橙皮苷对免疫功能低下小鼠免疫调节作用的实验研究

目的研究橙皮苷(hesperidin,HDN)对小鼠免疫调节的作用。方法腹腔注射环磷酰胺(Cy)复制免疫功能低下的动物模型,测定胸腺、脾脏重量计算脏器指数;碳廓清法测定网状内皮系统吞噬功能;分光光度法测定血清溶血素IgM、IgG(HCIgM、HCIgG);绵羊红细胞(SRBC)的定量溶血测定法(QHS)测定脾溶血空斑形成细胞(PFC);噻唑蓝(MTT)法测定脾淋巴细胞增殖反应;二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应模型,观察HDN对小鼠迟发型变态反应(DTH)和T淋巴细胞亚群的影响。结果HDN可提高免疫低下小鼠的脏器指数、碳廓清指数K和吞噬指数α;HDN可以改善免疫抑制小鼠低下的脾淋巴细胞增殖反应,恢复小鼠DTH和提高CD4+、CD8+细胞数;对特异性HCIgM、HCIgG和PFC无影响。结论HDN对小鼠的非特异性免疫和特异性细胞免疫反应有促进作用,对特异性体液免疫反应无影响。     

奇士乐对佐剂性关节炎大鼠的免疫调节作用

目的研究中药复方奇士乐对佐剂性关节炎(AA)大鼠的免疫调节作用。方法以弗氏完全佐剂(FCA)制备AA大鼠模型,奇士乐灌胃(ig)给药治疗AA大鼠,以雷公藤多苷片ig给药作阳性对照。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测刀豆蛋白A(ConA)、脂多糖(LPS)诱导的AA大鼠脾淋巴细胞增殖反应;放免法测定白细胞介素(IL)-1、IL-2、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)的含量。结果奇士乐能明显抑制AA大鼠继发性足肿胀;上调ConA、LPS诱导的AA大鼠脾淋巴细胞增殖反应,促进IL-2分泌水平;同时奇士乐还可抑制AA大鼠腹腔巨噬细胞过高的IL-1、TNF-α、IL-6和PGE2的分泌。结论奇士乐对AA大鼠紊乱的免疫功能具有调节作用,其机制可能与调节细胞因子水平有关。     

豹皮樟总黄酮对佐剂性关节炎大鼠炎症免疫功能的影响

目的研究豹皮樟有效部位总黄酮（LCTF）对佐剂性关节炎（AA）大鼠炎症免疫功能的影响,探讨其治疗作用的机制。方法SD大鼠左后足跖皮内注射0.1ml,弗氏完全佐剂复制AA模型;大鼠免疫后12d开始分别灌胃LCTF66.5、133、266mg/kg,连续给药12d。组织块培养法分离培养大鼠滑膜细胞,透射电镜分析滑膜细胞内具分泌功能细胞器的形态学改变;放射免疫测定法检测腹腔巨噬细胞、滑膜细胞分泌IL-1β水平;探讨LCTF作用机制。结果LCTF133、266mg/kg可恢复A、B型滑膜细胞的分泌功能;纠正AA大鼠腹腔巨噬细胞、滑膜细胞过高分泌IL-1β的功能。结论LCTF可恢复AA大鼠滑膜细胞的形态及改善腹腔巨噬细胞、滑膜细胞过高的分泌炎性介质的功能是其治疗AA的途径之一。     

IL-10与HO-1在大鼠酒精性脂肪肝模型中的表达

目的 探讨IL-10和HO-1在酒精性脂肪肝模型中的作用和意义.方法 建立大鼠酒精性脂肪肝动物模型,检测大鼠血清IL-10以及TNF-α,肝匀浆中MDA、GSH以及SOD相关指标的变化;此外采用RT-PCR方法检测IL-10和HO-1 mRNA的表达.结果 随着肝脏损伤程度的加深,TNF-α的水平明显增加而IL-10却逐渐降低;肝匀浆中GSH和SOD的活性明显下降,但MDA却呈上升趋势;IL-10和HO-1mRNA表达也随着肝脏损伤程度的加深而减弱.结论 IL-10与HO-1的表达随着肝损伤程度的加重而逐渐降低,且构成一个新的抗炎途径参与了酒精性肝病的过程,从而为今后的酒精性肝病的临床治疗和药物研发提供新的思路.     

正交设计研究金银花绿原酸煎提工艺

目的:优选金银花绿原酸煎煮提取的最佳工艺。方法:利用正交试验法,以总浸膏得率和绿原酸含量为指标,考察粉碎度、提取时间、提取次数和加水量对煎煮工艺的影响。结果:最佳工艺为金银花粉末过50目筛,加水量30倍,煎煮3次,每次煎煮30 m in。     

白藜芦醇对小鼠酒精性脂肪肝的防治作用及机制研究

目的：观察白藜芦醇(RSV)对 Lieber-DeCarli 酒精液体饲料诱导的小鼠酒精性脂肪肝的作用,并初步探讨其可能的相关分子机制。方法6~8周龄雄性 C57BL/6J 小鼠随机分为6组：正常对照组、模型组、RSV (10、30、100 mg/ kg)组和谷胱甘肽(GSH,200 mg/ kg)阳性对照组,造模的同时给予药物干预共10 d,实验结束后称取体重,处死小鼠,收集血液和肝脏,分离血清测定相关指标,病理切片观察肝脏的脂肪蓄积,免疫组化法检测脂肪分化相关蛋白(ADRP)的表达,Western blot 法检测肝脏腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)及脂素(lipin1)的表达。结果与模型组比较,RSV 组血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平显著降低(P <0．01),但血清三酰甘油(TG)水平降低不明显;肝脏TG(低剂量： P <0．05,中、高剂量： P <0．01)和丙二醛(MDA)含量显著降低(P <0．01),超氧化物歧化酶(SOD)活性显著升高(P <0．01)。病理组织学结果显示 RSV 明显减轻肝脏脂肪变性,免疫组化法结果显示 RSV 能够抑制 ADRP的表达,Western blot 法结果表明 RSV 能激活 AMPK 活性,增加其磷酸化水平,并能抑制 lipin1蛋白的表达。结论 RSV对小鼠酒精性脂肪肝具有一定的保护作用,其机制可能与激活 AMPK-lipin1通路有关。     

美洛昔康凝胶治疗AA大鼠的疗效与局部药物浓度的关系研究

目的　探讨美洛昔康凝胶 (MelG)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的治疗作用以及治疗效果与MelG血药浓度和局部药物浓度之间的关系。方法　采用FCA诱导大鼠AA ,用Volumemeter测定大鼠足爪容积 ,用HPLC测定MelG的血药浓度和足爪局部药物浓度 ,将足爪肿胀度与MelG的血药浓度或局部药物浓度作相关分析。结果　MelG明显抑制AA大鼠继发性炎症 ,MelG组大鼠血药浓度低于Mel组 ,足爪局部药物浓度则明显高于Mel组 ;AA大鼠继发性足爪肿胀度与MelG的足爪局部药物浓度间呈显著负相关。结论　MelG对AA大鼠的治疗作用与其足爪局部药物浓度高有关。     

HPLC法测定血及组织中美洛昔康药物浓度

目的建立血及组织中美洛昔康药物浓度的高效液相色谱(HPLC)检测法.方法采用高效液相色谱法联用紫外检测器,检测血及组织中美洛昔康药物浓度.流动相:甲醇:水:冰乙酸:乙腈(600:500:20:50)V/V;检测波长:355 mm.结果血及组织中美洛昔康最低检测浓度0.039mg@L-1,检测限1.95 ng,Mel在血及组织中能得到很好的分离,线性范围为0.039～10mg@L-1,回归方程:Y＝313281.9X+4414.3,r＝0.9998,P＜0.05,回收率在85.67%～95.09%之间,日间、日内的变异均在5.6%以下,足爪局部回收率在80.13%～94.56%,符合生物样品分析的要求.结论本法操作简便,灵敏度高,准确性好.     

美洛昔康凝胶的透皮吸收及药代动力学研究

目的　观察兔单次皮肤外用美洛昔康 (meloxicam ,Mel)凝胶的透皮吸收及药物在体内的动态过程 ,估算其药动学参数。方法　采用高效液相 (HPLC)紫外检测不同时间的兔血清中Mel的含量。结果　Mel凝胶 (3 75 ,7 5 ,15mg·kg-1) 3个剂量组数据均适合一级吸收的二房室模型。Mel凝胶 (3 75、7 5、15mg·kg-1)的主要药动学参数分别为 :Tmax1h ,Cmax(1 42± 0 38)mg·L-1,AUC0～ 2 4 (5 95±1 47) ;Tmax 1h ,Cmax(2 30± 0 71)mg·L-1,AUC0～ 2 4(12 98± 5 0 8) ;Tmax(1 2± 0 45 )h ,Cmax(6 15± 1 47)mg·L-1,AUC0～ 2 4 (2 2 16± 6 5 2 )。结论　Mel凝胶吸收迅速 ,透皮吸收好 ,且在 3 75～ 15mg·kg-1剂量范围内 ,Mel在体内的药动学过程呈线性关系