雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的探讨雷公藤内酯醇(TL)在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值。方法采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象,MTT法和吖啶橙(AO)染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡,采用半定量RT-PCR法检测5-脂氧合酶(5-LOX)mRNA、bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达。结果10μg/ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30%以上,0.1μg/mlTL处理24h后,SW1990细胞凋亡指数达38.5%,显著高于对照组的14.97%。5-LOX、bcl-2、bax mRNA表达从0.7160±0.0251,0.2446±0.0311和0.0260±0.0065分别变化为0.2400±0.0316,0.0700±0.0158和0.0700±0.0158。结论TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其凋亡机制可能与下调5-LOXmRNA和bcl-2mRNA、上调bax mRNA基因表达有关。     

雷公藤内酯醇诱导胰腺癌细胞凋亡及对5-脂氧合酶和凋亡基因表达的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇(TL)在胰腺癌化学预防和治疗中的应用价值.方法 采用人胰腺癌细胞株SW1990作为研究对象,MTT法和吖啶橙(AO)染色分别检测SW1990细胞的增殖和凋亡,采用半定量RT-PCR法检测5-脂氧合酶(5-LOX) mRNA、bcl-2 mRNA和bax mRNA的表达.结果 10 μg/ml的TL对SW1990细胞生长的抑制率达30%以上,0.1 μg/ml TL处理24 h后,SW1990细胞凋亡指数达38.5%,显著高于对照组的14.97%.5-LOX、bcl-2、bax mRNA表达从0.7160 ± 0.0251,0.2446 ± 0.0311和0.0260 ± 0.0065分别变化为0.2400 ± 0.0316,0.0700 ± 0.0158和0.0700 ± 0.0158.结论 TL能抑制胰腺癌细胞增殖和诱导细胞凋亡,其凋亡机制可能与下调5-LOX mRNA和bcl-2 mRNA、上调bax mRNA基因表达有关.     

趋化因子CCL20及其受体CCR6在实验性结肠炎小鼠中的表达及其意义

背景：溃疡性结肠炎（UC）的病因和发病机制尚不完全明确，趋化因子异常可能在其发生、发展中起重要作用。目的：研究趋化因子CCL20及其受体CCR6在葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的实验性结肠炎小鼠结肠黏膜中的表达以及CCL20与CCR6的相关性，探讨两者在结肠炎发病机制中的作用。方法：30只雌性BALB／c小鼠分为对照组和模型组。模型组小鼠自由饮用5％DSS溶液7d，建立实验性结肠炎模型；对照组小鼠自由饮用蒸馏水7d。第8d处死小鼠，观察疾病活动指数（DAI）、结肠组织学评分。以逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）检测小鼠结肠黏膜CCL20、CCR6mRNA表达，以免疫组化和蛋白质印迹法检测结肠黏膜CCL20、CCR6蛋白表达，并分析CCL20与CCR6的相关性。结果：模型组DAI和结肠组织学评分均显著高于对照组（P〈0．01）；CCL20、CCR6mRNA和蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01），且与结肠炎症程度呈正相关。CCL20mRNA表达与CCR6mRNA表达有明显相关性（r＝0．763．P=0．000071）。结论：CCL20和CCR6表达参与了结肠炎的发生和发展，两者相互作用可能在结肠炎局部结肠组织破坏和病理变化中起重要作用，有望成为UC的潜在治疗靶点。     

不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及对相关基因表达的影响

目的 探讨不同时间、不同剂量N-亚硝基双-2-氧丙基（N-nitrosobis-2-oxopropylamin,BOP）诱导仓鼠胰腺癌的成模效果及仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因表达的变化.方法 72只仓鼠按完全随机法分为3组,每组24只.A组采用小剂量BOP长周期皮下注射诱导造模（10 mg/kg体质量,每周1次,连续8周）;B组采用大剂量BOP短周期皮下注射诱导造模（首次剂量70 mg/kg体质量,后3周每周20 mg/kg体质量）;C组为未注射BOP的对照组.成模后取胰腺组织及肝脏组织行病理组织学检查.采用实时PCR法及蛋白质印迹法检测仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ等基因的表达.结果 A组仓鼠中19只成功诱导胰腺癌模型;B组均未见胰腺肿瘤形成,而18只仓鼠成功诱导肝内胆管细胞癌;C组胰腺及肝脏均未见异常.仓鼠胰腺癌组织COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ mRNA的表达量分别为对照组的1.93、2.03、1.57、5.55和3.54倍,差异有统计学意义（P值均＜0.05）;COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ蛋白的表达量分别为2.47 ±0.22、0.56 ±0.05、1.23 ±0.05、1.55 ±0.13、2.02 ±0.01,而对照组仓鼠正常胰腺组织的蛋白表达量分别为0.80±0.08、0.39 ±0.01、0.60 ±0.01、0.53 ±0.03、0.40 ±0.02,两组差异均有统计学意义（P值均＜0.05）.两组MHC-ⅡmRNA及蛋白表达的差异无统计学意义.结论 小剂量BOP长周期皮下注射能成功诱导仓鼠胰腺癌模型,胰腺癌组织的COX-2、5-LOX、GAL-1、GAL-3、MHC-Ⅰ基因表达上调,可能参与仓鼠胰腺癌的发生和发展.     

5-脂氧合酶抑制TNF-α诱导的胰腺癌细胞凋亡

目的:检测胰腺癌细胞中5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)及其代谢产物的表达情况,分析高表达5-LOX及LTB4对胰腺癌细胞生长凋亡的影响.方法:体外培养人胰腺癌细胞株ASPC-1,PANC-1和SW1990,并构建5-LOX基因稳定转染细胞株.用RT-PCR和Western blot检测细胞5-LOX mRNA和蛋白的表达,ELISA检测细胞培养上清中LTB4的含量,采用流式细胞仪、Annexin V/PI双染法检测TNF-α诱导细胞的细胞凋亡.结果:三种胰腺癌细胞株均表达5-LOX mRNA和蛋白,细胞上清中也都检测到一定量LTB4分泌.5-LOX基因稳定转染细胞株表达5-LOX和LTB4的水平上升.TNF-α(20μg/L)处理野生型SW1990细胞,12和24 h后凋亡率分别为25.4%±3.65%和43.5%±5.23%,但该效应在高表达5-LOX的细胞株中明显减弱,分别为13.2%±2.01%和21.7%±3.65%.在野生型SW1990细胞培养中加入外源性LTB4(10 nmol/L)能抑制TNF-α诱导的细胞凋亡,野生型与处理组细胞24 h后凋亡率有显著性差异(47.6%±5.32%vs 18.5%±5.69%,P<0.01).用LTB4受体阻断剂处理5-LOX高表达细胞株,能恢复其对凋亡诱导的敏感性.结论:胰腺癌细胞均能表达5-LOX并产生LTB4,高表达5-LOX能抑制TNF-α诱导的胰腺癌细胞凋亡.     

雷公藤内酯醇诱导肿瘤细胞凋亡的机制

雷公藤内酯醇对血液系统肿瘤和多种实体瘤细胞都有杀伤作用。其主要作用机制是通过抑制NF-κB反式激活作用、活化p53和caspases、阻断p21WAF1/CIP1介导的生长阻抑及激活 MAPK信号通路等多种途径来诱导肿瘤细胞凋亡。现对此加以综述,旨在为雷公藤内酯醇的临床抗肿瘤研究提供一些线索。     

Met-RANTES干预实验性小鼠溃疡性结肠炎对MIP-3α及其受体CCR6的影响

目的:探讨MIP-3α及其受体CCR6在实验性小鼠溃疡性结肠炎(UC)发病中的作用,并分析Met-RANTES疗效机制.方法:用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立结肠炎小鼠模型,观察Met-RANTES对小鼠结肠炎病活动指数(DAI)、大体形态评分(GMS)、结肠组织学病理评分(HPS)的影响:并通过RT-PCR检测其对小鼠结肠组织MIP-3α、CCR6mRNA的表达变化及Western blot和免疫组织化学方法检测其小鼠结肠组织MIP-3α、CCR6的蛋白表达变化.结果:DAI、GMS和HPS在DSS模型组和生理盐水治疗组中高于空白对照组,MIP-3α和CCR6在小鼠溃疡性结肠炎中表达上调,在小鼠空白对照组中不表达或弱阳性表达,差异有统计学意义(P<0.01):与DSS模型组和生理盐水治疗组相比,Met-RANTES治疗组小鼠DAI、GMS和HPS降低,MIP-3α和CCR6表达下调(mRNA:0.21±0.08 vs 1.09±0.08.1.08±0.07;0.25±0.08 vs 1.11±0.07,1.05±0.08,P<0.01:蛋白:0.28±0.08 vs 0.98±0.07,1.05±0.06;0.25±0.07 vs 1.19±0.07.1.15±0.06.P<0.01):生理盐水治疗组小鼠DAI、GMS和HPS 以及MIP-3α和CCR6表达与DSS模型组相比表达无明显差异(P>0.05).结论:MIP-3α与CCR6参与了小鼠UC的发生、发展;Met-RANTES能下调MIP-3α及CCR6的表达,并能减轻炎症损伤;针对MIP-3α或CCR6的靶向治疗可能是UC一种有效的治疗方法.     

超声引导下射频消融治疗肝癌后VEGF和AFP的变化

目的:观察超声引导下射频消融治疗肝细胞性肝癌后患者血清VEGF、AFP的变化。方法:超声引导下经皮射频消融治疗46例肝细胞性肝癌,分别以ELISA法和免疫发光法测定患者术前、术后血清VEGF和AFP水平。结果:射频消融术前患者血清VEGF、AFP水平分别为263.69±95.71pg/ml、221.90±128.66ng/ml;术后即时稍有下降,分别为247.55±65.28pg/ml、210.65±95.48ng/ml;术后1周明显下降,分别为162.90±22.12pg/ml、125.17±79.97ng/ml;术后1月VEGF有所上升,为183.13±1.95pg/ml,而AFP继续下降,为41.57±39.07ng/ml。结论:超声引导下射频治疗肝细胞性肝癌可以有效消融肿瘤,消除了VEGF及AFP的来源,从而改善患者预后。     

超声引导下射频消融治疗肝癌对免疫功能的影响

目的：探讨超声引导下射频消融治疗肝癌对患者血清免疫功能的影响。方法：超声引导下射频消融治疗肝癌患者46例,以ELISA法测定患者术前术后外周血IL-2,sIL-2R水平,并行统计学分析。结果：射频消融术前,患者血清IL-2,sIL-2R水平分别为（136.91±55.11）pg/ml、（273.18±89.45）pmol/l,术后1月（186.62±64.88）pg/ml、（171.73±38.49）pmol/L,其差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：超声引导下射频治疗肝癌可以有效改善患者免疫功能。