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目的 探讨补肾活血方(巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等)对肾虚血瘀型子宫内膜增生症
(Endometrial hyperplasia,EH)大鼠的作用及机制。方法 将90 只SD 大鼠随机分为正常组、模型组、米非司
酮组(12 mg·kg-1)及补肾活血方低、中、高剂量组(1.2、2.4、4.8 g·kg-1),每组15 只。采用灌胃羟基脲及戊酸
雌二醇,联合尾静脉注射高分子右旋糖苷法复制肾虚血瘀型EH 大鼠模型。造模成功后,各组按照设定剂量灌
胃给药,每日1 次,连续21 d。实验结束后,采用生化法检测各组大鼠血清环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷
(cGMP)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、促甲状腺激
素(TSH)的水平以及全血黏度、血液流变学、凝血功能等指标;ELISA 法检测血清雌激素(E2)、卵泡雌激素
(FSH)、黄体生成素(LH)、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的水平;HE 染色法观察子宫内膜组织病理形态变
化,并测量子宫内膜厚度;免疫组化法检测子宫内膜组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制
物1(TIMP-1)蛋白表达水平;Western Blot 法检测子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1、B 细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、
Bcl-2 相关X 蛋白(Bax)、第10 号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)蛋白表达水平。结果 与
正常组比较,模型组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO 比值均明显降低
(P<0.05,P<0.01),cGMP、E2、FSH、LH、NO 水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);血液流变学各项指标
及纤维蛋白原(FIB)含量均明显升高(P<0.05),凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时
间(APTT)均明显延长(P<0.05);子宫指数及子宫内膜厚度显著升高(P<0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2
蛋白表达显著上调(P<0.01),TIMP-1、PTEN、Bax 蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,补肾活血
方组大鼠血清CORT、ACTH、cAMP、T3、T4、TSH、ET-1 水平及ET-1/NO 比值均明显升高(P<0.05,P<
0.01);cGMP、E2、FSH、LH、NO 水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);血液流变学各项指标及FIB 含量均明
显降低(P<0.05,P<0.01),TT、PT、APTT 均明显缩短(P<0.05);子宫指数及子宫内膜厚度均明显降低(P<
0.05,P<0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2 蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),TIMP-1、PTEN、Bax
蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论 补肾活血方能够改善肾虚血瘀型EH 大鼠的症状和体征,保护
子宫内膜血管内皮功能,以缓解子宫内膜增生,其作用机制与恢复MMP-9/TIMP-1 平衡,上调Bax、PTEN 表
达,抑制Bcl-2 表达有关。 相似文献
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目的 基于TLR4/NF-κB/MLCK 通路研究百合地黄汤对对氯苯丙氨酸(PCPA)及多因素刺激所致失眠伴
肠道菌群失调小鼠的治疗作用及机制,为临床用药提供理论依据。方法 将84 只KM 小鼠随机分为正常组、
模型组、阳性药物组(地西泮,1.38 mg·kg-1)、百合组(2.25 g·kg-1)、地黄组(2.25 g·kg-1)、百合地黄汤组
(4.5 g·kg-1)。采用夹尾2 min、昼夜颠倒24 h、垫料潮湿24 h、45°鼠笼倾斜24 h、交替鼠笼24 h、禁食不禁
水24 h、冷水浴3 min 等多因素刺激4 周结合PCPA 腹腔注射2 d 共同制备失眠小鼠模型。模型复制成功后,
给予相应的药物治疗。采用高架十字迷宫系统观察小鼠的焦虑样行为;通过翻正反射实验观察睡眠潜伏期和睡
眠持续时间;16sRNA 测序法分析小鼠肠道菌群组成结构;液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测脑和结肠γ-氨
基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、色氨酸(Trp)、5-羟色氨酸(5-HTP)、5-羟色胺(5-HT)的浓度变化;免疫组织
化学法检测结肠中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达情况;实时荧光定量PCR 法(qRTPCR)
检测结肠组织中基因白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、ZO-1、
Occludin、Toll 样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达情况;蛋白免疫印迹
法(Western Blot)检测结肠上皮组织中蛋白TLR4、NF-κB、磷酸化-核因子κB(p-NF-κB)、MLCK、肌球蛋白
轻链(MLC)和磷酸化-肌球蛋白轻链(p-MLC)表达情况。结果 与正常组小鼠比较,模型组小鼠在高架十字迷
宫中进入开臂区域的距离、在开臂区域停留的时间明显缩短(P<0.05);睡眠潜伏期明显延长、睡眠持续时间
明显缩短(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度降低(P<0.01);脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT 浓
度明显降低(P<0.01),Glu 浓度明显升高(P<0.01);结肠中GABA、Glu 浓度明显降低(P<0.01),Trp、5-HTP、
5-HT 浓度明显升高(P<0.01);结肠组织炎性因子IL-1β、IL-6 以及TNF-α 基因表达水平明显升高(P<
0.01),ZO-1、Occludin 基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),通路中TLR4、NF-κB、MLCK 基因表达水
平明显升高(P<0.01),TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC 蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组小鼠比
较,百合地黄汤能够明显延长失眠小鼠在高架十字迷宫中进入开臂区域距离、在开臂区域停留的时间(P<
0.05);明显缩短睡眠潜伏期、增加睡眠持续时间(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度升高(P<0.01);升高
脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT 浓度(P<0.05,P<0.01),降低Glu 浓度(P<0.01);升高结肠中
GABA、Glu 浓度(P<0.01),降低Trp、5-HTP、5-HT 浓度(P<0.05,P<0.01);下调IL-1β、IL-6、TNF-α
基因表达水平(P<0.01),上调ZO-1、Occludin 基因和蛋白表达水平(P<0.01),下调通路中TLR4、NF-κB、
MLCK 基因表达水平和TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC 蛋白表达水平(P<0.01)。结论 百合地黄汤能够
有效治疗失眠伴肠道菌群失调症状,其作用机制可能与调节脑和肠内神经递质紊乱、下调TLR4/NF-κB/MLCK 信
号通路表达、上调紧密连接蛋白表达、降低炎症反应,进而修复肠黏膜机械屏障有关。 相似文献
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目的 基于PPAR/JNK2通路探讨锦灯笼防治药物性肝损伤(DILI)的作用机制。方法 将50只Wistar大鼠随机分为5组:正常组、模型组、水飞蓟宾组(44.1 mg·kg-1)及锦灯笼高(6.67 g·kg-1)、低(1.67 g·kg-1)剂量组。采用对乙酰氨基酚(APAP,1 000 mg·kg-1)溶液灌胃复制DILI大鼠模型,同时给予相应药物灌胃,每日1次,连续30 d。检测大鼠血清生化指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX); HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)的表达情况;免疫荧光检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的表达情况;Western Blot法检测肝组织c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)、磷酸化氨基末端激酶2(p-JNK2)蛋白表达情况;qRT-PCR法检... 相似文献
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