蛇毒纤溶酶的分离纯化及其溶栓作用

目的获得大量高纯度的蛇毒纤溶酶并进行药效实验。方法用离子交换柱色谱和单克隆抗体亲和色谱技术进行纯化 ,用体外和半体内血栓模型研究其抗血栓作用。结果得到纯度为 95 %以上的纤溶酶。结论纯化后的蛇毒纤溶酶具有显著的抑制血栓形成的作用     

DA大鼠骨髓树突状细胞的体外诱导增殖

目的探讨体外诱导和培养大鼠骨髓来源树突状细胞(Dendritric cells,DC)的方法,为进一步研究树突状细胞的功能及应用提供理论依据。方法从健康大鼠管状骨中,无菌下提取骨髓细胞,用GM-CSF和IL-4诱导大鼠骨髓前体细胞,培养10d,在倒置荧光显微镜下观察培养的DC形态学特征,LPS刺激1~2d,进行形态学观察、应用流式细胞仪检测表面分子(未成熟和成熟的)CD80、CD86和OX62的表达水平进行DC表型检测。结果培养的骨髓细胞胞浆突起大而长,呈树突状,具有DC的典型形态。培养7d未成熟的DC表面共刺激分子CD80、CD86和OX62表型表达的阳性率分别为40.95%、52.93%和45.66%。培养11d的DC表面共刺激分子CD80、CD86和OX62表型表达的阳性率分别为85.93%、81.38%和96.36%。结论成功建立了大鼠骨髓DCs的体外诱导方法,为研究DC的功能及其在移植耐受中的作用奠定基础。     

茵陈蒿汤保肝作用物质基础的研究Ⅰ.蒽醌类有效成分研究

茵陈蒿汤方源自《伤寒论》,由茵陈蒿、栀子和大黄 3味中药组成 ,该方及其加减方在临床上用于治疗病毒性肝炎、胆石症、胆囊炎、高血脂症及恶性肿瘤等[1 ] 。本实验利用大孔树脂吸附技术将茵陈蒿汤分为 ～ 5个部位 ,其中 和 部位对 CCl4 致急性肝损伤小鼠血清中 s GPT升高及 TP,ALB下降有抑制作用 ,提示具有保肝降酶作用。从活性部位 中分得5个蒽醌类化合物 ,分别鉴定为大黄酚 (chryso-phanol, )、大黄素甲醚 (physcion, )、大黄素 (e-modin, )、芦荟大黄素 (aloe-emodin, )、芦荟大黄素 -8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (aloe-emodin-8-O-…     

芡实药学研究进展

芡实是药食同源佳品,是睡莲科芡的干燥成熟的种仁,主要药用成分有环肽类、黄酮类、脑苷脂类、多酚类、甾醇类、矿质元素类等。芡实的淀粉含量高,可为人体提供充足的热量。近几年,芡实的药学研究取得了重大的进展,在临床应用上也较为广泛。目前芡实已应用于胃黏膜损伤、糖尿病、脾肾阳虚、慢性肠炎、腹泻、中风后遗症、肾小球肾炎、骨关节炎、痛风性关节炎等疾病的治疗。     

巨核细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶2的克隆表达及其与骨质疏松症的关系

目的：探讨巨核细胞蛋白质酪氨酸磷酸酶2（PTPMEG2）的克隆表达及其对骨质疏松症发展过程的调节作用。方法：分离纯化后的PTPMEG2蛋白,应用免疫学技术制备PTPMEG2的多克隆抗体。30只雌性SD大鼠随机分为模型组(n=15)和对照组(n=15),采用维甲酸灌胃给药的方法构建大鼠骨质疏松症模型,对照组大鼠采用生理盐水灌胃,检测2组大鼠血清中酸性磷酸酶（ACP）及碱性磷酸酶（ALP）的水平。Western blotting法检测大鼠各组织中PTPMEG2的表达水平,并对比PTPMEG2在骨髓细胞（BMCs）、红细胞及骨髓基质细胞(BMSCs)中表达量的变化。结果：成功制备PTPMEG2的多克隆抗体。模型组大鼠血清中ACP和ALP表达水平均高于对照组（P<0.01）,且模型组大鼠的骨脆性明显高于对照组。模型组大鼠肾脏组织中PTPMEG2的表达水平高于对照组（P<0.05）,而其在肌肉组织中的表达水平却低于对照组（P<0.05）。与对照组比较,PTPMEG2在模型组大鼠BMCs中表达量显著增加,而在红细胞和BMSCs中其表达量无明显差异。结论：骨质疏松症大鼠BMCs中PTPMEG2表达水平增加,且多发生在骨髓内分化成熟的骨细胞中; PTPMEG2可能在骨质疏松症的发展过程中发挥重要的调节作用。     

东北部分地区蜱携带几种病原立克次体的分子检测

目的为了解东北地区蜱中携带立克次体的情况。方法应用人工小时布旗法采集东北部分地区不同生境的游离蜱,采用PCR作斑点热立克次体、查菲埃立克体、人粒细胞无形体DNA检测。结果从东北地区全沟硬蜱和森林革蜱检出查菲埃立克体DNA,全沟硬蜱平均阳性率为3.29%,森林革蜱为1.88%;从全沟硬蜱检出人粒细胞无形体DNA,平均阳性率为2.98%;从嗜群血蜱检出斑点热立克次体DNA,其平均阳性率(6.67%)明显高于全沟硬蜱(1.69%)和森林革蜱(2.36%)。结论东北地区全沟硬蜱和森林革蜱可能是查菲埃立克体、人粒细胞无形体的主要携带媒介,嗜群血蜱主要携带斑点热立克次体,提示东北地区存在三种蜱媒立克次体病的自然疫源地。     

Survivin蛋白和VEGF在上皮性卵巢癌中的表达及相关性

目的:探讨Survivin蛋白和VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达及其在上皮性卵巢癌发生、发展中的作用及两者的相关性。方法:采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(SP)免疫组织化学方法检测45例上皮性卵巢癌、19例卵巢良性上皮性肿瘤及16例正常卵巢组织中Survivin和VEGF的表达,并分析其与各临床病理特征的关系及两者的相关性。结果:①上皮性卵巢癌中Survivin蛋白和VEGF表达水平均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织,差异有显著性(P<0.05)。②Sur-vivin蛋白和VEGF的阳性表达率与上皮性卵巢癌病理类型无关(P>0.05),与临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关(P<0.05)。③上皮性卵巢癌中Survivin蛋白与VEGF的表达呈正相关。结论:Survivin蛋白和VEGF均可作为反映上皮性卵巢癌生物学行为的客观参考指标,与卵巢癌的发生、发展和转移密切相关,Survivin和VEGF的联合检测有助于判断卵巢癌的恶性程度和预后,同时为卵巢癌的靶向治疗提供新的途径。     

丁香对胰岛素信号通路的影响及2型糖尿病降糖机制的研究

目的研究丁香治疗2型糖尿病的降血糖机理。方法通过Western Blot检测丁香对胰岛素信号通路中蛋白的磷酸化水平。体外酶反应动力学实验检测丁香对酪氨酸磷酸酶的抑制效果。结果丁香显著提高胰岛素信号通路关键蛋白磷酸化水平(P<0.001),并对SHP-1有明显的抑制效果。结论推测丁香的降血糖机制是通过抑制胰岛素信号通路负调节酶SHP-1的活性,进而增强胰岛素受体敏感性。     

茵陈蒿汤保肝作用物质基础的研究 Ⅰ . 蒽醌类有效成分研究

茵陈蒿汤方源自《伤寒论》,由茵陈蒿、栀子和大黄 3味中药组成 ,该方及其加减方在临床上用于治疗病毒性肝炎、胆石症、胆囊炎、高血脂症及恶性肿瘤等[1 ] 。本实验利用大孔树脂吸附技术将茵陈蒿汤分为 ～ 5个部位 ,其中 和 部位对 CCl4 致急性肝损伤小鼠血清中 s GPT升高及 TP,ALB下降有抑制作用 ,提示具有保肝降酶作用。从活性部位 中分得5个蒽醌类化合物 ,分别鉴定为大黄酚 (chryso-phanol, )、大黄素甲醚 (physcion, )、大黄素 (e-modin, )、芦荟大黄素 (aloe-emodin, )、芦荟大黄素 -8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 (aloe-emodin-8-O-…     

重组人proEMAPⅡ/p43体外抑制新生血管生成活性方法的建立

目的建立proEMAPⅡ/p43蛋白体外检测抑制新生血管生成活性的方法。方法利用内皮细胞增殖实验、细胞周期实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验等体外检测血管生成的模型,研究p43蛋白抑制血管生成的活性。结果 p43蛋白能明显抑制内皮细胞迁移和管腔形成,但对内皮细胞增殖和细胞周期没有明显的量效关系。结论最终选用细胞迁移实验和管腔形成实验作为主要活性检测方法,细胞迁移实验作为p43蛋白活性的定量检测方法,迁移抑制率作为活性高低的评价标准,管腔形成实验用于p43蛋白活性的定性研究。