ADME/Tox体外模型结合LC/MS法在中药研究中的应用

由于中药及其复方化学成分的复杂性和作用环节及作用靶点的多重性。要完全阐明中药作用的物质基础和作用机制是有困难的,利用ADME/Tox体外模型及LC/MS等现代分析方法对中药进行研究有其特点和优势,目前对中药的ADME/Tox体外模型还没有建立起一个完整的实验体系,本文对国内外常用于ADME/Tox研究的体外模型进行了综述,以期为中药的ADME/Tox体外研究提供一个思路。     

三种血清肿瘤标志物在胃癌诊断中的应用

目的：探讨癌胚抗原(CEA)和糖类相关抗原CA19-9、CA72-4三种肿瘤标志物在胃癌诊断、疗效监测评价中的应用价值，并将它们联合用于检测，以提高临床诊断胃癌的灵敏度、有效诊断率。方法：应用放射免疫分析(RIA)法和生物索—链霉亲和素双抗夹心法，测定60例患有不同良性胃部疾病病人和58例胃癌患者血清中CEA、CAl9-9及CA72-4的含量，并对癌症患者进行术后3个月到1年的动态随访监测。结果：良性疾病组CEA为11.8±3.7μg／L，CA19-9为22.8±9.9 KU／L，CA72-4 2.1+0.8 KU／L。胃癌患者血清中这三种肿瘤标志物的含量明显高于良性疾病组，差异均具有显著性意义(P<0.01)。患者术后血清中CEA、CA19-9及CA72-4水平较术前明显下降(P<0.01)。将CEA、CA19-9及CA72-4三者联合检测较单测任何一项其灵敏度和有效诊断率均有提高。结论：三种血清肿瘤标志物联合检测可提高胃癌诊断的灵敏度、特异性，胃癌患者血清中三种标志物含量变化对胃癌的诊断、疗效监测有重要的临床意义。     

香芍胶囊对老龄雌鼠性激素及5-HT受体的影响

目的:研究香芍胶囊对老龄雌鼠下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素、脏器系数及脑内5-HT受体表达的影响,探讨香芍胶囊对老龄雌鼠的作用。方法:以自然衰老的老龄雌鼠为动物模型,香芍胶囊2.75、5.50、11.00g(原生药)/kg连续给药8周,采用放射免疫法测定血清中雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、泌乳素(PRL)、孕酮(P)的含量,用Elisa试剂盒测定血清中促性腺激素释放激素(GnRH)的含量,并用免疫组化方法观察大鼠下丘脑及海马中5-HT受体表达的变化。结果:香芍胶囊11.00g/kg组能提高E2、PRL水平;香芍胶囊11.00、5.50g/kg组可升高血清中P、GnRH水平;香芍胶囊2.75g/kg组能提高子宫系数;香芍胶囊11.00g/kg组能提高胸腺系数;香芍胶囊11.00g(原生药)/kg组能提高大鼠下丘脑中5-HT受体的阳性表达水平(P0.05);香芍胶囊11.00、5.50g(原生药)/kg组可提高大鼠海马中5-HT受体的阳性表达水平。结论:香芍胶囊对老龄雌鼠下丘脑-垂体-卵巢轴相关激素有调节作用,能够提高血清中E2、P、PRL、GnRH水平,香芍胶囊能提高子宫系数和胸腺系数,能改善老龄雌鼠的易惊慌易激惹等行为表现,香芍胶囊对更年期综合征治疗作用可能与其对下丘脑-垂体-卵巢轴的调节和对下丘脑和海马中5-HT受体表达的提高有关。     

基于Microtox技术(微毒测试)的中药综合毒性快速评价

Microtox技术(微毒测试)是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物,以其发光强度的变化为指标,测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法,现已成为一种简单、快速的生物毒性检测手段。本文综述了Microtox技术(微毒测试)的研究现状,并就该技术在中药毒性评价应用的技术方法、技术路线、关键问题以及应用范围等方面开展研究,为建立一种新的中药毒性快速检测、安全性评价以及风险分级评定的的综合评价体系奠定基础。     

液相色谱-质谱法同时测定吴茱萸水提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量

目的:建立同时测定吴茱萸水提物中吴茱萸碱(Evodiamine,EVO)和吴茱萸次碱(Rutaecarpine,RUT)的LC/MS方法。方法:液相色谱采用Welch Materials Xtimate-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm),以甲醇-10 mmol/L乙酸铵水溶液(85∶15)为流动相,流速0.2 mL/min,柱温30℃。质谱采用正离子全扫描模式,m/z:0~1000,电喷雾离子化源(ESI)。雾化气为氮气,雾化压力为40 psi;喷雾电压4000 V,源温度为100℃;去溶剂气为氮气,温度350℃,流速为10 L/min。结果:吴茱萸碱在2.02~504 ng/mL(r=0.9992),吴茱萸次碱在1.97~493.33 ng/mL(r=0.9999)线性关系良好,回收率分别为87.8%~97.04%和86.35%~98.22%,日内、日间精密度均10%。结论:该方法简便、可靠、灵敏度高,可用于同时测定吴茱萸水提物中吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量及药代动力学研究。     

中药复方胃力康胶囊对实验性胃溃疡的作用研究

目的:研究胃力康胶囊(WLK)对实验性胃溃疡(GU)的防治作用和作用机制。方法:采用小鼠水浸束缚应激性胃溃疡和大鼠乙酸灼烧型胃溃疡模型进行实验,观察小鼠溃疡指数及各组大鼠溃疡面积;常规HE染色和免疫组化,观察胃力康胶囊对胃组织病理变化和核转录因子κB-p65(NFκB-p65)和白细胞介素-8(IL-8)蛋白表达的影响。结果:胃力康胶囊3个剂量组(9.198g、18.396g、36.792g(原生药)/kg)及胃力康颗粒组(36.792g(原生药)/kg)对小鼠水浸应激性胃溃疡具有显著的防治作用,胃力康胶囊3个剂量组溃疡抑制率在27.67～44.02%之间。对大鼠乙酸灼烧型胃溃疡都有显著的治愈作用。胃力康胶囊3个剂量组(7.67g、15.33g、30.66g生药/kg)及胃力康颗粒组(30.66g原生药/kg)光镜下胃溃疡深度及炎症反应程度均低于模型对照组,并可见幽门腺代偿性增生和溃疡修复,胃力康胶囊与胃力康颗粒对大鼠乙酸性溃疡组织病理学愈合的促进作用相当。胃力康胶囊组及胃力康颗粒组对胃溃疡周围组织上皮细胞IL-8、NFκB-p65(F-6)表达的上皮阳性细胞面积分数均低于模型对照组,具有抑制胃溃疡周围组织上皮细胞IL-8、NFκB-p65(F-6)表达作用。结论:胃力康胶囊对小鼠水浸束缚应激性胃溃疡的形成有抑制作用,可减少溃疡指数,提高溃疡愈合率。胃力康胶囊通过抑制NF-κB激活,下调IL-8的过度表达,从而发挥对乙酸灼烧型胃溃疡的抗炎和防治作用。     

苍耳子4种提取物小鼠急性毒性比较研究

目的:研究苍耳子生品和炒品的水提、醇提4种提取物对小鼠的急性毒性。方法:观察小鼠灌胃给药后的毒性反应,并计算半数致死量(LD50)。结果:苍耳子水提取物组毒性反应为静卧、竖毛、尾足发绀、震颤、呼吸抑制、间歇性惊厥、翻正反射消失、后腿抽搐等,乙醇提取物组则表现为静卧、腹式呼吸、部分竖毛、震颤、严重间歇性惊厥、跳跃、后腿抽搐,部分动物出现大小便失禁等。苍耳子炒品水提取物、炒品乙醇提取物、生品水提取物、生品乙醇提取物的小鼠灌胃给药的LD50分别为生药155.93,317.80,167.60,275.41 g.kg-1。结论:苍耳子水提取物的急性毒性明显大于乙醇提取物,而炒品和生品的毒性差异不明显。     

管灸对面神经损伤家兔面神经核内受体TrkC表达的影响

目的:研究管灸对面神经损伤家兔面神经核中受体Trk C表达的影响。方法:采用机械压榨法制作家兔面神经损伤模型,将家兔随机分为假手术组、模型组、管灸组、热疗组,通过免疫组化学、组织原位杂交和RT-PCR三种方法分别检测各组面神经核中受体Trk C蛋白和基因的表达变化。结果:在三种方法检测下发现家兔面神经损伤后面神经核Trk C的表达均明显下降(P0.01),管灸组面神经核Trk C的表达均显著高于模型组(P0.01)结论:管灸疗法可显著提高面神经核中受体Trk C的表达,这可能对促进面神经损伤后的再生和修复有重要作用。     

苍耳子“毒性”及现代毒理学研究进展

苍耳子为历代中医临床治疗鼻渊要药,有小毒,属传统记载的有毒中药。现代药理研究苍耳子具有抗菌、抗病毒、抗炎、镇痛、降血糖、抗过敏等作用。现代临床医学中苍耳子为鼻科常用药,尤其多用于治疗慢性鼻炎、慢性鼻窦炎。但临床中常因长期、过量、反复使用苍耳子以及其炮制不当或者未经炮制使用而发生中毒。毒理学研究提示其对多脏器均有损伤,主要对肝脏和肾脏的损害较为严重。查阅大量中外文献,综述苍耳子功效及毒性、化学成分和毒理方面的研究进展,并对其＂效-毒＂相关性问题进行探讨。     

苍耳子及苍术苷对大鼠原代肝细胞的毒性作用研究

目的:研究苍耳子水提物及苍术苷对大鼠原代肝细胞的毒性效应,探讨其可能的毒性机制。方法:制备大鼠原代肝细胞,观察苍耳子水提物及苍术苷在不同时间点对肝细胞形态的影响,并测定不同时间点培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、白蛋白(ALB)及尿素氮(BUN)的含量。结果:药物作用24h后,各给药组肝细胞均出现不同程度的形态改变及死亡,并随时间的增加细胞死亡数量亦增加,48h时,苍术苷和水提物低浓度组仍可见少量活细胞,而水提物高浓度组肝细胞几乎已全部死亡。ALT和LDH在给药2h或24h出现升高,含量呈时间依赖性增加,ALB和BUN在给药2h出现降低,在所试时间内一直处于较低水平。结论:苍耳子水提物0.18、0.018 g原生药/ml及苍术苷44μg/ml对大鼠原代肝细胞有明显的毒性。