T细胞淋巴瘤6号染色体微卫星DNA的杂合性缺失研究

目的：对T细胞淋巴瘤（T—cell lymphoma，TCL）6号染色体上6个微卫星多态标志物进行等位基因杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH）分析，以明确该区域是否存在与人类TCL发生发展相关的抑癌基因。方法：选取6号染色体上6个微卫星多态标志D6S251、D6S275、D6S287、D6S267、D6S262、D6S264，采用石蜡组织基因组DNA抽提、PCR扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳、银染法分别检测了42例TCL中肿瘤组织与相应正常组织基因组DNA的LOH状况。结果：42例TCL中13例（13／42，30．95％）至少在1个位点出现LOH，以D6D262最高（10．3％），其次为D6S287（10．0％）和D6S267（7．3％）。而不同临床病理分型的TCL其LOH发生差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：在6号染色体上的6个微卫星标志中D6S287、D6S262和D6S267周围的6q21-6q23压域发生杂合性缺失率较高，位于6q21区编码CyclinC的基因可能是此区与TCL发生发展相关的候选抑癌基因；尤其是6q21-6q22．1区域可能存在与TCL相关的抑癌基因。可能与TCL的发生发展有关。     

呼吸科专业临床药师下临床的体会

临床药师开展临床药学服务工作不仅是医院临床工作发展的需要,也是医院临床药师自身发展的需要。临床药师在参与临床工作过程中,应注意自身的角色定位,发挥药学特长,为临床提供与用药相关的服务。为此,笔者对两年来在呼吸科下临床的工作体会进行了总结。     

细胞自噬对紫杉醇诱导宫颈癌CaSki细胞死亡的影响

目的：通过对自噬基因Beclin1的表达调节来观察细胞自噬对紫杉醇诱导人宫颈癌CaSki细胞株死亡的影响,并探讨在该过程中自噬与凋亡之间的相互作用及关系。方法：利用脂质体法将Beclin1的过表达质粒pcDNA3.1-Beclin1和RNA干扰质粒pSUPER-Beclin1分别体外转染CaSki细胞并筛选稳定表达株后,电镜下观察细胞内自噬囊泡的形成,Western 印迹检测转染前后Beclin1与LC3蛋白的表达变化。上述细胞株经紫杉醇作用后MTT法检测细胞增殖情况的改变,流式细胞仪检测自噬细胞与凋亡细胞的百分率。结果：在Beclin1基因过度表达的CaSki细胞株中,电镜观察到细胞内存在大量的自噬囊泡;Beclin1与LC3蛋白的表达在pcDNA3.1-Beclin1转染细胞株中被上调。MTT法检测提示Beclin1过表达细胞株存活细胞明显少于未转染对照细胞株。流式细胞仪检测提示经紫杉醇作用后与空白对照组比较,Beclin1过表达组自噬细胞与凋亡细胞百分率均有明显增加,其中凋亡增加尤其明显;而Beclin1干扰组自噬细胞与凋亡细胞百分率均有所减少。结论：在紫杉醇对宫颈癌CaSki细胞株的杀伤过程中细胞自噬与凋亡均发挥了作用,在Beclin1基因过度表达的CaSki细胞株中可通过增加紫杉醇诱导的细胞凋亡来增强药物对肿瘤细胞的杀伤作用。     

心血管外科手术患者预防用抗菌药物的临床评价

目的:比较干预前、后心血管外科手术患者预防用抗菌药物的合理性、有效性及经济性。方法:抽取我院心血管外科2010年6-8月(干预前组)、2011年6-8月(干预后组)行开胸手术、术前无感染、肝肾功能无异常的患者,对其预防用抗菌药物情况进行评价。结果:共纳入204例患者,干预前组100例,干预后组104例。干预后组患者的抗菌药物应用品种及应用时间均显著低于干预前组(P<0.001),合理性显著提高;2组患者均未见切口及器官/腔隙感染,干预后组患者术后影像学提示感染或炎症的比例显著低于干预前组(P=0.003);2组患者的总住院时间及术后住院时间无显著性差异,而干预后组患者的抗菌药物总费用显著低于干预前组(P<0.001)。结论:规范、合理地预防用抗菌药物,可有效预防心血管外科手术术后感染,降低抗菌药物治疗费用。     

MMP-9、Bcl-2、VEGF在肾细胞癌中的表达及意义

目的通过检测MMP-9、Bcl-2及血管内皮生长因子(VEGF)在肾细胞癌中的表达,探讨它们在肾细胞癌的发生、发展和转移中的作用及其相互之间的关系。方法用免疫组织化学方法检测68例肾细胞癌石蜡标本中MMP-9、Bcl-2和VEGF的蛋白表达情况,并进行统计学分析。结果在正常肾组织和肾细胞癌中MMP-9、Bcl-2和VEGF的表达有显著性差异(P0.05)。MMP-9、Bcl-2的阳性表达与肾细胞癌病理分级、临床分期之间无显著性差异(P0.05)。VEGF阳性表达率随病理分级、临床分期的升高而升高。VEGF在病理分级Ⅰ与Ⅱ和Ⅰ与Ⅲ之间的表达有显著性差异(P0.05),在临床分期中,早期与晚期有显著性差异(P0.05)。MMP-9和VEGF表达率在淋巴结转移阳性组显著高于淋巴结阴性组。结论 MMP-9、Bcl-2和VEGF在肾细胞癌的形成过程中可能起作用。MMP-9很可能与肾细胞癌的侵袭和转移密切相关,VEGF可作为判断肾细胞癌淋巴结转移和临床预后的生物学指标。     

钩藤总碱与夏天无总碱合用对大鼠脑缺血再灌注的影响

目的观察钩藤总碱（钩藤）与夏天无总碱（夏天无）合用对脑缺血／再灌注损伤的保护作用。方法各组造模前灌胃给药每天2次,共5次,末次给药30min后,采用大鼠大脑中动脉缺血（2h）／再灌注（22h）制作脑缺血损伤模型,造模12h后再给药1次,并进行神经病学评分,检测脑梗塞范围及脑组织水含量,大鼠脑组织中一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的变化。结果两药合用可降低大鼠脑缺血／再灌注后神经病学评分及梗塞范围,降低脑组织MDA含量、NoS活性及升高SoD活性（P〈0．05）,联合用药的效应较单用钩藤或夏天无增强（P〈0．05）,而对中枢抑制作用较单用钩藤减轻。结论钩藤和夏天无联合应用对脑缺血／再灌注损伤有保护作用,其作用机制与抑制脑NoS活性、提高SOD活性及减少脑神经细胞脂质过氧化损伤有关。     

B细胞淋巴瘤73例临床病理分析

为了探讨B细胞淋巴瘤临床病理特征,应用组织形态学和免疫组织化学分析73例B细胞淋巴瘤患者的病理资料,同时行CD20、CD3、CD5、CD23、CD30、CD79α、TdT、Bcl-2、CyclinD1、Lysozyme和Ki-67的免疫表型测定,并根据WHO新分类重新分类。73例B细胞淋巴瘤患者中,弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)38例(52.05%),包括中心母细胞型(CB)27例,免疫母细胞型(IB)5例,间变型(AV)4例,富于T细胞或组织细胞型2例;滤泡性淋巴瘤(FL)18例,黏膜相关淋巴组织型边缘区B细胞淋巴瘤9例,套细胞淋巴瘤(MCL)2例,B淋巴母细胞性淋巴瘤(B-LBL)4例,B小淋巴细胞淋巴瘤(B-SLL)2例。B细胞淋巴瘤低度恶性组Ki-67阳性率为20.69%(6/29),高度恶性组阳性率为75%(33/44),P<0.01。初步研究结果提示,WHO新分类对B细胞淋巴瘤的诊断便于掌握,实用性强,与临床治疗和预后判断有密切关系。通过标准的形态学和一套规范的免疫组化检测,结合WHO新分类可应用于B细胞淋巴瘤的诊断和预后。     

临床药学服务在医护人员中认知度的调研

目的:调研医护人员对临床药学服务工作的认知情况。方法:对105份医护人员调查问卷进行最终学历、专业职称、工作年限、对临床药学的认知情况等综合分析。结果与结论:医护人员对临床药学服务工作所持态度比较积极,在药品使用方面对临床药学服务有较大的需求;临床药学工作人员不断提高其专业水平,并加强与医护人员的配合与协作,有助于临床药学工作的深入开展。     

结直肠癌KRAS突变与临床病理特征的关系

目的检测结直肠患者KRAS的突变情况,分析KRAS突变与临床病理特征的关系。方法应用蝎形探针扩增阻滞突变系统(ARMS)荧光定量PCR技术,检测结直肠癌患者KRAS第12和13位密码子的突变情况并分析其与临床病理特征的关系。结果 1 207例结直肠癌KRAS突变率为42.92%(518/1 207)。第12号密码子6种突变类型,其中G12D突变率16.32%(197/1 207);G12V突变率10.36%(125/1 207);G12C突变率3.31%(40/1 207);G12S突变率2.40%(29/1 207);G12A突变率1.74%(21/1 207);G12R突变率0.58%(7/1 207)。第13号密码子G13D突变率为9.69%(117/1 207)。还检测出8种同时存在两种突变类型及一种同时存在3种突变类型。女性患者KRAS突变率(46.21%)高于男性(40.46%,P<0.05)。KRAS在右半结肠突变率(46.45%)和直肠突变率(44.50%)均高于左半结肠(37.50%,P<0.05)。结论结直肠癌KRAS突变有多种类型,并且多种突变类型可同时存在。女性患者突变率高于男性患者,右半结肠和直肠突变率均高于左半结肠。     

宫颈液基细胞学临床病理16000例分析

目的探讨宫颈液基细胞学临床病理特征。方法对2006-01-2008-10妇科门诊和体检中心妇科宫颈检查16 000例患者行LCT检查和TBS分类诊断,并对意义不明的不典型鳞状细胞(ASC-US)及以上标本进行细胞病理学分析。结果 16 000例宫颈液基细胞学标本中43例不满意,不满意率(0.27%),剩余15 957例纳入分析研究中,其中2 432例属于ASCUS及其以上病变,检出率为(15.24%),ASCUS 1 433例,ASC-H 515例,低度鳞状上皮病变(LSIL)283例,高度鳞状上皮病变(HSIL)196例,宫颈鳞状细胞癌(SCC)5例。结论 LCT技术制作宫颈薄片,背景清晰,细胞结构清晰,可明显提高标本的满意率。TBS诊断标准准确掌握,确保宫颈细胞学检查的准确性。并且根据TBS分级标准,可明显提高宫颈病变的阳性检出率。