人肠癌RKO细胞周期依赖性激抑制因子基因启动子区甲基化状态的研究

目的 探讨人结肠癌RKO细胞周期依赖性激酶抑制因子(CKIs)家族启动子区CpG岛甲基化状态及其甲基化可逆性特征.方法 应用特异性DNA甲基转移酶(DNMTs)抑制剂5-Aza-2]-deoxycytidine(5-Aza-CdR)处理肠癌细胞,甲基特异性聚合酶链反应(Methylation-Specific PCR,MSP)、T-A克隆及DNA测序法分析RKO细胞CKIs家族抑癌基因p15ink4b、p16ink4a/CDKN2、p21/cip、p27/kip启动子CpG岛甲基化状态.结果 未经5-Aza-CdR作用的肠癌RKO细胞,其p15ink4b、p16ink4a/CDKN2基因组DNA胞嘧啶(C)保持不变,这提示在其单链DNA中胞嘧啶呈甲基化状态;而经5-Aza-CdR作用的肠癌RKO细胞,其p15ink4b、p16ink4a/CDKN2、p21/cip和p27/kip基因组DNA胞嘧啶均已变为胸腺嘧啶,表明在DNA单链中胞嘧啶已呈去甲基化状态.结论 肠癌RKO细胞周期INK4家族(p15ink4b和p16ink4a/CDKN2)基因的启动子区处于异常的高甲基化状态,而KIP/CIP家族(p21/cip和p27/kip)基因未处于高甲基化状态;5-Aza-CdR能较好地逆转肿瘤细胞INK4家族基因DNA高甲基化状态.     

启动子区5′CpG岛去甲基化对人结肠癌细胞生物学表型的影响

目的：探讨DNA启动子区5′CpG岛甲基化状态与人结肠癌RKO细胞增殖凋亡等生物学特征的关系。方法： 应用特异性DNA甲基转移酶（DNMTs）抑制剂-5-氮-2′-脱氧胞苷（5-Aza-2′-deoxycytidine，5-Aza-CdR）处理肠癌RKO细胞72 h，甲基化特异性PCR（methylation-specific PCR,MSP）及DNA测序法分析p16/CDKN2基因CpG岛甲基化状态；MTT、FCM、荧光染色及透射电镜检测启动子区去甲基化后细胞生长、形态和细胞周期凋亡的影响。 结果： DNMTs抑制剂能较好地逆转启动子区胞嘧啶甲基化状态；CpG岛去甲基化后能明显地抑制肠癌细胞的生长，增加细胞群体倍增时间（P<0.01），诱导肠癌细胞凋亡，影响肠癌细胞周期分布，并具有良好的量效依赖关系。 结论： 通过逆转CpG岛高甲基化能有效地抑制肠癌细胞增殖，为临床治疗大肠癌提供新的作用靶点。     

实验教学管理与改革

１实验室资源管理的突破１．１传统实验教学的弊端传统的实验教学格局是以各教研室为单位而独立进行运转的,各实验室间缺乏沟通,造成人力资源的浪费与设备资源的重复购置;实验室分布不合理,管理混乱,又始终不能解决实验室和实验设备利用率低,人、财、物普遍存在着浪费的问题。例如：我校微寄实验室,在第二学期由于开设班级较多,实验室几乎整日开课,有时甚至安排到课余时间去上;而此学期的组胚,临检等实验室却很少有课,其它如化学、生化、生理及药理实验室在不同学期同样有此现象。因此,实验室管理过于分散,实验室资源不能充分…     

葡萄糖神经酰胺合成酶在乳腺癌中的表达及与乳腺癌临床病理特征的相关性分析

目的探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)在乳腺癌中的表达及与乳腺癌临床病理特征的相关性。方法选取乳腺癌组织标本87例,同时选取癌旁组织作为对照,观察乳腺癌和癌旁组织中GCS表达情况,分析GCS表达与乳腺癌临床病理特征相关性。结果 87例乳腺癌组织GCS阳性表达63例(72.41%),癌旁组织GCS阳性表达40例(45.98%),GCS阳性表达率乳腺癌组织明显高于癌旁组织,差异有统计学意义(P0.05)。GCS表达与乳腺癌患者年龄、TNM分期、雌性激素受体(ER)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)及表皮生长因子受体(EGFR)相关(P0.05)。多因素相关性分析结果显示乳腺癌患者GCS表达与年龄、TNM分期、ER及EGFR呈正相关,与HER-2呈负相关。结论 GCS在乳腺癌组织中呈高表达,与ER和HER-2有一定关系,可能与乳腺癌癌细胞分裂、增殖、扩散和转移密切相关,能反映病情进展程度。     

肿瘤细胞减灭术联合腹腔热灌注化疗（CRS/HIPEC）治疗结直肠癌腹膜转移的现状和进展

腹膜是结直肠癌转移的好发部位。结直肠癌发生腹膜转移长期以来被认为预后很差,主要采用姑息性手段治疗。尽管化疗及靶向治疗在结直肠癌治疗上有很大进展,但对于腹膜转移的结直肠癌疗效并不理想。最近越来越多的证据表明,肿瘤细胞减灭术(CRS)联合腹腔内热灌注化疗(HIPEC)的治疗方法能给这部分患者带来较大的生存获益。本文综述了结直肠癌腹膜转移的诊治现状和相关进展。目前认为CRS联合HIPEC对选择的结直肠癌腹膜转移患者是一种安全有效的治疗模式,但HIPEC能否预防进展期结直肠癌发生腹膜转移,还有待进一步的临床试验研究。     

简论如何做好外科学教学

卫生院校的专业课教师，均毕业于医学院校。在校学习期间未接触到有关师范类课程的学习。对于心理学、教育学等方面知识较缺乏，故在教学中势必力不从心。作者通过认真听取有多年教学经验教师的示范课，同时不断自学教育理论知识，总结出一下几点提高临床外科教学效果的方法与技巧。     

中西医结合综合治疗对早期诊断妊娠高血压综合征一氧化氮和内皮素-1的影响

一氧化氮（NO）和内皮素-1（ET-1）与妊娠高血压综合征（以下简称妊高征）的发生关系密切。2007—12—2009—02，我们在早孕期常规饮食及保健基础上，采用中西医结合综合疗法积极防治早期诊断妊高征117例，并与常规孕期饮食及保健109例对照，观察对血浆NO和ET-1的影响，结果如下。     

临床医师接诊艺术及接诊效益

随着我国加入世界贸易组织，医疗市场的竞争越来越激烈，医院的地位已发生很大变化，许多医疗单位由坐等患者上门变成主动地吸引寻找患者，这其中不仅包含着以盈利为主的社会实践活动，如社区卫生服务站，医疗保健知识宣传，报纸、电台等的医疗广告，迎送患者，宾馆式礼仪、空姐式服务等等，还包含着人际之间的交往与交流，使医患关系具有了明显的人文性质，这样，医院及医务人员向患者展示其形象、素质及魅力就成为当然。医院需要医疗效益，但必须掌握好接诊艺术，才能将其转化为接诊效益。     

糖尿病并发症致残比率分析

本组病例系 1995年～2003年我院收治的2476例因糖尿病引发各种并发症病人,其中男986例,女1490例,病程4～27年不等.     

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目的报道我国首例JAK3突变致严重联合免疫缺陷(SCID)患儿资料并文献复习。方法 2011-04-25重庆医科大学附属儿童医院对1例疑似SCID患儿血标本(患儿、患儿父母及外祖母)进行JAK3基因PCR扩增、基因测序、单核苷酸多态性(SNPs)及TCRVβ亚家族克隆多态性分析。结果患儿免疫表型符合T-B+NK-,主要表现为反复呼吸道、消化道感染。JAK3基因突变为复合杂合突变,两个等位基因均为错义突变,分别来自父系第9外显子(1308G>A:R403H)和母系的第24外显子(3354G>A:R1085Q),患儿父母和外祖母分别为上述突变携带者。患儿T细胞抗原受体库未能检出。查阅文献截止2007年,国内外共35例患儿30种JAK3基因突变在JAK3base注册,免疫学表型均符合T-B+NK-SCID,但临床表现从经典SCID到基本正常均有报道。结论 JAK3缺陷患者外周血T细胞及NK细胞严重减少,B细胞数量正常或稍减少但存在功能障碍,免疫球蛋白水平明显降低,故临床表现为反复细菌和病毒感染,对临床症状及实验室检查高度怀疑JAK3缺陷的患者,可通过STAT5磷酸化分析、基因测序、蛋白印迹或流式测定JAK3蛋白含量等技术进一步明确诊断。主要治疗方式为干细胞移植,若不及时进行免疫重建多数死于婴儿期。