载紫杉醇的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺

目的优化载紫杉醇(PTX)的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺。方法以载药量、包封率、粒径为考察指标,对载药和透析方法进行单因素考察,确定PTX/CR聚合物胶束的最佳制备工艺。结果最佳载药方法为透析法,最佳载药工艺以乙醇(30 mg/m L)作为PTX溶剂,载体CR浓度为7 mg/m L,药载比1∶1.4。结论 CR聚合物通过物理包载PTX形成载药量和包封率较好、粒径小的载药聚合物胶束。     

基于UPLC-MS/MS的大黄酸偶联物载药胶束在大鼠及比格犬体内药动学研究

目的 建立准确可靠的大鼠、比格犬体内紫杉醇(paclitaxel, PTX)血药浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)含量测定方法,对大鼠尾静脉注射、比格犬静脉滴注泰素?(Taxol?)注射液和载紫杉醇的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate, TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖(carboxymethyl chitosan, CMCS)-大黄酸(rhein, Rh)偶联物(PTX/TPGS-CR)纳米胶束后的药动学进行研究。方法 测定PTX/TPGS-CR胶束与0.9%氯化钠注射液、质量分数5%葡萄糖注射液输液配伍稳定性。血浆样品采用甲基叔丁基醚进行提取,通过UPLC-MS/MS分析测定大鼠尾静脉注射、比格犬静脉滴注PTX/TPGS-CR胶束和Taxol?后血浆样品中的药物浓度,绘制药-时曲线并计算药动学参数。结果 PTX/TPGS-CR胶束在0.9%氯化钠注射液复溶后8 h内粒径均无明显变化,无沉淀现象,粒径和多分散系数(polydispersity, PDI)较小。PTX...     

黄芩苷纳米胶束的制备、表征及其对MCF-7细胞抑制作用的研究

目的制备黄芩苷(baicalin,BCN)聚乙二醇维生素E琥珀酸酯(TPGS)纳米胶束(BCN-TPGS-PMs)以改善其溶解性和体外抗肿瘤效果。方法采用薄膜水化法制备BCN-TPGS-PMs;透射电子显微镜观察纳米胶束形态;粒度测定仪考察其粒径和Zeta电位;超速离心法考察制剂的包封率及载药量;动态膜透析法考察体外释药特性;四甲基偶氮唑盐(MTT)法考察其对人乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制作用。结果所制备的BCN-TPGS-PMs平均粒径为(11.91±0.14)nm;载药量和包封率分别为(5.42±0.04)%和(95.83±7.34)%;在体外p H 7.4、6.5的磷酸盐缓冲液(PBS)中24 h内分别释放28.53%和35.06%;表明所制备胶束粒径较小且均一,体外释放具有一定缓释性。同时体外细胞毒性实验表明BCN-TPGS-PMs较BCN能够显著地抑制MCF-7细胞的增殖(P0.05)。结论所制备的BCN-TPGS-PMs粒径小,载药量高,稳定性好,能显著提高BCN的体外抗肿瘤效果。     

酶敏感多肽胶束的构建及其向T细胞递送药物的可行性研究

目的 构建包载芳烃受体抑制剂CH223191的酶敏感多肽胶束并对其进行表征,初步评估此多肽胶束向T细胞递送药物的可行性。方法 采用固相合成法合成了序列为stearyl-HHHRRRRRPLGLAGK-(Mal)的多肽(SHRP)。制备了载药胶束SHRP-CH,测定了其粒径、载药量、临界胶束浓度等,评价其细胞毒性及免疫原性,并使用流式及激光共聚焦考察了CD8⁺T细胞对胶束的摄取效率。结果 SHRP-CH的粒径为(133.8±7.4)nm,酶处理后粒径减少为(92±5.8)nm,载药量和包封率分别为(7.1±1.2)%、(67.7±2.3)%,酶解前后的胶束均具备较低的细胞毒性;CD8⁺T细胞摄取实验证实了此胶束体系向T细胞递送药物的可行性。结论 SHRP多肽酶敏感胶束体系具有较好的载药能力及低细胞毒性,有希望成为T细胞药物递送的潜在载体。     

碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰去甲斑蝥素纳米胶束的肺靶向性研究

目的:制备碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰的去甲斑蝥素纳米胶束(anti-CA IX NCTD nano-micelle),探讨并比较其与普通去甲斑蝥素纳米胶束(NCTD nano-micelle)的抗肿瘤作用。方法:将碳酸酐酶Ⅸ抗体孵化修饰去甲斑蝥素纳米胶束,考察其载药率、包封率、粒径等指标;通过MTT法考察去甲斑蝥素及载药胶束对A549的细胞生存率为细胞摄取实验剂量设置提供依据;取荷瘤裸鼠分别尾静脉注射去甲斑蝥素和载药胶束,并观察裸鼠的饮食,精神状态,每周用游标卡尺测量肿瘤的大小,绘制肿瘤生长曲线。结果:制备的碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰的去甲斑蝥素纳米胶束呈圆球状,载药量为(1.26±0.03)%,包封率为(80.93±1.01)%,粒径和Zeta电位分别为146.5±48.9nm,-(14.79±0.67)mv;去甲斑蝥素及载药胶束对肿瘤细胞的抑制作用呈剂量和时间依赖性,载药胶束对肿瘤细胞的抑制作用明显优于游离药物,且anti-CA IX NCTD nano-micelle对A549的抑制率优于NCTD nano-micelle。结论:去甲斑蝥素纳米胶束经碳酸酐酶Ⅸ抗体修饰后能达到主动靶向的效果,同时能与去甲斑蝥素协同抑瘤,起到一举多得的目的。     

两亲性纳米胶束聚乙二醇接枝壳聚糖偶联脱氧胆酸-姜黄素的制备与评价

目的 合成聚乙二醇接枝壳聚糖偶联脱氧胆酸(mPEG-CS-DA)纳米载药系统,并以姜黄素(Cur)为模型药物,构建两亲性纳米胶束,并对其进行理化表征。方法 采用两步反应合成mPEG-CS-DA,分别用IR、¹H-NMR等技术对其结构进行表征,用差示扫描量热法(DSC)对其物理性质进行分析,并考察其在不同溶剂中的溶解性能。筛选mPEG-CS-DA-Cur纳米胶束制备方法,并测定其包封率、载药量、粒径分布及体外释放度。结果 以透析法制备的载药纳米胶束具有较高的包封率,较小的平均粒径和无残留溶剂的特点。mPEG-CS-DA-Cur的载药量为(12.11±1.52)%,包封率为(89.37±4.12)%,平均粒径为161.4 nm,分布均匀,胶束中药物体外释放缓慢、稳定。结论 研究合成了1种新型的两亲性壳聚糖衍生物,是1种良好的胶束载体材料,对难溶性药物Cur具有很好的包封率和载药量,为后续药物进行靶向性研究提供了一定的基础。     

pH/还原敏感型多柔比星前药胶束的制备及体外性能评价

目的 本实验以聚乙二醇 (polyethylene glycol,PEG) 和多柔比星(doxorubicin, DOX)合成的刺激敏感型前药聚合物(PEG-DOX)包载美法仑(melphalan,MEL),制备MEL/PEG-DOX纳米胶束,考察其体外协同抗肿瘤作用。方法 通过希夫碱反应将PEG化的二硫代二丙酸二酰肼(TPH)与DOX结合,形成pH/还原敏感型PEG-DOX前药纳米载体,通过其自组装性能制备MEL/PEG-DOX载药胶束。用透射电镜观察其形态,粒径仪测定其粒径和电位,用超滤法测定载药量和包封率,用透析法评价胶束的药物释放,采用MTT法评价细胞毒性。结果 通过核磁共振氢谱验证了所制备的刺激响应型PEG-DOX前药聚合物;其PEG-DOX载体平均粒径为(188±2.4)nm,多分散系数(PDI)为(0.255±0.008);MEL/PEG-DOX载药胶束的平均粒径为(299.7±2.4)nm,多分散系数(PDI)为(0.301±0.03),Zeta电位为(-0.385±0.02) mV;DOX载药量为(14.85±0.24)%,包封率是(85.78±0.37)%,MEL载药量为(7.36±0.36)%,包封率为(38.79±0.42)%;体外药物释放实验结果表明,MEL/PEG-DOX胶束具有还原敏感和pH敏感性,且还原敏感性大于pH敏感性;细胞毒性实验分析,DOX和MEL在细胞内共同释放,实现了对肿瘤细胞的联合杀伤。结论 MEL/PEG-DOX可以在肿瘤微环境特异性释放,对肿瘤细胞具有协调治疗的作用,具有良好的应用前景。     

TPGS-壳聚糖载紫杉醇胶束的制备及大鼠在体肠吸收研究

目的将聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯(D-α-tocopherol polyethyleneglycol 1000 succinate,TPGS)接枝于壳聚糖(chitosan,CS)分子中,形成共聚物TPGS-CS,并以紫杉醇(paclitaxel,PTX)为模型药物,构建TPGS-CS/PTX载药胶束,考察其在大鼠各肠段吸收情况。方法将琥珀酸酐(succinic anhydride,SA)、4-二甲氨基吡啶(4-dimethylaminopyridine,DMAP)与CS发生酰胺化反应,制备TPGS-CS共聚物,采用红外光谱仪和核磁共振波谱仪对产物进行表征。以PTX为模型药物,采用超声乳化法制备载药聚合物胶束,用HPLC法测定包封率和载药量;用动态光散射法(dynamic light scattering,DLS)测定粒径和Zeta电位;采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察胶束形貌;基于在体肠吸收实验计算药物的吸收速度常数(absorption rate,Ka)。结果红外与核磁结果表明,TPGS通过酰胺键接枝于CS上;TEM观察结果显示,胶束微观形态规整、粒径均匀;大鼠在体肠吸收实验证实,与PTX参比制剂相比,TPGS-CS/PTX胶束在大鼠各肠段吸收速率提高20%,提示该胶束载药系统可能具有更高的生物利用度。结论成功构建了TPGS-CS胶束载药系统,胶束性质优良,与PTX参比制剂相比,一定程度提高了PTX的吸收速度常数,促进药物口服吸收。     

乳糖酸修饰的黄芩苷自组装胶束载药系统的制备及体外评价

目的制备乳糖酸(lactobionic acid,LA)修饰的O-羧甲基壳聚糖(O-carboxymethyl chitosan,OCMC)偶联黄芩苷(baicalein,BC)的自组装胶束,并考察其作为载体共同递送阿霉素(doxorubicin,DOX)和黄芩苷的可行性。方法以OCMC为水溶性骨架,通过酰胺化反应依次将黄芩苷、乳糖酸偶联到骨架上,分别获得O-羧甲基壳聚糖-黄芩苷偶联物(CMBC)和靶向的乳糖酸-O-羧甲基壳聚糖-黄芩苷偶联物(LA-CMBC)。利用核磁、红外确证偶联物的结构;透析-超声法制备自组装胶束并表征;芘荧光探针法测定临界聚集浓度(critical micelle concentration,CMC);制备载药胶束DOX/LACMBC,紫外测定阿霉素的包封率和载药量;透析法考察载药胶束在不同pH值条件下的释放行为;MTT法考察体外抗肿瘤活性。结果为考察取代度对粒径的影响,制备了3种取代度的CMBC胶束,粒径在164～215 nm,LA-CMBC和DOX/LACMBC胶束的粒径分别约为156 nm和180 nm。LA-CMBC胶束的CMC值为(0.081±0.019)mg/mL。载药胶束中阿霉素的包封率为(69.67±3.87)%,载药量为(16.08±0.25)%。体外释放表明DOX/LA-CMBC具有缓释性和pH敏感性。细胞毒性实验表明,DOX/LA-CMBC胶束对HepG2肝癌细胞生长具有显著的抑制作用。结论制备的载药胶束DOX/LA-CMBC粒径均匀、载药量较好,提高了黄芩苷的水溶性,且具有良好的pH敏感性和抗癌活性。     

载阿霉素混合胶束的制备及制剂工艺优化

目的制备载阿霉素(DOX)的混合胶束,并优化其冻干制剂工艺。方法以TPGS-甘草次酸偶联物(TG偶联物)和TPGS修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(TCR偶联物)为混合胶束载体材料(TCR-TG),利用透析法制备载DOX的混合胶束(DOX/TCR-TG胶束),以载药量、包封率、粒径为评价指标,考察TG偶联物和TCR偶联物的投料比、DOX与TCR-TG的投料比,确定DOX/TCR-TG胶束最佳制备工艺。考察冻干保护剂的种类及用量,确定DOX/TCR-TG胶束的最佳冻干工艺。结果 DOX/TCR-TG胶束平均粒径为(121.3±8.49)nm,PDI为(0.21±0.02),Zeta电位为(-21.9±0.2)mV,载药量为(31.22±3.19)%,包封率为(62.59±6.39)%,其中TG偶联物和TCR偶联物最佳投料比为1∶2,DOX和TCR-TG的最佳投料比为1∶1.7,DOX/TCR-TG混合胶束冻干制剂的最佳保护剂为0.1%甘露醇。结论 TG偶联物与TCR偶联物形成的混合载体材料包载DOX,可制备成载药量和包封率较好,粒径分布均匀,形态圆整的聚合物胶束制剂。     

载紫杉醇聚(2-乙基-2-噁唑啉)修饰单壁碳纳米管递药系统的制备及体外抗肿瘤作用评价

目的 以抗肿瘤药物紫杉醇（PTX）为模型药物，制备载紫杉醇聚（2-乙基-2-噁唑啉）（PEOz）修饰单壁碳纳米管递药系统（PTX@PEOz-SWCNT），对其进行理化性质、体外释药、生物相容性及体外抗肿瘤作用的评价。方法 采用化学偶联合成PEOz-SWCNT，用紫外-可见吸收光谱法（UV-Vis）和红外光谱法（FTIR）对合成产物进行表征，并对其粒径和电位进行测定；制备载药复合物PTX@PEOz-SWCNT，测定其载药量和包封率，透析法进行体外释药试验；体外溶血试验评价载体材料的安全性，MTT法评价载体材料生物相容性及载药复合物对MCF-7细胞的生长抑制率，用荧光倒置显微镜考察了香豆素-6（C6）标记载体在MCF-7细胞中的摄取。结果 PEOz-SWCNT材料的平均粒径为（219.8±2.9）nm，Zeta电位值为（-35.23±0.74）mV，PTX@PEOz-SWCNT的载药量为（38.19±0.74）%，包封率为（94.38±0.94）%；载药复合物在pH 5.0的条件下释药明显加快，表现出明显的pH响应性；体外溶血试验结果表明，PEOz-SWCNT质量浓度在0.4 mg/mL以下无明显溶血反应，PEOz-SWCNT材料在细胞水平生物相容性良好，PTX@PEOz-SWCNT对MCF-7细胞的生长抑制率显著增强；与C6@SWCNT相比，C6@PEOz-SWCNT载药复合物的细胞摄取增加。结论 PTX@PEOz-SWCNT递药系统在肿瘤靶向给药方面具有一定的应用前景。     

聚(2-乙基-2-噁唑啉)-胆固醇碳酸甲酯修饰的多西紫杉醇pH-敏感胶束的构建与性质考察

目的 利用聚(2-乙基-2-噁唑啉)-胆固醇碳酸甲酯[poly(2-ethyl-2-oxazoline)-cholesteryl methyl carbonate,PEOz-CHMC,简称PC]构建多西紫杉醇(docetaxel,DOC)纳米胶束,并对其进行性质考察。方法 利用芘荧光探针法测定PC的临界胶束浓度。利用薄膜分散法制备DOC-PC胶束(DOC-PC micelles,DOC-M),对DOC-M的粒径、形态、包封率等进行表征。采用透析法考察DOC-M的药物释放,并模拟肿瘤微环境考察DOC-M的稳定性和pH敏感性。通过MTT法评价DOC-M对体外HeLa细胞的抑制作用。利用流式细胞仪定量观察胶束对HeLa细胞的摄取情况。结果 PC的临界胶束质量浓度为9.26 μg·mL^-1(4.63×10^-6mol·L^-1)。DOC-M的粒径小于130 nm,外观呈类球形,分布均匀,Zeta电位为(-7.32±0.98)mV。X-射线粉末衍射(XRD)和红外光谱(IR)结果表明,DOC被成功包封于胶束中,DOC-M的包封率为(80.55±2.44)%。体外药物释放和胎牛血清稳定性结果实验表明,DOC-M的pH敏感性和稳定性良好。细胞抑制实验结果表明,在微酸条件下DOC-M的细胞抑制作用更强。细胞摄取实验分析,DOC-M具有较低的毒性,显著地促进药物的细胞摄取。结论 DOC-M表现出良好的稳定性和pH敏感性,以及较低毒性和较好的载药能力,有望成为药物递送的良好载体。     

环孢素A眼用纳米脂质载体的制备及表征

 目的 制备适于眼部给药的环孢素A纳米脂质载体（cyclosporine A-loaded nanostructured lipid carriers, CsA-NLC）,并考察其理化性质和眼局部刺激性。方法 采用熔融-乳化法制备CsA-NLC,通过正交实验筛选出最优处方。考察CsA-NLC的粒径、形态,包封率、载药量及在人工泪液中的释药行为,采用差示扫描量热法（differential scanning calorimetry, DSC）确证CsA在载体中的分散状态,利用家兔研究其眼局部刺激性。结果 优化条件下制备的CsA- NLC多为类球形粒子,平均粒径(35.9±0.21) nm,Zeta电位(-13.9±0.21) mV,包封率、载药量分别为(97.5±0.58)%和(16.2±0.09) mg·mL^-1。DSC表明药物以非结晶状分散于纳米粒中。CsA-NLC具有明显的缓释特征,其体外释药行为符合单指数模型。CsA-NLC对家兔眼部无刺激性。结论 制备的CsA- NLC粒径小,载药量高,刺激性小,体外释放具有明显的缓释特征,有望实现药物眼部控释递送,提高药物的眼用生物利用度。
     

紫杉醇壳聚糖自组装纳米胶束冻干粉针的制备及理化性质研究

 目的紫杉醇壳聚糖自组装纳米胶束冻干粉针的制备及理化性质评价。方法以载药量、包封率和粒径为指标考察直接溶解法、乳化溶剂挥发法、透析法等载药工艺,筛选冻干保护剂及用量,测定其粒径、ξ电位、pH值、渗透压,并评价其稀释稳定性,以透射电镜(TEM)观察其形态,DSC和WAXD对其进行理化性质表征。结果最佳载药工艺为透析法,最佳冻干保护剂为15g·L^-1甘露醇,紫杉醇壳聚糖载药纳米胶束(PTX-OCC)载药量和包封率分别高达34.4%和89.3%;载药后,纳米胶束粒径由165.6nm增长到176.4nm,ξ电位则由-30.2mV增至-50.9mV;PTX-OCC溶液稀释至0.8g·L^-1,放置于25℃稳定长达9d;TEM照片显示,OCC及PTX-OCC皆为规则球状结构,粒径分布均匀;OCC及PTX-OCC pH值、渗透压皆符合静脉注射要求;DSC,WAXD实验结果表明,药物以无定型或固态溶液的形式存在于胶束骨架中。结论N-辛基-O,N-羧甲基壳聚糖(OCC)纳米胶束对紫杉醇具有优越的载药性能,为潜在的优良的可静脉注射的难溶性药物增溶载体。     

磷酸川芎嗪羧甲基壳聚糖纳米粒的制备及体外释放研究

目的:制备磷酸川芎嗪羧甲基壳聚糖纳米粒(CMC-TMP-NP),并对其体外释放行为进行研究。方法:采用乳化交联法制备CMC-TMP-NP,以包封率为评价指标,通过正交设计实验对处方和工艺进行优化;通过测定CMC-TMP-NP的包封率、载药量、粒径、形态和体外释放率评价其质量。结果:优选出CMC浓度为4mg/mL、投药比为1:2、交联度为3,进行制备CMC-TMP-NP;制备出的纳米粒粒径分布均匀且表面呈圆整球形,平均粒径为192.6nm、多分散系数为0.219、平均包封率为(85.17±1.25)%、平均载药量为(9.38±1.28)%。结论:实验制备的CMC-TMP-NP包封率高,粒径分布均匀,体外能显著延缓药物释放。     

双靶向共载紫杉醇及白藜芦醇纳米系统构建及其体外抗多药耐药肿瘤研究

目的构建一种具有肿瘤双靶向功能的仿脂蛋白结构纳米载体(FA-BSA-LC/SPC),共载紫杉醇(paclitaxel,PTX)及白藜芦醇(re sveratrol,Rev),用于抗多药耐药肿瘤研究。方法以牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)作为构建仿脂蛋白结构纳米载体的蛋白部分,叶酸(folic acid,FA)通过偶联在BSA上形成偶联蛋白FA-BSA,与载药脂质核心部分(LC/SPC-PTX+Rev)通过静电作用相结合;利用透析法考察载药纳米制剂的体外释药行为;通过纳米制剂在血浆中的凝聚变化对其血浆稳定性进行考察;采用MTT法对载药纳米制剂进行多药耐药细胞毒性研究;利用激光扫描共聚焦显微镜考察仿脂蛋白结构纳米载体肿瘤双靶向效果。结果制备的纳米制剂具有较高的紫杉醇及白藜芦醇包封率(分别为91.02%、91.30%),适用于药物紫杉醇-白藜芦醇(4:1)的共载;载药纳米制剂在体外具有明显的缓释药物行为;在血浆孵育后的粒径分布没有明显变化,表明其在血浆中具有良好的稳定性;通过细胞毒性研究发现FA-BSA-LC/SPC-PTX+Rev对多药耐药肿瘤细胞具有明显的...     

咪喹莫特固体脂质纳米粒的制备及其性能研究

 目的制备咪喹莫特固体脂质纳米粒,并考察其理化性质及其对透皮的影响。方法采用高压均质法制备咪喹莫特固体脂质纳米粒;采用透射电镜(TEM)观察纳米粒的形貌;光子相关光谱(PCS)测定其粒径大小和分布;紫外分光光度法测定载药纳米粒的包封率及载药量;MTT法进行细胞毒性试验,动态透析袋技术研究药物体外释放特性,采用Franz扩散法进行药物透皮试验。结果优化条件下制备的咪喹莫特固体脂质纳米粒平均粒径在(133±6)nm,多分散性指数(PI)值为0.348±0.05,平均包封率和载药量分别为(94.68±1.41)%和(4.73±0.07)%,体外释放呈现突释期和缓释释放期,对Hacat细胞无细胞毒性,增加了药物在皮肤层中的贮存量。结论咪喹莫特固体脂质纳米粒较优制备条件:癸酸与单硬脂酸甘油酯质量比为1∶3,S-40与Span-20质量比为1∶1;该咪喹莫特固体脂质纳米粒无皮肤刺激性,可望作为咪喹莫特经皮给药新制剂。     

三七总皂苷联合淫羊藿苷壳聚糖微球的制备工艺

目的:制备三七总皂苷联合淫羊藿苷壳聚糖微球,研究制备工艺参数对载药微球的药物包封率的影响.方法:以壳聚糖为载体,采用乳化交联法制备三七总皂苷联合淫羊藿苷壳聚糖微球.在单因素考察的基础上,以包封率和载药量为指标采用正交试验设计优选最佳制备工艺.结果:最佳制备工艺条件为选取乳化剂质量分数4％,壳聚糖质量分数4％,油水比8∶1,搅拌速度400 r·min -1.结论:所得载药微球外表形态良好,包封率高,工艺稳定.