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1.
目的探讨三氯乙烯(TCE)对皮肤细胞的毒性机制。方法以不同浓度(0.125、0.500和2.000mmol/L)TCE处理体外分离培养的正常人角质形成细胞(KC),同时设培养基对照组和体积分数为1%的丙酮对照组,然后:(1)分别进行四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)试验和ATP酶活力测定来检测细胞毒性和线粒体的代谢变化;(2)采用罗丹明123染色方法,借助流式细胞仪检测线粒体膜电位变化情况;(3)通过透射电子显微镜观察线粒体形态学的改变。结果TCE染毒后,细胞活力随着时间延长和剂量的增加而减小,线粒体酶活力抑制率增加,ATP酶活力减小;线粒体膜电位水平从染毒开始到8h迅速下降2.000mmol/LTCE染毒8h后Rh123荧光强度(8.20±0.66)与对照组(18.73±0.45)相比,差异有统计学意义(P〈0.01);8h以后则变化不大,12和24h Rh123荧光强度与8h组比较,差异无统计学意义(P〉0.05),线粒体膜电位随染毒剂量的增加呈明显的剂量-效应关系。电镜下可见,TCE处理组线粒体出现肿胀,空泡变性,基质减少,部分嵴消失,对照组线粒体结构完整,基质分布均匀,可见线粒体嵴。结论TCE可以导致KC线粒体功能和形态发生明显改变,这些变化在TCE诱导的KC毒性中具有重要的意义。  相似文献   
2.
目的研究三氯乙烯(TCE)对角质形成细胞(KC)线粒体膜电位的影响以及银杏叶提取物(GBE)的保护作用,为预防三氯乙烯皮肤损害提供理论依据。方法体外培养的人角质形成细胞以不同浓度TCE处理8h,GBE保护实验则以不同浓度GBE预处理2h后再进行TCE染毒,采用罗丹明123(Rh123)和碘化丙啶(PI)双染色方法,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化情况。结果空白对照组Rh123荧光强度为18.73±0.45,正常和早期凋亡细胞分别占(77.10±2.08)%和(12.33±1.39)%;2.0mmol/LTCE染毒组Rh123荧光强度下降到8.20±0.66(与空白对照相比,P<0.01),正常和早期凋亡细胞比例分别为(11.90±0.56)%和(65.33±1.45)%(与空白对照相比,均P<0.01)。10mg/L的GBE预处理对2.0mmol/LTCE所致的线粒体膜电位下降即显示有保护作用,Rh123荧光强度为13.80±0.92,正常细胞占(40.90±2.10)%,早期凋亡细胞占(32.10±1.25)%(与2.0mmol/LTCE染毒组相比差异有统计学意义,P<0.01)。随着GBE浓度的增大,保护作用渐强,100mg/L的GBE达到完全的保护作用,上述3项指标分别为18.57±0.57,(76.57±2.67)%和(11.63±1.07)%(与2.0mmol/LTCE染毒组相比,P<0.01,而与空白对照组相比差异均无统计学意义)。结论TCE可以剂量依赖性地诱导KC线粒体膜电位的下降,使细胞进入凋亡状态;GBE预处理能有效预防TCE所致的线粒体膜电位的下降,并可降低KC凋亡。研究结果提示GBE可能用作预防三氯乙烯皮肤损伤的有效保护剂。  相似文献   
3.
目的研究有机溶剂三氯乙烯(TCE)引起BALB/c裸鼠皮肤组织发生细胞凋亡的程度以及凋亡相关蛋白caspase-9与凋亡的关系。方法应用原位末端标记(TUNEL)法检测三氯乙烯染毒的50只BALB/c裸鼠皮肤组织的细胞凋亡,应用免疫组化S-P法检测皮肤组织中caspase-9的表达,并利用抗氧化剂维生素E研究三氯乙烯的损害作用。结果各染毒剂量组皮肤组织的凋亡指数和caspase-9活性的差异有统计学意义,TCE浓度越高,细胞凋亡和caspase-9的表达水平越高,维生素E保护组低剂量下无保护作用,高剂量组有保护作用。结论TCE引起的早期皮肤组织损伤与细胞凋亡有关,caspase-9在凋亡过程中发挥了重要的作用,以线粒体损伤为主要途径的细胞凋亡在三氯乙烯致皮肤组织损伤的过程中具有重要的意义。  相似文献   
4.
目的研究白细胞介素(IL)-1、IL-6和IL-8在三氯乙烯(TCE)致敏豚鼠皮肤组织中的表达情况,探讨TCE药疹样皮炎发病机制。方法将白色雌性豚鼠随机分成空白对照组、溶剂对照组、TCE实验组、2,4-二硝基氯苯(DNCB)阳性对照组,根据豚鼠最大值试验(GPMT)方法处理豚鼠,在终末激发后(依据致敏结果以及取材时点的不同,将TCE实验组以及DNCB阳性对照组分为TCE致敏组24 h、TCE致敏组72 h、TCE未致敏组24 h和TCE未致敏组72 h;DNCB组24 h和DNCB组72 h)进行皮肤反应评分,并采取皮肤组织,制成蜡块,采用Elivison二步法免疫组织化学法检测各组皮肤组织中IL-1、IL-6和IL-8的表达情况。结果根据皮肤反应评分≥1判断为致敏阳性,TCE实验组致敏率为62.1%;TCE致敏组24 h和TCE致敏组72 h的IL-1水平要显著高于溶剂对照组,且差异有统计学意义(P<0.05);同时TCE致敏组24 h与TCE未致敏组24 h比较、TCE致敏组72 h与TCE未致敏组72 h比较差异也有统计学意义(P<0.05),但IL-6和IL-8水平在各个组别和不同时间点之间差异无统计...  相似文献   
5.
目的 研究有机溶剂三氯乙烯(TCE)致角质形成细胞凋亡作用及其与凋亡诱导因子(AIF)的关系. 方法 将45只BALB/c裸鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组(橄榄油)、20%TCE、40%TCE、80%TCE、100%TCE组、0.1%银杏叶提取物(GbE)保护组、1%GbE保护组和10%GbE保护组;皮肤染毒,保护组为先用GbE涂皮后1 h再涂抹TCE.小鼠均于涂抹TCE 24 h后处死,无菌条件下取皮,制成蜡块后切片,应用原位末端标记免疫化学法(TUNEL)检测细胞凋亡,应用免疫组化法检测皮肤组织AIF的表达. 结果 40%TCE、80%TCE和100%TCE组凋亡指数和AIF活性与空白组和溶剂对照组差异有统计学意义(P<0.01),TCE浓度越高,凋亡指数越高,AIF的表达水平也越高;1%GbE和10%GbE保护组凋亡指数和AIF活性与100%TCE组相比差异有统计学意义(P<0.05). 结论 AIF可能参与了TCE诱导的裸鼠皮肤角质形成细胞凋亡,而GbE则对此显示出一定的保护作用.  相似文献   
6.
目的研究银杏叶提取物(ginkgo biloba extract,GBE)对有机溶剂三氯乙烯(TCE)所致BALB/c裸鼠皮肤组织氧化损伤的保护作用。方法将BALB/c裸鼠随机分成空白对照组、橄榄油溶剂对照组、100%TCE处理组和0.1%、1%、10%GBE保护组,分别染毒1d和14d,取染毒背部皮肤进行MDA含量、SOD活性测定。结果用GBE保护后,皮肤组织中的MDA含量随GBE水平的增加呈明显下降趋势,皮肤组织匀浆中的SOD活性随GBE剂量的增加呈上升趋势。结论银杏叶提取物可能通过降低皮肤的氧化应激水平,对TCE所致的皮肤损伤发挥保护作用,从而有效保护三氯乙烯所致BALB/c裸鼠皮肤氧化损伤。  相似文献   
7.
目的 观察三氯乙烯(TCE)致敏小鼠皮肤中组织蛋白酶L(CTSL)的表达情况,探讨CTSL在TCE所致免疫性皮肤损伤中的作用机制。方法 无特定病原体级雌性BALB/c小鼠随机分为空白对照组(5只)、溶剂对照组(5只)、TCE组(15只)和抑制剂组(15只)。按照豚鼠最大反应实验法进行TCE皮肤致敏实验。TCE组、抑制剂组小鼠根据皮肤致敏结果分为致敏亚组和未致敏亚组。于末次激发后72 h处死小鼠,取其实验部位皮肤,检测表皮厚度,以实时荧光定量聚合酶链式反应检测皮肤中Ctsl mRNA的表达,免疫组化法检测皮肤中CTSL、白细胞介素(IL)-6和IL-17的表达。结果 TCE组与抑制剂组小鼠的致敏率分别为40.0%(6/15)和33.3%(5/15),2组小鼠致敏率比较,差异无统计学意义(P0.05)。TCE致敏亚组、抑制剂致敏亚组小鼠表皮厚度和皮肤中Ctsl mRNA、CTSL、IL-6和IL-17的相对表达水平均高于空白对照组、溶剂对照组、TCE未致敏亚组和抑制剂组未致敏亚组(P0.05),TCE致敏亚组小鼠上述指标均高于抑制剂致敏亚组(P0.05)。TCE致敏亚组小鼠皮肤中Ctsl mRNA、CTSL、IL-6和IL-17的相对表达水平在两两之间均存在正相关(P0.05)。结论 CTSL激活可能在TCE致敏小鼠免疫性皮肤损伤中发挥重要作用,其可能与促进IL-6和IL-17的释放有关。  相似文献   
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