高效液相色谱法测定洛莫司汀脂质体药物含量及包封率

目的:建立测定洛莫司汀脂质体药物含量及包封率的RP-HPLC法。方法:采用Diamonsil~(TM)C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-0.05mol·L~(-1)磷酸二氢铵溶液-三乙胺(60∶40∶0.2,磷酸调pH为3.5);柱温:室温;流速:1.0mL·min~(-1);紫外检测波长:232nm。采用Sephadex G-50分离洛莫司汀脂质体中的游离药物。结果:在本色谱条件下洛莫司汀与辅料及溶剂峰分离良好,洛莫司汀在4.0-48.0μ·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=1.0,n=5),回收率在98.0%-101.0%之间,日内RSD及日间RSD均小于2%(n=5)。结论:说明该方法准确可靠、简单快速,可用于洛莫司汀脂质体含量及包封率的测定。     

基于剪切波频散超声振动的黏弹性检测系统开发

目的 为实现离体组织黏弹性检测,建立一套超声黏弹性检测系统。方法 该系统基于剪切波频散超声振动方法,利用超声辐射力激励组织产生谐波运动,然后检测振动产生的剪切波传播特性,从而估算组织的黏弹性值。采用该系统进行标准仿体实验和大鼠肝脏实验,并完成对系统的初步评估。结果 标准仿体的检测结果与仿体标定的弹性系数值接近,大鼠肝脏的黏性系数和弹性系数值分别为(1.12±0.41) Pa?s、（0.81±0.40）kPa。结论 通过标准仿体实验和大鼠肝脏的实验,证明采用该系统进行离体动物实验的可行性,为实现人体肝纤维化检测作初步探索。     

洛莫司汀脂质体的制备及其在大鼠体内的药动学

目的 研究洛莫司汀(CCNU)脂质体的制备方法并考察用聚乙二醇单甲醚(2000)胆固醇琥珀酸酯(PEGCHS)修饰前后的2种脂质体静脉给药后在大鼠体内的药动学.方法 用改良逆相蒸发法制备普通和PEGCHS修饰的CCNU脂质体,测定包封率和粒径,静脉注射给药后,以格列苯脲为内标,采用高效液相色谱法测定血液中的药物含量;并采用3P87药动学程序进行数据处理.结果 制备的洛莫司汀脂质体包封率高(＞80%),平均粒径50 nm左右;CCNU PBS溶液、CCNU脂质体和用PEGCHS修饰的CCNU脂质体的t1/2α分别为0.061 8,0.093 1和0.153 l h;t1/2β分别为0.087 9,0.416 2和1.002 1 h;AUC分别为13.520 7,86.9113和166.640 6 mg·h·L-1.结论 制备的CCNU脂质体包封率较高,粒径小;2种CCNU脂质体均可不同程度地增加CCNU的AUC,延长其在血液循环中的时间,并以用PEGCHS修饰的CCNU脂质体效果最好.     

心胸外科病人术前指导效果分析

心脑外科手术具有手术过程复杂、范围广，手术危险性较大，病人恐惧心理明显，术后容易发生并发症的特点。做好术前指导，使病员、家属了解手术过程，加强术前锻炼，增强病人康复的信心，是促使手术成功以及预防术后并发症的重要一环。我院胸外科自90年代初即注重手术病人的术前指导工作，并逐年完善，纳入责任制护理，已形成一套规范的工作程序，在手术病人的康复过程中，起到了很大的促进作用。现将1996～1997年度心胸外科手术病人的术前指导进行效果分析如下：     

宣白承气汤治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重痰热壅肺证临床疗效及对C反应蛋白、降钙素原和中性粒细胞百分比的影响

目的观察宣白承气汤治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)痰热壅肺证临床疗效及对C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)和中性粒细胞百分比的影响。方法将100例AECOPD痰热壅肺证患者按照随机数字表法分为2组。对照组50例予常规西医治疗;治疗组50例在对照组治疗基础上联合宣白承气汤治疗。2组疗程均为10 d。比较2组治疗前后CRP、PCT水平及中性粒细胞百分比,并统计疗效。结果治疗组总有效率96. 00%,对照组总有效率80. 00%,治疗组疗效优于对照组(P 0. 05)。治疗组治疗后咳嗽、咯痰、喘息、胸闷、口干口渴、大便干结评分及主症积分、次症积分、总分均降低(P 0. 01),对照组治疗后咳嗽、咯痰、喘息、胸闷、口干口渴评分及主症积分、次症积分、总分均降低(P 0. 01,P 0. 05)。治疗组治疗后咳嗽、咯痰、喘息、口干口渴、大便干结评分及主症积分、次症积分、总分均低于对照组(P 0. 01,P 0. 05)。治疗后2组CRP、PCT、中性粒细胞百分比均降低(P 0. 05),治疗组治疗后均低于对照组(P 0. 05)。结论宣白承气汤治疗AECOPD痰热壅肺证患者的疗效满意,可明显改善症状,降低CRP、PCT及中性粒细胞水平,有效抑制机体急性炎性反应,进而有助于患者康复。     

口服胸腺肽肠溶微球的制备及其体内外评价

 目的制备胸腺肽肠溶微球,并对其体外释药特性及调节免疫的体内活性进行评价。方法以聚丙烯酸树脂Ⅱ号为载体材料,用改良的O/O液中干燥法制备胸腺肽肠溶微球。考察了载药量、聚合物浓度对包封率和微球体外释药特性的影响,并进一步探讨口服胸腺肽微球对氢化可的松免疫抑制小鼠免疫功能的影响。结果实验表明,随着载药量的增加,包封率呈下降趋势;聚合物溶液浓度提高会增加微球的包封率。通过优化制备工艺参数,药物包封率可达89.7%。胸腺肽微球在体外释药有明显突释,提高聚合物浓度,降低载药量可以减少体外突释。氢化可的松免疫抑制小鼠经口服胸腺肽微球后可以提高小鼠淋巴细胞玫瑰花结形成率,证明所制备的胸腺肽微球具有免疫调节活性。结论用改良的O/O液中干燥法制备胸腺肽肠溶微球,通过调节制备工艺参数,可以得到高包封率的微球。动物实验表明,胸腺肽肠溶微球口服后具有调节和增强免疫的作用。     

洛莫司汀脂质体的制备

采用逆相蒸发法制备洛莫司汀脂质体。采用正交试验法优化处方及工艺。优化后的脂质体外观圆整而均匀,平均包封率为(85.2±1.0)%,94.9%以上的脂质体粒径在100nm以下,平均粒径为(47.5±3.1)nm。     

人参皂苷Rg1经线粒体通路抗Aβ25-35致原代大鼠皮层神经元凋亡

目的:通过人参皂苷Rg1与原代培养大鼠皮层神经元预培养,评价抗β淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)所致神经元损伤,并探讨Rg1的神经保护作用及相关分子机制。方法:原代神经元培养7 d成熟后,分别以1、10、20μmol/L Rg1预处理24 h,加入Aβ毒性片段Aβ25-3510μmol/L模拟阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)脑组织局部微环境。孵育72 h后,光镜观察细胞形态学改变,评价Rg1是否具有神经保护作用及相关量效关系。采用JC-1染色,考察神经元线粒体膜电位(ΔΨm)变化,并运用Western blot技术,检测凋亡相关蛋白的表达变化。结果:Aβ25-35作用72 h严重损伤原代皮层神经元,引起神经元碎裂和死亡。Rg1预处理能对抗Aβ25-35的细胞损伤作用,显著提高神经元存活率,并呈现剂量依赖性,其中Rg1(20μmol/L)活性最强。Aβ25-35处理24 h能降低神经元的线粒体ΔΨm,下调Bcl-2/Bax的比值,引起细胞色素c从线粒体释放入胞浆,活化caspase 3和caspase 9,从而引起神经元凋亡。而Rg1预培养能保护原代神经元,减轻或避免上述损伤作用,且其抗凋亡效应可被雌激素受体(ER)拮抗剂ICI182,780和糖皮质激素受体(GR)拮抗剂RU486部分拮抗。结论:Rg1在1μmol/L至20μmol/L浓度具有抗Aβ25-35损伤原代培养大鼠皮层神经元作用,该活性与抑制线粒体凋亡通路相关联。     

何氏桑麻杏贝汤对慢性阻塞性肺疾病急性加重期影响的临床观察

目的观察何氏桑麻杏贝汤联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的临床疗效。方法将60例慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者随机分成治疗组和对照组,每组30例。对照组予西医常规治疗,治疗组予何氏桑麻杏贝汤加西医常规治疗。两组疗程均为14天,观察临床疗效,比较咳嗽症状总积分、内毒素鲎测定水平、肺功能及呼吸困难等级(m MRC等级)的变化情况。结果 (1)治疗组、对照组临床总有效率分别为93.3%、66.7%;组间临床疗效比较,治疗组明显优于对照组(P0.05)。(2)组间治疗后比较,咳嗽症状总积分与FEV1(%)水平差异有统计学意义,治疗组改善程度明显优于对照组(P0.05)。(3)治疗前后组内比较,两组内毒素鲎测定水平差异均有统计学意义(P0.05);组间治疗前后差值比较,内毒素鲎测定水平差异有统计学意义,治疗组降低幅度明显大于对照组(P0.05)。(4)组间治疗后比较,m MRC等级变化差异有统计学意义,治疗组明显优于对照组(P0.05)。结论何氏桑麻杏贝汤联合西药治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期的疗效满意,可明显改善患者气流受限症状,有效抑制机体急性炎症反应,进而有助于尽快控制病情。     

声辐射力脉冲弹性成像技术评估大鼠非酒精性脂肪肝及肝纤维化

目的 探讨利用声辐射力脉冲成像（ARFI）技术评估大鼠肝脏非酒精性脂肪肝（NAFLD）及肝纤维化的价值。方法 通过喂养高脂食物建立不同阶段NAFLD大鼠模型。解剖大鼠,取右叶肝脏嵌入明胶仿体内用于ARFI检查,测量大鼠肝脏剪切波速度（SWV）,将其余肝组织用于组织学评估,并根据NAFLD活动性评分（NAS）,将大鼠分为正常组（NAS=0）,单纯性脂肪肝（SS）组（1≤ NAS≤ 2）,边界组（3≤ NAS≤ 4）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）组（NAS≥5）。通过ROC曲线分析评估ARFI判断不同程度NAFLD及肝纤维化的能力。结果 正常组、SS组、边界组、NASH组间SWV值总体差异有统计学意义（F=31.53,P<0.001）。以SWV值≥2.54 m/s鉴别正常组与SS组、以SWV值≥2.90 m/s鉴别SS组与NASH组,对应的ROC曲线下面积（AUC）分别为0.922[95%CI(0.871,0.973),P<0.001]、0.882[95%CI(0.807,0.956),P<0.001],敏感度分别为93.5%、83.3%,特异度分别为100%、84.2%。以SWV值≥3.48 m/s诊断≥F2期肝纤维化、以SWV值≥3.61 m/s诊断≥F3期肝纤维化、以SWV值≥4.50 m/s诊断肝硬化（F4期）的AUC分别为0.963[95%CI(0.909,1.000),P<0.001]、0.997[95%CI(0.990,1.000),P<0.001]、0.993[95%CI(0.982,1.000),P<0.001],敏感度分别为92.9%、100%、100%,特异度分别为97.6%、98.9%、96.8%。结论 ARFI技术测量的SWV值可有效评估NAFLD及含有NAFLD的肝纤维化程度。