RAPD在中药材鉴别中的稳定性和可靠性

本文论述了RAPD的原理及在中药材鉴别中的优缺点,着重讨论了该技术应用于中药材鉴别时影响其稳定性与可靠性的因素及解决办法.     

MHCⅠ类链相关蛋白A在肿瘤免疫中的作用研究

肿瘤发生发展是一个多步骤的过程，包括基因突变的累积，细胞周期的丧失，凋亡的抑制，无限增殖与远处转移。尽管如此，在宿主体内，肿瘤生长会受到免疫监视，一般认为肿瘤生长大致可分为三个阶段：（1）免疫监视阶段：免疫系统有能力杀死生长的肿瘤细胞；（2）平衡阶段：免疫系统的杀伤作用与肿瘤生长之间达到动态平衡；（3）免疫逃避阶段：免疫系统无法有效杀死肿瘤细胞，肿瘤加速生长并远处转移。     

广义规则归纳算法在肺炎患儿病原分析中的应用研究

目的探讨广义规则归纳(GRI)算法在肺炎患儿临床特征与病原关联研究的应用价值。方法以2005—2009年广州市儿童医院住院的6 290例肺炎患儿临床资料作为基础,运用GRI算法分析肺炎患儿临床特征与不同病原的关联。结果住院肺炎患儿中喘息性支气管肺炎2 095例,占33.31%;呼吸道合胞病毒肺炎1 377例,占21.89%;支原体肺炎1 221例,占19.41%。男性和女性患儿关联度最高的均是喘息性支气管肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎。婴儿期(0岁<年龄≤1岁)和幼儿期(1岁<年龄≤3岁)患儿关联度最高的是喘息性支气管肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎;学龄前期(3岁<年龄≤6岁)和学龄期(6岁<年龄≤14岁)患儿关联度最高的均是支原体肺炎。2005年关联度最高的是喘息性支气管肺炎和支原体肺炎;2006年关联度最高的是喘息性支气管肺炎和呼吸道合胞病毒肺炎;2007年和2008年关联度最高的均是呼吸道合胞病毒肺炎;2009年关联度最高的是流行性感冒病毒肺炎。结论GRI算法可以探索肺炎患儿临床特征与不同病原之间的多重相关性,为肺炎患儿临床防治工作提供新的依据。     

miR-29c过表达载体的构建及其对95D肺癌细胞增殖的影响

目的构建miR-29c真核表达载体并转染95D肺癌细胞,观察miR-29c过表达对95D细胞增殖能力的影响。方法克隆miR-29c片段插入质粒pcDNA3．1,构建miR-29c表达质粒pcDNA3．1-miR-29c;通过脂质体瞬时转染人肺癌细胞株95D,荧光PCR检测细胞miR-29c表达水平,MTT法检测过表达miR-29c对细胞增殖能力的影响。结果重组质粒pcDNA3．1-miR-29c经酶切及测序证明构建成功,荧光PCR证实转染后95D细胞miR-29c表达水平显著升高,是对照组的36倍。MTT检测结果表明,过表达miR-29c的95D细胞增殖受到显著抑制,至72h抑制率最高,达38．63％。结论成功构建miR-29c真核表达质粒pcDNA3．1-miR-29c,初步观察显示过表达miR-29c显著抑制95D肺癌细胞增殖效应。为进-步深入研究miR-29c对肺癌的作用打下良好基础。     

白藜芦醇对肺腺癌A549细胞增殖、黏附与侵袭的影响

目的:研究白藜芦醇(resveratrol,Res)对肺腺癌A549细胞增殖,黏附及侵袭的影响。方法:用不同剂量的Res作用于A549细胞,MTT法测定A549细胞的增殖水平(成纤维3T3细胞为对照),流式细胞仪检测A549细胞的细胞周期和凋亡,体外黏附实验测定A549细胞的黏附能力,Transwell实验测定A549细胞的侵袭能力,荧光免疫细胞化学方法测定A549细胞中MMP-2和TIMP-2蛋白的表达。结果:Res以剂量(20～80μmol/L)依赖和时间(0～72 h)依赖方式抑制A549细胞的增殖,同样条件对3T3细胞增殖无影响。10、20、40、80μmol/L Res作用后,A549细胞的凋亡率分别为(34.9±0.91)%、(41.33±0.13)%、(45.47±0.87)%和(59.46±0.59)%。经20μmol/L Res处理48 h后,S期A549细胞比例为(56.41±1.67)%,细胞周期阻滞在S期。20μmol/L以上的Res可引起A549细胞的黏附力下降、侵袭力降低(P<0.05);同时,A549细胞内MMP-2蛋白表达下调,而TIMP-2蛋白表达增加。结论:Res抑制肺腺癌A549细胞的增殖、黏附和侵袭,其机制可能涉及对MMP-2和TIMP-2表达的双向调控。     

非小细胞肺癌EGFR基因第19外显子突变的特征分析

吉非替尼(gefitinib)是针对肺癌表皮生长因子受体(epiddermal growth factor receptor,EGFR)设计的肿瘤靶向药物,已使众多的非小细胞肺癌(NSCLC)患者获益,但其疗效与EGFR基因突变相关[1-3].通过EGFR基因第19外显子可筛选gefitinib药物的最适合患者进行个体化治疗,提高疗效,减少盲目用药.我们检测了62例NSCLC患者的EGFR基因第19外显子突变,并分析突变DNA特征及氨基酸变化规律.     

诱导子在药用植物细胞培养中的应用

详细地介绍了在药用植物细胞培养中诱导子的概念，常用的诱导子种类及其生物学特征。诱导子根据防卫反应可分为内源性诱导子和外源性诱导子；根据特异性可分为特异性诱导子和非特异性诱导子；根据其来源可分为生物诱导子和非生物诱导子。生物诱导子主要包括真菌类诱导子、细菌类诱导子、病毒类诱导子、酵母提取物等；而常用的非生物诱导子包括水杨酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯、稀土元素以及重金属盐类等。同时诱导子具有专一性、快速性、浓度效应、时间效应以及协同效应。因此在实际应用中需综合考虑与灵活运用，使诱导子在药用植物细胞培养发挥最佳促进作用。     

诱导子在药用植物细胞培养中的应用

详细地介绍了在药用植物细胞培养中诱导子的概念，常用的诱导子种类及其生物学特征。诱导子根据防卫反应可分为内源性诱导子和外源性诱导子；根据特异性可分为特异性诱导子和非特异性诱导子；根据其来源可分为生物诱导子和非生物诱导子。生物诱导子主要包括真菌类诱导子、细菌类诱导子、病毒类诱导子、酵母提取物等；而常用的非生物诱导子包括水杨酸、茉莉酸、茉莉酸甲酯、稀土元素以及重金属盐类等。同时诱导子具有专一性、快速性、浓度效应、时间效应以及协同效应。因此在实际应用中需综合考虑与灵活运用，使诱导子在药用植物细胞培养发挥最佳促进作用。     

VEGF DNA疫苗注射部位对小鼠抗原表达与Th细胞活性的影响

目的探讨小鼠不同部位皮下注射VEGF DNA疫苗对抗原表达与Th细胞活性的影响，为DNA疫苗在体内获得良好的细胞免疫提供优化条件。方法用RT-PCR法从A459细胞株中扩增570 bp的VEGF片段，此片段构建成真核表达重组质粒pVAX1-VEGF；在小鼠耳廓、胸部、腹部及背部皮下注射1μg/μl的pVAX1-VEGF DNA100μl，ELISA法检测血清中VEGF抗原表达水平和脾细胞产生的IL-4及IFN-γ动态变化。结果小鼠耳廓、胸部及腹部免疫，VEGF抗原表达较强，其中耳廓免疫所激活的Th1细胞最强，产生524.2 pg/ml IFN-γ，与胸部、腹部及背部免疫的效果相比，差异显著；pVAX1-VEGF疫苗组与pVAX1对照组的Th1与Th2细胞活性差异均显著，不同部位的pVAX1-VEGF疫苗组对Th2细胞活性无明显影响。结论本研究所构建人源VEGF的DNA疫苗能在小鼠体内有效表达，且不同部位皮下免疫后均可激活Th细胞，但以Th1细胞效应为主和耳廓皮下接种最佳。