复后对吉非替尼敏感性的变化.结果 RT-PCR检测miR-21在PC9/GR中高表达,miR-7、miR-128、miR-574-3p、miR-542-5p在PC9/GR中低表达;将miRNA的模拟物/抑制剂转染至耐药细胞株PC9/GR中,发现miR-21抑制剂可增加吉非替尼敏感性约9.64％,P＜0.05.结论 miR-21抑制剂可逆转肺腺癌细胞PC9/GR对吉非替尼的耐药.     

2种方法检测非小细胞肺癌EGFR基因突变的比较

目的比较测序法和Taqman实时荧光PCR法检测表皮生长因子受体(EGFR)基因19、21外显子基因突变的一致性,为寻找适宜临床应用的EGFR基因突变检测方法提供实验依据。方法收集60例非小细胞肺癌患者肿瘤组织,应用测序法和Taqman实时荧光PCR法分别检测EGFR基因19、21外显子基因突变,比较两种方法的有效性。结果两法检测EGFR基因19、21外显子突变结果符合率分别为96.7%(58/60)和98.3%(59/60),差异无统计学意义(P>0.05)。结论 2种方法均可用于EGFR基因19、21外显子突变检测,测序法更适合指导临床分子靶向治疗。     

肝细胞生长因子对非小细胞肺癌侵袭和迁移的影响

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)对非小细胞肺癌(NSCLC)转移的影响及其可能的分子机制.方法 以HGF进行诱导培养NSCLC细胞株A549及其耐药株A549/DDP,应用Real time PCR及Western blot检测诱导前后细胞内上皮间质转化(EMT)相关标志物波形蛋白(vimentin)、钙黏蛋白E(E-cadhe-rin)表达的变化.将细胞种植在细胞培养板,设置未外源性添加HGF的为对照组,外源性添加HGF进行细胞培养的为HGF诱导组,应用细胞划痕以及Transwell实验检测诱导前后两株细胞迁移侵袭能力的变化.结果 HGF在A549/DDP细胞的mRNA表达水平较A549细胞显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);提高A549/DDP及A549细胞微环境中HGF水平可诱导细胞vimentin增加、E-cadherin减少,差异均有统计学意义(基因水平P<0.01,蛋白水平P<0.05).细胞划痕实验显示,A549/DDP细胞愈合较A549细胞快,差异有统计学意义(P<0.05),HGF诱导可使细胞侵袭能力增强;Transwell结果显示,HGF诱导组的A549/DDP、A549细胞相对未诱导前细胞的侵袭能力增强,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 HGF促进NSCLC细胞A549/DDP及A549的侵袭迁移,其机制可能与通过调控EMT相关基因的表达相关.