提高实验教学效果之浅见

实验教学的好坏,直接关系到教学质量的高低,笔者在实验教学中积累了一些经验与体会,介绍如下:     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中吴茱萸次碱浓度

建立大鼠血浆中吴茱萸次碱的反相高效液相色谱法。以乙腈 水 (5 8∶4 2 )为流动相 ,地西泮为内标 ,在波长 3 4 5nm处检测。吴茱萸次碱浓度在 0 0 2～ 1 6μg/mL呈线性 ,相关系数为 0 999,高中低 3种浓度平均萃取回收率均大于 80 0 %     

Ap-1基因RNA干扰对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的探讨Ap-1基因RNA干扰抑制血管平滑肌细胞（VSMCs）基因对VSMCs增殖的影响。方法以Ap-1基因RNA干扰VSMCs基因，应用MTr比色试验检测VSMCs增殖情况，流式细胞仪检测VSMCs细胞周期，免疫细胞化学染色观察增殖细胞核抗原（PCNA）表达。结果siRNA转染后，3个阳性siRNA转染组Ap-1基因表达水平均降低；VSMCs的MTY吸光度值和PCNA表达量均降低；VSMCs出现明显的G0／G1期阻滞。结论RNA干扰介导的Ap-1基因沉寂可显著抑制VSMCs增殖。     

卡维地洛与缬沙坦联用治疗慢性心力衰竭的临床研究

目的:探讨卡维地洛与缬沙坦联用治疗慢性心力衰竭临床效果。方法:选取慢性心力衰竭患者90例,采用随机数字表法分为两组,对照组45例,采用常规抗心力衰竭治疗;治疗组45例,在常规治疗基础上,采用卡维地洛与缬沙坦联合治疗,治疗结束后比较两组患者临床治疗总有效率,治疗前后超声心动图指标、6 min步行试验及心率等。结果:治疗组患者治疗总有效率优于对照组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);两组患者治疗后LVEF、LVEDD及LVESD等超声心动图指标均优于治疗前,同时治疗组患者治疗后LVEF、LVEDD及LVESD等超声心动图指标改善亦优于对照组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:卡维地洛联合缬沙坦治疗慢性心力衰竭对于患者心脏功能改善效果明显,可作为临床首选治疗手段。     

肺损伤中炎性细胞因子作用的研究进展

细胞因子（Cytokines,CKs）在机体免疫应答过程中起着十分重要的作用,因其参与免疫反应和炎症反应过程而成为目前关于发病机制研究的热点之一,其在肺部炎性损伤中具有调节炎性细胞功能及行为、影响炎性反应及转归的重要作用。根据其对炎症反应的不同影响,可分为前炎性细胞因子和抗炎性细胞因子两类。前炎性细胞因子主要包括IL-1、IL-5、IL-6、IL-8、IFN-γ及TNF等,     

创伤后应激障碍大鼠海马中脑源性生长因子的表达变化

目的研究创伤后应激障碍(PTSD)大鼠血浆、海马CA_1区和齿状回神经元内脑源性生长因子(BDNF)的变化。方法用单一连续刺激(SPS)方法刺激大鼠产生PTSD模型,另进行强迫游泳(FS)刺激作为对照,ELISA检测不同时间(正常、刺激后2 h、12 h、1 d、7 d以及7 d后再次给予强迫游泳后2 h)大鼠血浆BDNF;取SPS后2 h、7 d、SPS+再次游泳后2 h和FS+再次游泳后2 h鼠脑组织,正常脑组织为对照,免疫组织化学技术观察大鼠海马神经元内BDNF的表达,以及采用荧光实时定量PCR法检测大鼠海马神经元内的BDNF-mRNA相对表达。结果大鼠经SPS刺激后2 h时血浆BDNF明显高于正常,7 d时与正常大鼠无明显差异,SPS+再游泳-2 h时明显高于各时间段及FS+再游泳后2 h;大鼠海马CA1区、齿状回内BDNF的表达以及海马内BDNF-mRNA相对表达也出现相似的改变。结论 PTSD大鼠血浆中BDNF浓度变化与海马内BDNF表达相关,BDNF的改变影响PTSD大鼠对创伤刺激的恐惧记忆形成、巩固和再摄取。     

晚期糖基化终产物受体在糖尿病大鼠自体移植静脉中的表达及氨基胍的干预作用

目的 探讨晚期糖基化终产物受体（RAGE）在糖尿病大鼠自体移植静脉中的表达及氨基胍对其内膜增生的干预作用。方法 雄性SD大鼠60只，随机均分为氨基胍组、蒸馏水组及对照组，前2组行链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型，并分别用氨基胍或蒸馏水灌胃，对照组为未作处理的正常大鼠。3组均建立自体静脉移植模型后，于术后第7d及14d测定血清晚期糖基化终产物（AGE）含量，同时取自体静脉移植标本进行组织形态学观察，Westernblot和免疫组织化学染色方法检测RAGE及NF-KBp65的蛋白表达，半定量RT-PCR检测RAGE及NF—xBp65mRNA的表达。结果 术后第7d及14d，相对于对照组大鼠，蒸馏水组糖尿病大鼠自体移植静脉内膜增生加重，血清AGE含量增加，RAGE和NF—kB p65mRNA和蛋白表达增强，差异均有统计学意义（P〈0．05）；氨基胍组血清AGE含量、NF—kB p65蛋白和mRNA表达及内膜增生均较蒸馏水组减少或减轻（P〈0．05），与对照组相比差异无统计学意义（P〈0．05）。结论 糖尿病大鼠自体移植静脉RAGE表达增强，激活NF—kB，与移植静脉内膜增生关系密切；氨基胍抑制AGE的产生，可阻断AGE-RAGE结合，减轻内膜增生。     

返魂草提取物对胃溃疡大鼠胃黏膜炎症反应的调节作用

目的：探讨返魂草提取物对胃溃疡大鼠胃黏膜炎症反应的调节作用。方法：采用冰醋酸注射法制备大鼠胃溃疡模型,随机分为模型组、雷尼替丁组（西药组）、返魂草低剂量组（低剂量组）、返魂草中剂量组（中剂量组）和返魂草高剂量组（高剂量组）,设立正常对照组（空白组）。在光镜下观察大鼠溃疡炎症细胞密度,应用EL-LISA法检测血清及胃黏膜EGF及TNF-α含量。结果返魂草提取物各剂量组均能使再生黏膜炎症细胞密度减少,与模型组比较有非常显著性差异（P〈0.01）,返魂草中剂量组及高剂量组疗效优于西药组（P〈0.05或P〈0.01）。模型组胃黏膜TNF-α水平较空白对照组明显增加（P〈0.01）,血清TNF-α水平也有一定程度的上升（P〈0.05）,返魂草提取物治疗组胃黏膜TNF-α水平明显低于模型组（P〈0.01）。治疗组血清及胃黏膜EGF含量较模型组及空白组升高（P〈0.05或P〈0.01）。结论：返魂草提取物能减轻炎症细胞的浸润,抑制炎性细胞因子的释放,从而促进胃溃疡的愈合,提高胃溃疡愈合质量。     

β-榄香烯氨基酸衍生物的合成及抗肿瘤活性

目的设计合成β-榄香烯氨基酸衍生物,并进行体外、体内抗肿瘤活性研究。方法采用烯丙位的氯代反应合成β-榄香烯氯代物,再与氨基酸甲酯反应合成目标化合物。采用磺酰罗丹明B(SRB)染色法测定目标化合物体外对肿瘤细胞增殖的抑制作用,以小鼠腋下移植瘤为模型进行体内抗肿瘤试验,考察化合物5h对Lew is肺癌LL/2、肝癌H22模型的抑制作用。结果共合成15个β-榄香烯氨基酸和β-榄香烯氨基酸甲酯衍生物,其中12个化合物未见文献报道,合成化合物的结构经红外光谱、核磁共振氢谱和质谱确证。大部分目标化合物对人癌细胞HL-60、HeLa、SGC-7901的IC50值低于β-榄香烯。体内试验结果显示,化合物5h对Lewis肺癌LL/2、肝癌H22的生长有显著抑制作用。结论在β-榄香烯结构中引入氨基酸或氨基酸甲酯结构片段有利于提高此类化合物的抗肿瘤活性。