玛咖性温健脾功效及对脾虚证小鼠物质、能量代谢的影响

目的本研究通过采用饮食失节、劳倦伤脾双因素法建立脾虚证动物模型,观察玛咖对脾虚小鼠物质、能量代谢的影响,"以证测性"探讨玛咖偏温药性与健脾功效的相关性。方法雄性昆明小鼠72只适应性喂养1周后随机分为正常组、模型组、人参对照组(0. 75 g/kg)、玛咖高剂量组(1. 5 g/kg)、中剂量组(0. 75 g/kg)、低剂量组(0. 25 g/kg),每组12只。给药14天,建立由饮食失节、劳倦伤脾造成的脾虚证小鼠模型,观察玛咖对脾虚小鼠体重、力竭游泳时间、肝糖原(liver glycogen,LG)、肌糖原(muscle glycogen,MG)、乳酸(lacticacid,LA)、游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)、肌酐(creatinine,CREA)、尿素氮(urea,UREA)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)及环核苷酸系统cAMP/cGMP比值的影响。结果玛咖能够增加脾虚小鼠体重,缓解脾虚小鼠体力疲劳增加力竭游泳时间(P 0. 01),促进MG、LG储存(P 0. 05、P 0. 01、P0. 001),抑制代谢产物LA、FFA、CREA、UREA的生成(P 0. 05、P 0. 01、P 0. 001),促进能量代谢酶LDH、CK活性(P 0. 05、P 0. 01),升高环核苷酸系统cAMP/cGMP比值(P 0. 01、P 0. 001)。结论玛咖能够促进脾虚小鼠物质、能量代谢,减少脾虚小鼠代谢产物的堆积,玛咖药性偏温,对脾虚小鼠具有健脾益气功效。     

霍山石斛对肾阴虚小鼠血清IL-2、IL-6及抗氧化作用的实验研究

目的:研究霍山石斛对肾阴虚小鼠血清白细胞介素-2(IL-2)、IL-6及抗氧化作用的影响。方法:96只昆明雄性小鼠适应性喂养7 d后随机分为正常组,模型组,铁皮石斛组,六味地黄丸组,霍山石斛(0. 33、1、2、3 g/kg) 4个剂量组,给药14d。除正常组外,其余各组小鼠每天下午给予甲状腺素溶液160 mg/kg,建立小鼠肾阴虚模型,观察霍山石斛对肾阴虚小鼠体质量、胸腺和脾脏指数,血清IL-2、IL-6含量及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)水平的影响。结果:霍山石斛各给药组均能明显缓解小鼠的阴虚状态,增加体质量(P 0. 01,P0. 05),1、2、3 g/kg剂量组霍山石斛能提高阴虚小鼠胸腺指数和脾脏指数(P 0. 01),降低血清IL-6 (P 0. 05,P 0. 01),升高IL-2(P 0. 01),升高阴虚小鼠肝组织SOD、GSH-Px、CAT水平(P 0. 01),降低肝组织MDA水平(P 0. 05,P0. 01),且与铁皮石斛比较,其升高SOD、CAT和降低MDA作用明显增强(P 0. 01,P 0. 05)。结论:霍山石斛具有增强阴虚状态下机体免疫调节作用和增强抗氧化能力的作用,其免疫调节作用与铁皮石斛相当,抗氧化性优于铁皮石斛。     

赤芍、白芍及芍药苷、芍药内酯苷对急性血瘀证大鼠血液流变学及血管内皮功能的影响

目的比较研究赤芍、白芍及芍药苷、芍药内酯苷对急性血瘀证大鼠血液流变学和血管内皮功能的影响,探讨赤芍、白芍对血瘀证作用的物质基础。方法大鼠皮下注射盐酸肾上腺素复合冰水浴复制大鼠急性血瘀证动物模型,以丹参酮胶囊为对照药,通过检测大鼠全血黏度、红细胞最大凝集指数(Red blood cell maximum agglutination index,MAXD)、红细胞最大变形指数(Red blood cell maximum deformation index,MAXDI)水平,用放射免疫法测定血浆内皮素1(endothelin,ET-1)含量、采用比色法测定血清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量。观察不同剂量的赤芍、白芍对大鼠全血黏度、MAXD、MAXDI、血清NO、血浆ET-1的影响。采用同样的方法通过检测大鼠全血黏度、血清NO、血浆ET-1指标研究芍药苷、芍药内酯苷对急性血瘀证大鼠的影响。结果与模型组相比,赤芍高剂量组及芍药苷高剂量组、中剂量组各切变率的全血黏度显著降低(P0.05,P0.001,P0.01);赤芍中剂量组、赤芍低剂量组及白芍高剂量组中切变率及低切变率全血黏度降低(P0.05)。与模型组比较,赤芍高剂量组MAXD、MAXDI均有显著改变(P0.001,P0.01),白芍高剂量组和白芍中剂量组MAXD降低(P0.01)。与模型组比较,赤芍、白芍、芍药苷各剂量组及芍药内酯苷高剂量组、中剂量组血清NO值显著升高(P0.05);各组血浆ET-1无显著差异。结论赤芍、白芍均能降低急性血瘀证大鼠的血黏度,芍药苷是两者起作用的共同活性成分,芍药内酯苷对血瘀证的作用不及芍药苷;赤芍对血瘀证的作用优于白芍,这与其芍药苷含量较多,而芍药苷有较强改善血液流变学异常和保护血管内皮功能作用有关。     

芍药内酯苷和芍药苷对慢性束缚应激大鼠神经营养因子以及一氧化氮影响的研究

研究芍药内酯苷、芍药苷对慢性束缚应激肝郁大鼠的作用及机制。以氟西汀及逍遥丸为对照,检测体重,糖水消耗量,并进行旷场行为学实验;格瑞斯比色法检测海马一氧化氮(NO)的含量;酶免法(ELISA)检测海马脑源性神经营养因子(BDNF)的含量;RT-q PCR法检测海马神经元一氧化氮合酶(n NOS)m RNA表达;Western blot法检测海马中n NOS以及BDNF的蛋白表达。与模型组相比,30 mg·kg~(-1)芍药苷、30 mg·kg~(-1)芍药内酯苷明显升高穿行次数(P0.05;P0.01);芍药苷、芍药内酯苷明显降低NO水平(P0.05,P0.01;P0.05,P0.05);30 mg·kg~(-1)芍药苷与30 mg·kg~(-1)芍药内酯苷明显升高BDNF水平(P0.05)。与模型组相比,芍药苷、芍药内酯苷明显降低n NOS m RNA表达(P0.01;P0.05);30 mg·kg~(-1)芍药苷、30 mg·kg~(-1)芍药内酯苷明显升高BDNF蛋白表达(P0.05)。芍药内酯苷、芍药苷为白芍柔肝解郁功效的有效成分,其作用机制与调节海马NO含量以及BDNF的表达有关。     

阿萨伊对虚热证大鼠神经递质、三长轴激素及环核苷酸的影响

目的:研究阿萨伊对虚热证大鼠神经递质、三长轴激素及环核苷酸水平的变化探讨阿萨伊的寒热药性。方法:SD大鼠分为空白组;虚热模型组,虚热模型加黄柏组、加阿萨伊高、低剂量组;采用每日肌肉注射地塞米松磷酸钠1次、连续21 d的方法制备大鼠虚热模型;通过酶免法与放免法检测神经递质(NE、DA、5-HT)、激素(T4、T3、CORT、E_2、T)及环核苷酸(c AMP、c GMP)指标变化。结果:阿萨伊高剂量组能显著降低血清中NE、DA、T4、T3、E_2、c AMP、c GMP值(P0.05,P0.001,P0.001,P0.01,P0.001,P0.001,P0.001);阿萨伊高剂量组能显著升高血清中5-HT、CORT、T(P0.001,P0.05,P0.05);阿萨伊组的作用趋势与黄柏、葛根芩连汤一致,表现出对虚热模型大鼠的调整作用。结论:本实验以同类比较药理学方法验证了理论推导的阿萨伊中药寒凉药性。     

霍山石斛对肾阴虚小鼠抗疲劳及能量代谢的影响

目的研究霍山石斛对肾阴虚小鼠抗疲劳及能量代谢的影响。方法采用灌服甲状腺素建立小鼠肾阴虚模型,观察霍山石斛对肾阴虚小鼠阴虚状态的影响。检测各组小鼠温度趋向性和负重游泳时间的变化,酶联免疫吸附法测定小鼠血清三碘甲状腺原氨酸(T3),甲状腺素(T4)。放射免疫分析法检测血清乳酸脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK),环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP),计算cAMP/cGMP比值。比色法检测肝组织Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶的含量。结果与正常组相比,模型组小鼠热区停留比例和负重游泳时间明显下降(P 0. 01),T3、T4、cAMP和cAMP/cGMP的含量明显升高(P 0. 01、P 0. 001),LDH显著降低(P 0. 05); CK、Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶显著增高(P 0. 001)。与模型组相比,霍山石斛A、B、C、D 4个剂量组和铁皮石斛组、六味地黄丸组小鼠的热区停留比例和负重游泳时间明显增高(P 0. 01、P 0. 05、P 0. 001),cAMP/cGMP明显降低(P 0. 05、P 0. 01),Na~+-K~+-ATP酶和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATP酶明显降低(P 0. 01、P 0. 001),霍山石斛B、C、D剂量组和铁皮石斛组、六味地黄丸组T3、T4显著降低(P 0. 05、P 001、P 0. 001),霍山石斛B、C剂量组和铁皮石斛组、六味地黄丸组的LDH显著增高,CK显著降低(P 0. 01、P 0. 05、P 0. 001)。结论霍山石斛具有滋阴清热的作用,能降低甲状腺素诱导的肾阴虚小鼠的代谢酶活性和甲状腺素水平,调节能量代谢速率,提高阴虚小鼠的负重游泳时间,具有抗疲劳作用,其机制与调节能量代谢酶作用相关,进一步验证了霍山石斛药性偏寒。     

玛咖对虚寒及虚热证大鼠环核苷酸水平及神经-内分泌-免疫网络的影响

研究玛咖对虚寒及虚热证大鼠环核苷酸、神经递质水平、下丘脑-垂体-肾上腺轴及免疫功能的影响,探讨玛咖的寒热药性。SD大鼠分为空白组、虚寒模型组、虚寒肉桂组(30 g·kg-1)、虚寒玛咖高剂量组(2.4 g·kg-1)、虚寒玛咖低剂量组(1.2 g·kg-1)、虚热模型组、虚热黄柏组(5 g·kg-1)、虚热玛咖高剂量组(2.4 g·kg-1)、虚热玛咖低剂量组(1.2 g·kg-1);采用每日肌肉注射氢化可的松琥珀酸钠、地塞米松磷酸钠注射液1次,连续21 d的方法制备虚寒、虚热证动物模型;通过放免法检测环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺激素释放激素(ACTH)、皮质酮(CORT)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)、补体4(C4)含量变化。玛咖高剂量组和玛咖低剂量组均能使虚寒证大鼠整体状态及体质量得到明显改善(P<0.01,P<0.05),使cAMP,cAMP/cGMP,NE,DA,ACTH均明显升高(P<0.01,P<0.001),而5-HT明显降低(P<0.01,P<0.001);虚热玛咖高剂量组、低剂量组的体质量,cAMP,cAMP/cGMP,NE,DA,5-HT,ACTH无统计学意义;玛咖对虚寒、虚热证大鼠的CORT,IgM,IgG,C3含量均有显著调节作用(P<0.01,P<0.05,P<0.001)。玛咖对大鼠体质量、环核苷酸、神经递质水平及HPA轴的调整与肉桂一致,与黄柏相反;对机体免疫功能有双向调节作用;用药理学实验方法通过同类比较、异类反证,从对环核苷酸水平和神经-内分泌-免疫网络的影响证实玛咖药性微温。     

玛咖性温健脾及对脾虚小鼠线粒体能量代谢酶的影响

目的考察玛咖缓解脾虚证小鼠体力疲劳、抗氧化损伤作用,验证玛咖性温健脾中药药性,探讨能量代谢机制。方法雄性昆明种小鼠随机分为正常组,模型组,人参组,玛咖高、中、低剂量组,除正常组外其余各组均采用饮食失节、劳倦伤脾双因素法建立脾虚证小鼠模型,共计14 d,同时从第1天开始各组预防给药。记录脾虚小鼠力竭游泳时间,比色法测肝脏组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)活性或浓度。放免法测血清环磷酸腺苷(c AMP)和环磷酸鸟苷(c GMP)浓度,并计算比值(c AMP/c GMP)。连续循环法测肝脏组织线粒体F0F1-ATP酶活性,酶解法测Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果与正常组比较,模型组小鼠体重下降,力竭游泳时间减少,肝组织中SOD、CAT、GSH-Px活力下降,MDA升高,c AMP/c GMP比值下降,F0F1-ATP酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均降低(P0.01)。与模型组比较,玛咖高、中、低剂量组(1.5、0.75、0.25 g/kg)均能增加脾虚小鼠体重,具有统计意义(P0.01);玛咖高剂量组和人参组能显著延长脾虚小鼠力竭游泳时间(P0.01);玛咖中、高剂量组同人参组均能显著提高脾虚小鼠肝脏组织中SOD、CAT、GSH-Px活力(P0.01),减少MDA含量(P0.01),显著升高血清c AMP/c GMP比值(P0.01),显著增加F0F1-ATP酶、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶活性(P0.01)。结论一定剂量的玛咖能够缓解脾虚小鼠体力疲劳,提高抗氧化酶的活性并消除自由基细胞毒性,验证了玛咖性温健脾的中药药性,进一步证实其机制与增强线粒体能量代谢酶相关。     

细胞学方法评价南美草药阿萨伊的寒热药性

目的:评价南美草药阿萨伊的寒热药性。方法:采用MTT细胞增殖抑制试验对比考察阿萨伊、黄柏对细胞株Hep G2和Hep3B增殖的影响;倒置相差显微镜对比观察二者对2种细胞株形态特征的影响;台盼蓝染液排斥试验对比分析二者的细胞毒性作用;分光光度法测定阿萨伊处理后的Hep G2和Hep3B细胞NADH含量和NADH/NAD+比值的变化,分析其对2种细胞能量代谢的影响。结果:在受试浓度范围内,阿萨伊、黄柏对2种细胞株的生长增殖和能量代谢均呈现不同程度的抑制作用。MTT试验中,阿萨伊浓度≤0. 5μg/m L和≥10μg/m L时对2种细胞产生增殖抑制效应,差异有统计学意义(P 0. 05; P 0. 01),且与黄柏作用相似;镜检下细胞的生长疏松程度与上述结果一致,阿萨伊使细胞颗粒感减弱,扁平呈不规则多边形铺展,与黄柏作用相似;台盼蓝染色结果显示各浓度阿萨伊对细胞无明显毒性,亦与黄柏作用相似;阿萨伊对2种细胞胞内能量代谢指标NADH含量、NADH/NAD+比值均有下调作用,差异有统计学意义(P 0. 05; P 0. 01)。结论:阿萨伊作用于细胞株Hep G2和Hep3B后与黄柏作用相似,能够降低能量代谢,其药性偏寒凉。