结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425基因片段融合蛋白的表达与纯化

目的克隆表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425基因片段融合蛋白并纯化,测抗原的免疫原性,为结核病的临床诊断提供有效的候选抗原。方法利用生物信息学分析免疫优势位点,设计不同引物,采用聚合酶链反应（PolymeraseChain Reaction,PCR）扩增出相应基因片段,插入pET30a表达载体,转入大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达目的蛋白,亲和纯化后用H37Rv免疫的兔血清进行间接酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）测定其免疫原性。结果 PCR扩增的CFP10、ESAT6和Rv33425基因片段与基因文库（Genbank）报道的完全一致。三者在大肠杆菌BL21（DE3）中融合表达的产物约为22kDa,与预计大小相吻合。Ni-NTA亲和纯化出目的蛋白。ELISA显示该蛋白具有较强的免疫原性。结论结核分枝杆菌CFP10-ESAT6-Rv3425融合基因片段的融合表达纯化后,可作为结核病免疫诊断的一个候选抗原。     

新生儿星形奴卡氏菌败血症1例

1 病历摘要男,25天。因不规则发热4天入院。体温曾达39.6℃,吃奶可,无咳喘,无吐泻。无产时窒息史,旧法接生。体检:37.2℃,体重4kg,精神差,面部及腹部有多个针挑刺点。前囟1.5cm×1.5cm,口周微绀。颈软,     

Monarch生化分析仪比色转盘、样品杯及盖的清洗

Monarch 生化分析仪用比色转盘,样品杯和样品杯盖系一次性使用品.为了节约开支,我们自制了清洗液和清洗器,这些一次性用品清洗后重复使用.实验结果,至少可重复使用150次以上仍能符合要求,清洗方法和实验结果如下.一、实验方法1.清洗方法.①样品杯及样品杯盖的洗涤:浸泡     

一种基于羟脯氨酸含量的血清Gg的测定方法

作者描述了一种在250ml透析血清中测定Gg的方便而准确的操作方法.此法原理是根据血清中Gg随优球蛋白部分沉淀,从而与血浆中其他含羟脯氨酸的蛋白质分离.由于Gg中含4.3%的羟脯氨酸而从优球蛋白中羟脯氨酸的含量推算出血清中Gg的浓度.分别收集EDTA抗凝的正常志愿者,类风湿性关节炎及系统性红斑狼疮患者血浆,加CaCl_2使最     

干化学及其临床应用

干化学(Dry chemistry)是近年发展建立的一种新型分析系统,其特点是快速简便。它是利用液体样本直接加至干燥的试剂上并以样本中的水份为溶剂所引起的特定化学反应进行的化学分析法。因此又称干试剂化学(Dry reagent chemistry)或同相化学(Solid-state chemistry)。     

脑脊液蛋白测定的改良溴酚蓝丙酮法

本文介绍测定CSF蛋白的溴酚蓝(BPB)丙酮改良法。原法载国外医学临床生化分册10(3):42,1989。一、试剂BPB显色剂:甲液:BPB 1mmol(0.67g)溶于10ml 0.1mol/L NaOH中,加蒸馏水至1000ml。乙液:柠檬酸磷酸氢二钠缓冲液     

ELISA一、二步法检测二对半结果不一致的原因分析

ＥＬＩＳＡ一、二步法检测二对半结果不一致的原因分析江苏省苏州市第五人民医院检验科（２１５００７）吴兴福，陈苏芳，是贻芬ＥＬＩＳＡ以其高度的特异性、敏感性等优点，在临床上被广泛应用于各种抗原、抗体的检测，乙肝病毒（ＨＢＶ）标志物的检测也不例外。鉴于经典...     

胸腹水腺苷脱氨酶测定及其临床意义

本文采用杨氏腺苷脱氨酶测定方法并稍作改进,对酶促反应的一些影响因素作了试验,还测定了97例结核性胸、腹水和124例非结核性胸、腹水中腺苷脱氨酶活性,表明结核性胸、腹水显著高于非结核性胸、腹水(P<0.001),可作为结核性胸、腹水鉴别诊断的一种简单有效的实用方法。