慢性肾脏病继发性甲旁亢治疗进展（综述）

继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)是慢性肾脏病(CKD)常见的并发症。近年研究发现,新型的磷结合剂碳酸镧,能有效降低血清磷水平,并不引起继发骨损害和高钙血症,是一种相对较安全的磷结合剂,西那卡塞是被称为拟钙剂(calcimimetics)的新一类化合物中的第一个药物,能激活甲状旁腺中的钙受体,从而降低甲状旁腺素的分泌。尤其适用于慢性肾衰竭患者顽固性、继发性甲状旁腺功能亢进伴有高磷血症的短期治疗。     

腹膜透析在六安市终末期肾病人群中的临床应用

目的探讨腹膜透析在六安市终末期肾脏病人群中的临床应用。方法回顾性收集2010年3月至2013年5月三年间在该院进行持续性不卧床腹膜透析治疗的148例终末期肾病患者的流行病学、并发症以及相关临床情况,分析可能的原因,并加以归纳、总结。结果 148例患者在性别、年龄、病因及并发症方面,与国内其他腹膜透析中心相比基本接近,经过腹膜透析治疗后,临床症状均有不同程度改善。结论腹膜透析与血液透析相比,具有投入少,不需特殊设备等优势,是一种有效的临床治疗手段,适合在六安市这样一个经济欠发达地区居民中开展。     

人类免疫缺陷病毒1型HXB2株Tat突变体的构建、原核表达及免疫原性分析

目的 构建HIV-1 HXB2株Tat基因半胱氨酸富集区3'末端移位突变体,经原核表达和纯化,分析该突变体蛋白(Tat-cct)的免疫原性.方法 用PCR方法将HIV-1 HXB2株Tat基因的半胱氨酸富集区(64～111位核苷酸)移位至Tat基因的3'末端,获得其突变体DNA序列,并构建其原核表达质粒pET32a-Tat-cct,转入大肠埃希菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化.以Tat-cct融合表达蛋白免疫BALB/c小鼠,ELISA方法对该抗血清进行免疫原性检测分析.结果 pET32a-Tat-cct重组质粒可在E.coli BL21(DE3)中诱导表达,纯化后其融合蛋白相对分子质量约为31 000.Tat-cct重组蛋白免疫小鼠诱导产生的抗体滴度为1:1600,该抗体与Tat-cct蛋白和Tat蛋白(1～101位氨基酸)均呈特异性结合反应.结论 Tat突变体重组蛋白Tat-cct能在大肠埃希菌中有效表达.并较好保留其免疫原性,为HIV-1 Tat疫苗的基础研究提供了有价值的实验结论.     

构建SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库

目的 构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础.方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C 、D、 E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通过引物引入XbaⅠ酶切位点和保护碱基,3′端引入3个氨基酸大小的随机连接肽核苷酸序列,各结构域核苷酸片段经XbaⅠ酶消化,在T4连接酶作用下随机相互连接并克隆于噬菌体展示载体pCANTAB5S,克隆产物转化E.coli DH5α,提取原代库质粒转化E.coli TG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库.结果 该噬菌体展示文库库容量为1.87×107 cfu,滴度为1.3×1014 TU/ml,文库的片段插入率近100%,其中插入多个结构域的阳性克隆占21.7%,序列分析显示各结构域之间的连接和随机连接肽序列具有随机性.结论 成功地构建了SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库,该文库在库容量、多样性和随机性方面满足体外分子进化研究的要求.     

司维拉姆治疗维持性血液透析高磷血症的疗效观察

目的探讨碳酸司维拉姆片治疗维持性血液透析高磷血症的临床疗效。方法选取2018年6月—2019年6月在六安市人民医院治疗的76例血液透析合并高磷血症的患者,将所有患者按照数字随机抽取分为对照组和治疗组,每组各38例。对照组餐中嚼服碳酸钙D3片,1～2次/d,0.6～1.2 g/d;治疗组餐中同服碳酸司维拉姆片,1～2次/d,0.8～1.6 g/d。两组患者连续治疗6个月。观察两组的临床疗效,比较两组患者的血磷、血钙、钙磷乘积、甲状旁腺素(PTH)、白蛋白、血红蛋白水平。结果治疗后,对照组总有效率是57.89%,治疗组总有效率是76.32%,两组总有效率比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗3、6个月后,两组患者的血磷、钙磷乘积较治疗前均下降(P0.05);且治疗组的血磷、钙磷乘积的下降比对照组更明显(P0.05)。治疗3、6个月后,对照组血钙显著升高,治疗组血钙呈下降趋势(P0.05),且治疗组的血钙明显低于对照组(P0.05)。治疗3、6个月后,两组患者血红蛋白、白蛋白比较均无明显差异。治疗3、6个月后,两组患者PTH均显著降低(P0.05),但两组的PTH对比无差异。结论碳酸司维拉姆片治疗维持性血液透析高磷血症的疗效较好,可降低患者血磷、钙磷乘积,不引起高钙血症,对患者的营养状况没有影响。     

HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体的构建及在大肠杆菌中的高效表达

目的 构建HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体,并在大肠杆菌E.coli B121(DE3)中进行高效表达和纯化.方法 应用PCR拼接的方法将首轮合成Tat基因的半胱氨酸富集区(64～111位核苷酸,22～37位氨基酸)移位至缺失半胱氨酸富集区的Tat(AC)的N末端,获得其突变体序列(Tat(CN)DNA),构建其原核表达质粒pET32a-Tat(CN),并转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,经SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物,纯化后的产物用间接ELISA进行鉴定.结果 构建了pET32a-Tat(cn)突变体,pET32a-Tat(CN)融合蛋白在大肠杆菌中表达水平为5.17 mg/nd,相对分子质量为31 ku.间接的ELISA结果表明,pET32a-Tat(CN)能与Tat兔抗血清呈特异反应.结论 成功构建了HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区移位至TatN端的突变体,并能在大肠杆菌中高效表达,其纯化的蛋白pET32a-Tat(CN)很好地保留了与HIV-1 Tat兔抗血清的免疫反应性,为HIV-1 Tat的疫苗基础研究提供了一有价值的研究结论.     

环磷腺苷葡胺治疗尿毒症性心肌病49例临床观察

目的：探讨环磷腺苷葡胺（McA）治疗尿素症性心肌病的效果。方法：回顾性分析49例尿毒症心肌病患者的病例资料。结果：尿毒症心肌病在常规治疗基础上辅以环磷腺苷葡胺治疗,MCA可以改善尿毒症心肌病患者左心功能,且疗效优于对照组（P〈0．05或P〈O．01）;MCA治疗在一定时间内改善左室结构且优于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05或P〈O．001）。结论：在常规治疗基础上辅以MCA治疗对尿毒症性心肌病具有较好的治疗效果。     

HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析

目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。