三氯乙烯对角质形成细胞线粒体功能和形态的影响

目的探讨三氯乙烯（TCE）对皮肤细胞的毒性机制。方法以不同浓度（0．125、0．500和2．000mmol／L）TCE处理体外分离培养的正常人角质形成细胞（KC），同时设培养基对照组和体积分数为1％的丙酮对照组，然后：（1）分别进行四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）试验和ATP酶活力测定来检测细胞毒性和线粒体的代谢变化；（2）采用罗丹明123染色方法，借助流式细胞仪检测线粒体膜电位变化情况；（3）通过透射电子显微镜观察线粒体形态学的改变。结果TCE染毒后，细胞活力随着时间延长和剂量的增加而减小，线粒体酶活力抑制率增加，ATP酶活力减小；线粒体膜电位水平从染毒开始到8h迅速下降2．000mmol／LTCE染毒8h后Rh123荧光强度（8．20±0．66）与对照组（18．73±0．45）相比，差异有统计学意义（P〈0．01）；8h以后则变化不大，12和24h Rh123荧光强度与8h组比较，差异无统计学意义（P〉0．05），线粒体膜电位随染毒剂量的增加呈明显的剂量-效应关系。电镜下可见，TCE处理组线粒体出现肿胀，空泡变性，基质减少，部分嵴消失，对照组线粒体结构完整，基质分布均匀，可见线粒体嵴。结论TCE可以导致KC线粒体功能和形态发生明显改变，这些变化在TCE诱导的KC毒性中具有重要的意义。     

三氯乙烯诱导人角质形成细胞凋亡过程中caspase-8及caspase-9活力的变化

目的 观察三氯乙烯(TCE)致人原代角质形成细胞(KC)损伤过程中caspase-8、caspase-9活力及细胞凋亡率的变化,探讨TCE引起KC凋亡的可能机制.方法 体外培养的KC分别给予0.125、0.250、0.500、1.000和2.000mmol/L的TCE染毒4、8、12、24 h,以100μmol/L的caspase-9特异抑制剂Z-LEHD-FMK预处理细胞1 h,再用2.000mmol/LTCE染毒12 h.MTT法检测细胞活力变化,分光光度法检测caspase-8及caspase-9活力变化.流式细胞仪检测细胞凋亡率变化.结果 与空白对照相比,2.000和1.000 mmol/LTCE染毒组作用8 h后细胞活力降低.染毒超过12 h,各剂量组细胞活力均降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).在不同的时间段,各剂量组的caspase-8活力与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).染毒8 h时,2.000mmol/LTCE组caspase-9活力明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);12和24h时,各剂量组caspase-9活力与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).不同剂量的TCE染毒12 h后,2.000 mmol/L TCE染毒组细胞凋亡率升高至(80.43±4.21)%,空白对照组为(9.40±2.98)%,除0.125 mmol/LTCE组外,其他各染毒组的细胞凋亡率与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),剂量-效应关系明显.Caspase-9抑制剂预处理组caspase-9活力及细胞凋亡率较2.000mmol/L TCE染毒组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Caspase-9的活化在TCE诱导的体外培养的人KC的凋亡过程中发挥重要作用.     

药疹患者血清Th22细胞相关细胞因子和补体蛋白水平变化研究

目的 了解药疹患者治疗前后血清中Th22细胞相关因子及补体相关指标表达水平的变化,探索其在药疹发生发展中的可能作用。方法 35例药疹患者,以1∶1的比例匹配性别、年龄一致的健康对照者,分别采集药疹患者治疗前后及对照组外周血5 ml。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和流式液相多重蛋白定量技术（CBA）检测血清中白细胞介素22（IL?22）、IL?13、肿瘤坏死因子α（TNF?α）及补体蛋白C3a、C4a、C5a。结果 治疗前,药疹患者血清中IL?22［（40.85 ± 14.56） ng/L］、IL?13［（869.94 ± 463.39） ng/L］、TNF?α［（1.03 ± 0.64） ng/L］及补体C3a［（55.21 ± 32.98） ng/L］、C4a［（285.11 ± 123.91） ng/L］、C5a表达水平［（279.68 ± 127.72） ng/L］明显高于对照组（分别为29.09 ± 8.66、372.92 ± 151.75、0.44 ± 0.31、42.44 ± 14.26、237.00 ± 63.57和215.98 ± 65.38 ng/L）,差异均有统计学意义（t值分别为5.549、6.071、4.321、2.832、2.257、2.495,均P < 0.05）。治疗后,药疹患者血清IL?22［（32.72 ± 11.77） ng/L］、IL?13［（456.21 ± 123.22） ng/L］、TNF?α［（0.64 ± 0.39） ng/L］、C3a［（45.47 ± 21.11） ng/L］、C4a［（241.86 ± 84.12） ng/L］、C5a表达水平［（239.61 ± 103.51） ng/L］均低于治疗前,差异均有统计学意义（t值分别为4.443、5.197、3.572、3.213、2.728、4.772,均P ≤ 0.01）,且除IL?22、IL?13水平仍高于对照组外（P < 0.05）,TNF?α及补体C3a、C4a、C5a水平与对照组差异无统计学意义（均P > 0.05）。相关性分析显示,药疹患者治疗前血清补体C3a与C4a（r = 0.660）、C5a（r = 0.404）,C4a与C5a（r = 0.501）表达水平呈正相关,均P < 0.05,IL?22表达水平与补体C3a水平呈负相关（r = -0.490,P = 0.005）,与TNF?α表达水平呈正相关（r = 0.573,P = 0.005）。结论 Th22细胞相关细胞因子及补体活化在药疹发生发展过程中可能起重要作用,且IL?22可能参与补体蛋白的调控。     

心踝血管指数早期筛查动脉硬化的应用价值

目的对心踝血管指数(CAVI)早期筛查动脉硬化的有效性、适用性进行探讨,旨在寻求早期发现动脉粥样硬化性疾病的有价值的检测方法。方法对229例同时行CAVI检测和颈动脉超声检测的体检人群进行分析,并对相关检测结果进行统计学分析。结果 CAVI增高和颈动脉硬化呈正相关;通过受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析CAVI对动脉硬化的预测价值,结果显示CAVI预测动脉硬化的ROC曲线下面积为0.774,最佳界值为8.1;将年龄分组后,在40～49岁年龄组CAVI阳性率高于颈动脉超声(P<0.05);在<40岁以及>50岁年龄组,二者阳性率差异无统计学意义。结论 CAVI是一种有效的早期评估动脉粥样硬化的检测指标,适用于在发生动脉硬化的早期或对于危险人群进行筛查;CAVI达8.1以上时就可能已有血管功能改变发生,应予以足够重视,将有利于早期发现血管病变,预防血管疾病突发事件的发生。     

银杏叶提取物对三氯乙烯所致的角质形成细胞线粒体膜电位变化的影响

目的研究三氯乙烯(TCE)对角质形成细胞(KC)线粒体膜电位的影响以及银杏叶提取物(GBE)的保护作用,为预防三氯乙烯皮肤损害提供理论依据。方法体外培养的人角质形成细胞以不同浓度TCE处理8h,GBE保护实验则以不同浓度GBE预处理2h后再进行TCE染毒,采用罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)双染色方法,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化情况。结果空白对照组Rh123荧光强度为18.73±0.45,正常和早期凋亡细胞分别占(77.10±2.08)%和(12.33±1.39)%;2.0mmol/LTCE染毒组Rh123荧光强度下降到8.20±0.66(与空白对照相比,P<0.01),正常和早期凋亡细胞比例分别为(11.90±0.56)%和(65.33±1.45)%(与空白对照相比,均P<0.01)。10mg/L的GBE预处理对2.0mmol/LTCE所致的线粒体膜电位下降即显示有保护作用,Rh123荧光强度为13.80±0.92,正常细胞占(40.90±2.10)%,早期凋亡细胞占(32.10±1.25)%(与2.0mmol/LTCE染毒组相比差异有统计学意义,P<0.01)。随着GBE浓度的增大,保护作用渐强,100mg/L的GBE达到完全的保护作用,上述3项指标分别为18.57±0.57,(76.57±2.67)%和(11.63±1.07)%(与2.0mmol/LTCE染毒组相比,P<0.01,而与空白对照组相比差异均无统计学意义)。结论TCE可以剂量依赖性地诱导KC线粒体膜电位的下降,使细胞进入凋亡状态;GBE预处理能有效预防TCE所致的线粒体膜电位的下降,并可降低KC凋亡。研究结果提示GBE可能用作预防三氯乙烯皮肤损伤的有效保护剂。     

冬虫夏草提取物对模型大鼠血糖及氧化应激的影响

目的观察冬虫夏草提取物(CSE)对链脲菌素(Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病模型大鼠血糖、氧自由基及一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法采用STZ腹腔一次注射法(60 mg/kg)建立糖尿病大鼠模型。将成功模型随机分为模型组、二甲双胍组(0.2 g/kg)和CSE(0.5、1.0、1.5 g/kg)组,每组10只。各给药组连续灌肠给药8周,模型组与对照组给予等容量的蒸馏水。第8周末测定空腹血糖(FBG)及糖化血清蛋白(GSP);末次给药24 h后,腹主动脉取血,采用化学比色法分别检测血清和肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量变化,检测血清中NO、总一氧化氮合酶(T-NOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和结构型一氧化氮合酶(cNOS)的含量。结果 CSE(1.0、1.5 g/kg)组能够降低糖尿病大鼠FBG(P<0.05)和GSP(P<0.05);CSE各剂量组均提高糖尿病大鼠血清和肝脏的SOD和GSH-Px水平(P<0.05),降低MDA含量(P<0.05);与模型组比较,CSE(1.0、1.5 g/kg)组血清NO、T-NOS和iNOS含量均明显下降(P<0.05),cNOS含量无明显变化(P>0.05)。结论 CSE可以降低STZ诱导的糖尿病大鼠的血糖,改善糖尿病大鼠体内异常的氧化应激水平,降低血清NO含量可能是通过抑制iNOS的表达实现的。     

三氯乙烯诱导人表皮角质形成细胞凋亡中依赖Caspase-9的Caspase-3激活

目的 探讨有机溶剂三氯乙烯(TCE)诱导正常人表皮角质形成细胞(NHEK)凋亡过程中可能的信号通路.方法 用0.125、0.25、015、1.0、2.0 mmol/L的TCE处理NHEK4 h,并培养4、8、12、24 h,分光光度法测上清中Caspase-9和Caspase-3活性,Annexin-V/PI双染后流式细胞仪(FCM)测细胞凋亡;Caspase-3抑制剂Z-DEVD-FMK和Caspase-9抑制剂Z-LEHD-FMK预处理组,用100 μmol/L ZDEVD-FMK或Z-LEHD-FMK预处理NHEK 1 h,再用2.0mmol/L TCE染毒4 h后培养至12 h.结果不同浓度TCE处理NHEK 4 h后培养不同时间,可诱导Caspase-3和Caspase-9活性升高,培养12、24 h时,各TCE处理组Caspase-3和Caspase-9活性与溶剂对照比差异有统计学意义(P<0.05).不同浓度TCE处理NHEK 4 h后培养12 h.凋亡细胞(Annexin-V+/PI-)所占百分比随TCE剂量增加而升高,除0.125 mmol/L TCE组外,其它各处理组AnnexinV+/PI-细胞所占百分比与对照组比差异均有统计学意义(P<0.05).相关分析显示Annexin-V+/PI-细胞所占百分比与Caspase-3和Caspase-9活性都呈正相关(P<0.05).100 μmol/L Z-DEVD-FMK预处理明显抑制2.0 mmol/L TCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加(P<0.05),对Caspase-9活性影响不明显(P>0.05).100 μmol/L Z-LEHD-FMK预处理不仅抑制2.0mmol/L TCE诱导的Caspase-3活性上升和Annexin-V+/PI-细胞所占百分比的增加,还抑制Caspase-9活性上升(P<0.01).结论 TCE诱导NHEK凋亡中,内部凋亡途径中上游关键酶Caspase-9和下游效应分子Caspase-3均激活.且Caspase-3的激活依赖Casapase-9的活化.     

三氯乙烯诱导人角质形成细胞凋亡中Caspase-3活力的研究

目的 观察三氯乙烯(TCE)诱导离体培养的人角质形成细胞(KC)Caspase-3活力变化及细胞凋亡情况,探讨TCE诱导KC凋亡的可能信号通路.方法 以不同浓度(0.125、0.250、0.500、1.000、2.000 mmol/L)TCE对离体分离培养的KC分别染毒至4、8、12、24 h;Caspase-3抑制剂(Z-DEVD-FMK)预处理组,先用100 μmol/L Z-DEVD-FMK预处理细胞1 h,然后再用2.000 mmol/L TCE染毒12 h.用分光光度法检测细胞Caspase-3活力变化,借助Annexin-V/PI双染和流式细胞仪检测细胞凋亡情况.结果 与空白对照相比,TCE染毒4 h,各TCE剂量组Caspase-3活力无明显变化(P>0.05);染毒8 h,1.000 mmol/LTCE组Caspase-3活力和2.000 mmol/LTCE组Caspase-3活力,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);TCE染毒12 h和24 h,各TCE剂量组Caspase-3活力明显升高,与对照组相比差异有显著性(P<0.05),且呈剂量-效应关系.各TCE剂量组,在TCE浓度达到0.250 mmol/L以后,细胞凋亡率与对照组相比差异有显著性(P<0.05),且明显呈剂量-效应关系.Z-DEVD-FMK预处理组,与2.000 mmol/L TCE组比较,Caspase-3活力和细胞凋亡率明显得到抑制(P<0.01),而与空白对照相比差异无显著性(P>0.01).结论 在TCE诱导离体培养的KC凋亡中,Caspase-3的活化可能发挥了重要的作用.     

健康体检超重人群体质指数与部分健康指标关系研究

目的 研究合肥市健康体检人群体质指数（BMI）及其与血压、血糖、血脂、血尿酸的关系.方法 对3 640例健康体检者BMI分析,探讨超重、肥胖与血压、血糖、血脂及血尿酸水平变化.结果 该人群的平均BMI为（25.47±2.83）kg/m2,其中男性（26.33±2.48）kg/m2高于女性（23.91±2.75）kg/m2;BMI在各年龄组差异有统计学意义（P＜0.05）.不同BMI分层组中血压、血糖、血脂及血尿酸水平有显著差异,不同性别及年龄组BMI中血压、血糖、血脂及血尿酸水平有显著差异.结论 不同性别及年龄组BMI中血压、血糖、血脂及血尿酸水平差异较大,控制体重对高血压、高血糖、高血脂及高血尿酸等慢性病的防治具有重要意义.     

48例重症药疹临床转归影响因素分析及临床预防

目的 探讨重症药疹临床转归及影响因素。方法 收集2013年1月至2018年12月安徽医科大学第一附属医院48例住院重症药疹患者为病例组,以1∶1匹配的方式选取同时期本院健康体检者设置对照组,分析临床资料及实验室检查结果。采用logistic回归法探讨重症药疹治疗转归的影响因素。结果 与对照组相比,病例组白细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞计数、谷丙转氨酶及谷草转氨酶、血沉、尿素氮、血糖值均升高,红细胞计数、血红蛋白、总蛋白、清蛋白、电解质Na⁺及HCO₃^-值降低,差异有统计学意义(P<0.05)。病例组潜伏期2～61 d,平均住院(14.20±9.82)d,治疗有效率为85.42%,各型药疹之间的潜伏期、住院天数及治疗有效率差异无统计学意义(P>0.05)。logistic回归显示谷丙转氨酶值(OR=2.781,P<0.001)、糖皮质激素用量(OR=0.785,P<0.001)及血糖值(OR=1.619,P=0.011)影响重症药疹的临床转归。结论 重症药疹可引起多器官损伤,谷丙转氨酶值、糖皮质激素用量、血糖值对重症药疹治疗结局有影响,动态监测肝肾功能、电解质及血糖值对开展临床预防及降低病死率有积极作用。