商陆抗病毒蛋白不同结构域的抗乙型肝炎病毒活性

目的 比较全长和不同片段缺失型商陆抗病毒蛋白(PAP)基因真核表达质粒体外抗HBV作用及其细胞毒性作用.方法 将全长和不同片段缺失型PAP基因真核表达质粒用脂质体转染HepG2.2.15细胞,收获生长良好的HepG2.2.15细胞,转染前1 d,接种于24孔培养细胞板,培养20 h后,待细胞密度达到40%～50%时进行转染.细胞随机分为4组:pXF3H组,转染空质粒pXF3H作为对照;pXF3H-PAP_(12)组,转染全长PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP_(12);pXF3H-PAP_(14)组,转染C端缺失25个氨基酸的PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP_(14);pXF3H-PAP3_(34)组,转染既缺失N端69个氨基酸又缺失C端25个氨基酸的PAP的真核表达质粒pXF3H-PAP_(34).转染的质粒剂量为每孔1.0μg,终浓度为2.0μg/ml,质粒DNA(μg)和脂质体(μl)的比例为1:2.5,转染72 h后收集细胞及培养上清液.酶联免疫吸附法检测培养上清液HBsAg和HBeAg,荧光定量PCR检测HBV DNA水平,四甲基偶氮唑盐比色法检测各质粒对转染细胞的毒性作用.应用SPSS12.0软件包处理数据,两样本均数的比较采用t检验,率的比较采用χ~2检验.结果 对HBsAg、HBeAg、HBVDNA的抑制率,pXF3H-PAP_(14)组分别为56.3%、75.8%和61.7%,pXF3H-PAP_(12)组分别为61.4%、84.2%和63.2%,两组间差异无统计学意义.但pXF3H-PAP_(14)组细胞毒性 (抑制率为10.2%)明显低于pXF3H-PAP_(12)组(抑制率为27.1%),χ~2=7.7,P<0.01.pXF3H-PAP_(34)组无细胞毒性,但其抗HBV作用也丧失,对HBsAg、HBeAg、HBV DNA的抑制率分别为7.8%、11.0%、20.5%.结论 PAP的C端25个氨基酸与细胞毒性相关,与抗HBV活性无关;PAP的N端69个氨基酸与抗HBV活性相关.     

不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的测定

目的 测定不同产地枳壳中柚皮苷和新橙皮苷的量,研究不同产地枳壳的质量差异。方法 采用高效液相色谱法测定,色谱条件为Kromasil C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（20∶80）（用磷酸调节pH值为3）;体积流量1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长283 nm。结果 朱栾枳壳未检出柚皮苷和新橙皮苷成分;江枳壳、川枳壳、湘枳壳和常山胡柚均检出柚皮苷和新橙皮苷成分;陕西枳壳未检出新橙皮苷。江枳壳含7.5%柚皮苷、5.6%新橙皮皮苷,量均为最高。结论 朱栾枳壳与其他产地枳壳的成分有差异,不含有《中国药典》2010年版规定的柚皮苷和新橙皮苷成分。     

慢性乙型肝炎患者血清miR-21水平对肝纤维化程度的评估价值

目的探讨血清miR-21水平对慢性乙型肝炎患者肝纤维化的诊断价值。方法本研究共纳入73例慢性乙型肝炎患者,均按照肝脏病理学进行肝纤维化分期;采用qPCR检测患者血清miR-21水平。按照肝纤维化分期绘制受试者工作曲线,并通过曲线下面积评估血清miR-21水平对慢性乙型肝炎患者肝纤维化的诊断价值。结果将73例慢性乙型肝炎患者按照肝脏病理学结果进行肝纤维化分期,分为F0(6例),F1 (29例),F2(23例),F3(10例),F4(5例);随着肝纤维化分期的增加,患者血清miR-21水平逐渐升高,F2组高于F1组,F3组高于F2组,F4组高于F3组(F1对F2对F3对F4,0.881±0.330对1.234±0.340对1.441±0.255对1.762±0.212),两者呈显著正相关(r=0.683,P0.01);分别以血清miR-21水平≥0.9835,≥1.150和≥1.557为cut-off值,其诊断显著肝纤维化(F2)、严重肝纤维化(F3)和肝硬化(F4)的AUC值分别为0.860、0.854和0.929。结论血清miR-21水平检测简单,可有效评估患者慢性乙型肝炎肝纤维化程度。     

肝纤维化模型大鼠细胞因子平衡对肝脏β-连环蛋白表达的影响

目的 探讨四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化模型大鼠血清辅助性T细胞1型和2型(Th1/Th2)细胞因子平衡对其肝脏β-连环蛋白(β-catenin)表达的影响.方法 将75只大鼠分为对照组、己酮可可碱干预实验组和肝纤维化模型组,采用ELISA法检测各组大鼠血清中Th1型细胞因子(IFN-γ,TNF-α)、Th2型细胞因子(IL-4,IL-6)和Ⅳ型胶原的水平;免疫组织化学法检测各组大鼠肝脏β-catenin的表达和分布及Ⅳ型胶原占肝组织面积的百分比;单向方差分析描述细胞因子的变化规律,并借助双变量相关分析研究β-catenin的表达与细胞因子以及肝纤维化的相关关系.结果 模型组大鼠血清Th2型细胞因子水平明显高于实验组,更高于对照组,其积分光密度(ILD)分别为50 043.6,34 256.7,10 101.5(F=71.260,91.732,均P<0.05);而其血清Th1型细胞因子水平明显低于实验组,更低于对照组(F=50.420,10.625,均P<0.05),细胞因子发生了Th2极化;其肝纤维化程度明显高于实验组,更高于对照组;模型组大鼠肝脏β-catenin的表达明显高于实验组,更高于对照组(=92.030,均P<0.05).β-catenin在3组肝组织中的表达强度与其血清Th2细胞因子水平及其肝脏Ⅳ型胶原面积百分比均呈显著正相关关系(r=0.560,P<0.01;r=0.757,P<0.01).结论 大鼠血清细胞因子的Th2极化上调其肝脏β-catenin的表达,促进肝纤维化的发生和发展;β-catenin可作为肝脏纤维化严重程度的反应指标.     

β-连环蛋白对转化生长因子β 1活化HSC-T6细胞的影响

目的 观察β-连环蛋白对转化生长因子β 1(TGF β1)活化肝星状细胞(HSC)的影响. 方法通过脂质体介导,将β-连环蛋白真核表达质粒[pcDNA3.1(+)-β-catenin]和绿色荧光质粒pEGFP-N1共转染体外培养的HSC-T6细胞株,用逆转录PCR和Western blot法检测经TGF β1刺激后两组细胞smad3、β-连环蛋白mRNA及蛋白质的表达.组间比较采用方差分析.结果 β-连环蛋白转染阳性的HSC-T6细胞株经TGF β 1刺激后表达smad3、β-连环蛋白及其mRNA明显强于未转染β-连环蛋白基因的HSC-T6细胞,更强于正常培养的HSC-T6细胞,smad3mRNA相对表达量分别为;0.642±0.011、0.501±0.021、0.511±0.019、0.356±0.017,F=135.304,P<0.05;β-连环蛋白mRNA相对表达量分别为:0.783±0.021、0.543±0.033、0.538±0.024、0.212±0.019,F=267.340,P值均<0.05.smad3蛋白质相对表达量分别为:0.892±0.012、0.124±0.011、0.130±0.021、0.003±0.001,F=2823.813,P<0.05;β-连环蛋白相对表达量分别为:0.921±0.020、0.210±0.010、0.208±0.008、0.002±0.001,F=3440.982,P<0.05.β-连环蛋白和smad3蛋白质的表达均与α-平滑肌肌动蛋白的表达显著相关(r=0.901,P<0.01;r=0.939,P<0.01).结论 β-连环蛋白基因转染体外培养的HSC-T6细胞株,促使HSC表达smad3、α-平滑肌肌动蛋白增强,提示β-连环蛋白能增强TGF β1的致纤维化作用.     

不同预后的发热伴血小板减少综合征重症患者临床实验室指标对比分析

  目的   分析新型布尼亚病毒感染致发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)患者的临床实验室资料, 重点比较重症不同预后患者的实验室指标差异, 为早期预测疾病预后提供理论依据。   方法   调查两所医院2011年1月-2018年12月收治的所有确诊患者的临床实验室指标, 并对数据作统计学分析。   结果   研究共纳入确诊研究对象168例, 其中非重症117例, 重症51例; 重症患者预后好转30例, 预后不良21例。对重症不同预后患者实验室检查指标进行比较分析, 发现多项指标有统计学差异。此外, 预后不良重症患者昏迷、弥漫性血管内凝血、心力衰竭等临床症状比例高于预后好转的重症患者(均有P < 0.05)。   结论   针对可能发生预后不良的重症患者制定差异化的防治方案。     

《浙江省中药炮制规范》2015年版收载品种的变化情况

目的 介绍《浙江省中药炮制规范》2015年版收载品种的变化情况。方法 分为地方习用品种和独特炮制方法、新增品种和新炮制工艺品种进行介绍。结果 《浙江省中药炮制规范》2015年版共收载632个品种,数量较2005年版大幅减少,结论 《浙江省中药炮制规范》2015年版接轨中国药典大幅提高质量标准,并扩大了先进检测技术的应用。     

HPLC测定毛叶香茶菜中迷迭香酸和冬凌草甲素含量

目的 建立高效液相色谱法测定毛叶香茶菜中迷迭香酸和冬凌草甲素含量的方法。方法 采用Kromasil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速：1 mL·min^-1,检测波长：239 nm,柱温30 ℃。结果 迷迭香酸和冬凌草甲素的线性范围分别为9.53~4 765 ng和13.66~6 830 ng,平均加样回收率分别为103.3%和95.8%,RSD%分别为1.4%和1.9%。结论 该法简便、稳定、可靠、耐用性良好,可用于毛叶香茶菜的质量控制。     

藏红花的形性鉴别

藏红花的形性鉴别李文庭，池生莲藏红花：为鸢尾科植物藏红花的干燥柱头。外观常呈现疏松团块，由众多的扁平的柱头压集而成。柱头（俗称药丝）为红棕色，有油润光泽如细长线状长约２．５厘米、顶端较宽大，向下渐细，气清香味微苦。现介绍二种简单的鉴别方法：经验鉴别：...     

γ-干扰素诱导蛋白10与疾病关系的研究进展

IFN诱导蛋白10(IFN_γinducible protein 10,IP_10)是新近发现的一种重要的趋化因子,来源于活化的成纤维细胞、单核巨噬细胞、内皮细胞和淋巴细胞等30多种细胞;具有吸引中性粒细胞,促进多种细胞释放炎症因子等多种生物学作用。目前发现它可以作为结核的诊断指标,抗SARS_CoV,参与病毒性肝炎及艾滋病的免疫反应等多种生物作用。文中综述了近年来IP_10在多种疾病中的研究进展。