载紫杉醇的大黄酸偶联物纳米胶束的制备及初步评价

目的制备载紫杉醇的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(PTX/TPGS-CR)纳米胶束,并对其进行初步评价。方法采用透析法,以载药量、包封率及粒径为指标,通过单因素考察优化PTX/TPGS-CR纳米胶束的制备工艺并进行验证。以溶血实验及血管刺激性实验初步考察PTX/TPGS-CR纳米胶束的安全性。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)法考察PTX/TPGS-CR纳米胶束对Hela细胞的毒性。通过激光扫描共聚焦显微镜定性和流式细胞仪定量考察Hela细胞对PTX/TPGS-CR纳米胶束的摄取情况。结果制备工艺优化后制得的PTX/TPGS-CR纳米胶束粒径为(197.3±4.4)nm,PDI为(0.131±0.021),电位为(-31.8±0.5)mV,载药量为(48.20±3.03)%,包封率为(87.26±4.91)%。溶血实验结果表明,其溶血率低于1.71%;血管静脉注射无明显刺激性。其对Hela细胞的杀伤作用具有浓度和时间依赖性,能被Hela细胞高效摄取。结论PTX/TPGS-CR纳米胶束载药量和包封率高,安全性好,其体外抗肿瘤活性稍优于Taxol?。     

载紫杉醇的大黄酸偶联物胶束对MCF-7细胞的毒性与细胞摄取研究

通过MTT法评估了羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(CR偶联物)和载紫杉醇(PTX)的CR偶联物胶束(PTX/CR偶联物胶束)对MCF-7细胞的细胞毒性，结果显示，CR偶联物具有良好的安全性；PTX/CR偶联物胶束24 h内表现出优于Taxol^®；的抗肿瘤活性。通过包载环境响应型荧光探针P4，考察了共载P4和PTX的CR偶联物胶束［(P4+PTX)/CR偶联物胶束］在MCF-7细胞中的摄取情况，结果显示，MCF-7细胞对其具有较好的摄取效果，(P4+PTX)/CR偶联物胶束组与其加维拉帕米组摄取量无显著性差异，提示CR偶联物胶束可以保护其所载荧光探针和/或药物不被P-gp外排到细胞外。该研究结果为CR偶联物及PTX/CR偶联物胶束的进一步体内研究奠定了基础。     

载紫杉醇的聚乙二醇修饰的大黄酸偶联物胶束的体内安全性及抗肿瘤药效学研究

目的 探讨载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束(PTX/CRmP胶束)作为静脉注射给药制剂的安全性,并对PTX/CRmP胶束在小鼠体内的抗肿瘤效果进行研究。方法 测定PTX/CRmP胶束的pH值及渗透压。以新鲜兔血红细胞检测溶血性。新西兰白兔耳缘静脉注射PTX/CRmP胶束溶液、CRmP偶联物溶液,光镜下对血管连同周围组织切片进行组织学检查。建立H-22荷瘤小鼠模型,随机分组,分别尾静脉注射给予0.9%氯化钠注射液、注射用PTX脂质体、PTX注射液和PTX/CRmP胶束低、中、高剂量(5,10,15 mg·kg^-1)。给药过程中每天观察小鼠活动情况,记录小鼠体质量变化、肿瘤体积,绘制体质量变化曲线、肿瘤体积变化曲线,计算抑瘤率,HE染色观察肿瘤组织切片。结果 不同浓度PTX/CRmP胶束溶液的pH值与血液pH值相近,渗透压为286～292 mOsm·kg^-1。浓度在0.01～0.05mg·mL-1内,CRmP偶联物及PTX/CRmP胶束的溶血率<5%;经耳缘静脉注射后,注射部...     

PEG修饰的大黄酸偶联物的合成及紫杉醇纳米胶束的制备

抗肿瘤药物紫杉醇(PTX)在水中的溶解度低,其临床制剂Taxol^®所使用的增溶剂Cremophor EL毒副作用大,影响其临床治疗效果。本研究设计PEG修饰羧甲基壳聚糖并接枝大黄酸,合成了两亲性mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物,作为PTX的递送载体材料,并制备了载PTX的CRmP纳米胶束(PTX/CRmP纳米胶束)。利用红外光谱(FT-IR)和核磁共振氢谱(¹H NMR)对CRmP偶联物进行结构表征。通过动态激光粒径仪(DLS)和原子力显微镜(AFM)对PTX/CRmP纳米胶束的粒径与形态进行表征。通过MTT法评估CRmP偶联物和PTX/CRmP纳米胶束对MCF-7细胞的细胞毒性,结果显示,CRmP偶联物具有良好的安全性;随给药时间的延长,PTX/CRmP纳米胶束在相同药物浓度下表现出优于Taxol^®的体外抗肿瘤活性。     

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的表征、体外释放及药动学研究

目的 对载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇修饰的大黄酸偶联物[PEGylated carboxymethyl chiosan-rhein conjugate (polymeric),PTX/CRmP]胶束进行形态与结构表征,考察其体外(模拟血液环境中)释放情况及药动学特征。方法 通过透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)、差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)、X射线衍射(X-ray diffraction,XRD)对胶束的粒径、形态及结构等方面进行评价;在pH 7.4磷酸盐缓冲液(含0.8 mol·L^-1水杨酸钠)中进行PTX/CRmP胶束的体外释放研究,计算PTX的累积释放率,绘制累积释放曲线;以大鼠为模型,尾静脉注射PTX/CRmP胶束后,通过药-时曲线、药动学参数等对其进行药动学研究。结果 TEM显示PTX/CRmP胶束呈类球形,粒径约160 nm,分布均匀;DSC和XRD显示PTX几乎全部被CPmP胶束包载入其内核中。PTX/CRmP胶束在pH 7.4磷酸盐缓冲液(含0.8 mol·L^-1水杨酸钠)中24 h内累积释放率为92.2%,药物释放速率显著慢于Taxol^®。药动学研究表明,与Taxol^®组相比,PTX/CRmP胶束中药物的分布和消除较慢,药-时曲线下面积显著增加,CRmP胶束能延长PTX半衰期及其在血液循环系统中的循环时间。结论 CRmP偶联物物理包载PTX于内核中所得的PTX/CRmP胶束,粒径小,在体外模拟血液pH环境中缓释,PTX生物利用度提高。     

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像研究

目的 探究载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像情况。方法 将环境响应型荧光探针P4/P2与药物PTX共载于mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束中,制备(P4+PTX)/CRmP胶束。以MCF-7细胞为细胞模型,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析该胶束被MCF-7细胞摄取的情况;以H22皮下移植瘤小鼠为模型,在体和离体成像分析该胶束在体内的分布情况。结果 (P4+PTX)/CRmP胶束以完整的胶束形式被MCF-7细胞内吞摄入,分布于细胞质。(P2+PTX)/CRmP胶束在荷瘤小鼠的肝脏和肿瘤部位较多聚集,并于实验时间内在肿瘤部位不断累积。结论 该胶束以完整的胶束形式被肿瘤细胞摄取,在体内有一定的肝靶向性和肿瘤靶向性。