不同化学发光免疫检测系统HCG测定结果的可比性研究

目的:探讨不同检测系统测定人绒毛膜促性腺激素(HCG)结果的可比性。方法:分别选用拜尔、德普和自制不同水平的质控物和34例不同浓度的患者新鲜血清,在4个不同的化学发光免疫检测系统(拜尔ACS180、拜尔CENTAUR、强生VITROSECI、德普immulite-1000化学发光免疫检测系统)检测HCG,并对数据进行相关统计学分析。结果:经随机区组设计资料的方差分析,不同厂家、不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清的测定结果在各检测系统间差异均有显著性(P<0.01);各检测系统间的相关系数均大于0.975;可靠性分析信度系数α均接近1;以ACS180作标准检测系统对其它检测系统作临床可接受性能评价,CENTAUR、VITROSECI临床部分可接受,immulite-1000临床不接受。结论:4个检测系统测定HCG结果精密度符合临床要求,但临床可接受性能评价存在不可比性。     

比较不同方法检测血清CYFRA21-1对肺癌的临床诊断价值

目的：比较不同两种方法检测血清细胞角蛋白19片段（CYFRA21—1）对肺癌的临床诊断价值。方法：收集和本院患者的血清CYFRA21—1 ELISA方法;电化学发光法;检测结果及病理诊断,统计两段时期分别用ELISA和ECLIA方法检测CYFRA21-1对肺癌临床诊断的灵敏度和特异性。收集2008年2月～2008年5月本院57例因肺疾病入院的患者血清,同时采用ECLIA和ELISA方法检测血清CYFRA21-1,结合患者临床病理,观察高灵敏度方法出现低值阳性血清CYFRA21—1浓度的范围。结果：用ELISA方法检测血清CYFRA21—1对肺癌诊断的敏感度和特异性分别为：27．1％和97．8％,后期ECLIA法检测血清CYFRA21—1对肺癌诊断的敏感度和特异性分别为：83．6％和78．6％。同时用两种方法检测的57份患者标本中,有32份标本用两种方法检测血清CYFRA21-1均〈3．30ng／mL（阴性）,13份标本用两种方法检测血清CYFRA21—1均≥3．30ng／mL（阳性）,12份标本在ELISA方法中CYFRA21—1测定结果为阴性,而在ECLIA法中为阳性,浓度范围为（3．68—8．20）ng／mL,该12名患者中有9名经细胞学或组织病理学确诊为肺癌患者。结论：ECLIA法测定血清CYFRA21-1对肺癌的诊断比ELISA方法特异性稍低,但敏感度高很多,且能提示低值阳性（3．68—8．20ng／mL）血清CYFRA21-1浓度的肺癌患者,能更好地辅助临床对肺癌的早期诊断和疗效监测,     

艾蒿花粉与豚草花粉的抗原成分分析

目的　比较艾蒿花粉和豚草花粉粗浸液中的蛋白质组分 ,探讨两者间有无共同抗原。方法　制备艾蒿花粉和豚草花粉的花粉浸液 ,采用SDS -PAGE及考马斯亮蓝染色分析两种花粉粗浸液中的蛋白质组分 ;用蒿属花粉过敏者的血清作为第一抗体 ,分别与两种花粉浸液发生反应 ,通过Western -blotting判断两种花粉间交叉抗原的存在。结果　SDS -PAGE显示 ,艾蒿花粉显带 13条 ,分子量在 18～ 10 0kDa之间 ;豚草花粉显带 5条 ,分子量在 18～ 6 3kDa之间。免疫印迹表明 ,11份蒿属花粉过敏患者的血清 ,均能同时与艾蒿花粉及豚草花粉抗原发生反应 ,其中 ,同时发生反应的艾蒿花粉抗原有两条 ,分子量分别为 18kDa和 2 0kDa ;豚草花粉抗原有一条 ,分子量为18kDa。结论　艾蒿花粉与豚草花粉提取液蛋白组分差异较大 ,前者更复杂 ;但两者间存在共同抗原 ,可发生交叉过敏。     

Array-ELISA法和ECLIA法测定六项肿瘤标志物的比较研究

目的分析和评价6项肿瘤标志物测定试剂盒[微阵列酶联免疫法(Array-ELISA)]在肿瘤标志物检测中的应用价值。方法采用Array-ELISA和电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测相同标本的6项临床常见肿瘤标志物:甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)、糖类抗原125(CA125)、糖类抗原199(CA199)和糖类抗原153(CA153)。采用受试者工作特征(ROC)曲线进行分析。结果 2种方法检测AFP、CEA、PSA和CA125的阳性率差异无统计学意义(P>0.05),检测CA199和CA153的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。2种方法对AFP、CEA、PSA、CA125和CA199的检测结果总符合率均>85%,仅CA153的总符合率为61.1%。2种方法对6项肿瘤标志物的检测结果显著相关(P<0.01),相关系数(r)为0.695～0.960。2种方法检测AFP、CEA、PSA、CA125和CA199对相关肿瘤诊断的ROC曲线下面积介于0.62～0.99之间;用Array-ELISA检测CA153对乳腺癌诊断的ROC曲线下面积低于ECLIA。结论 Array-ELISA与ECLIA对6项肿瘤标志物的检测结果均有良好一致性,可以引入Array-ELISA检测6项肿瘤标志物作为常规体检项目和筛查项目。     

抗核抗体间接免疫荧光法检测试剂的比对分析

目的 通过AESKU试剂和欧蒙试剂对164例抗核抗体核型结果的比对分析,评价AESKU试剂间接免疫荧光法抗核抗体检测试剂的性能.方法 从2015年1~12月广东省中医院门诊及住院患者中选取164例样本,分为AID患者组(n=115)和健康对照组(n=49),同时采用AESKU试剂与欧蒙试剂对抗核抗体核型进行双盲、平行检测,不一致结果采用第三方试剂复核.计算两种试剂的阳性符合率、阴性符合率、总符合率、Kappa系数,并进行Kappa一致性检验和配对χ2检验.结果 AESKU试剂与欧蒙试剂的总体阳性符合率为94.78%,阴性符合率为93.88%,总符合率为94.51%;Kappa=0.871,P<0.05,两种试剂的检测结果高度一致,差异无统计学意义(P>0.05).结论 AESKU试剂与欧蒙试剂具有等效性和很高的符合率,操作简便快速、结果清晰易读,适合临床广泛应用.     

日立系列生化分析仪ISE模块配套试剂的研制与应用

目的 研制日立系列全自动生化分析仪ISE模块配套试剂。方法 分析原装试剂成分、理化指标,研制参数相同的试剂,并进行相关的试验。结果 自配与原装试剂的各项成分和理化指标基本一致;使用自配与原装进口试剂测定结果之间相关性好;自配试剂的精密度、准确度、线性范围、稳定性符合要求,经过6个月使用对电极无损害。结论 自配的内标准液、参比液、稀释液可替代原装试剂用于日立生化分析仪ISE模块的测定。     

蒿属花粉 cDNA文库的构建和初步鉴定

目的构建蒿属花粉cDNA表达文库。方法应用定向克隆技术将相应dscDNA片段插入λExCell/NotI/EcoRI/CIP载体的NotI和EcoRI双酶切位点间,经包装、转染宿主菌,构建成cDNA文库。检测文库库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入片段大小进行分析。结果成功构建了一个含有5.6×105个重组子的cDNA表达文库,重组率为100%,插入片段大小平均约1.3kb。结论所建文库容量及插入片段大小适合对蒿属花粉特异性重组变应原的进一步研究。     

不同检测系统CEA测定结果的可比性研究

目的:探讨本院不同检测系统测定CEA结果的可比性。方法:取拜耳、德普、自制不同水平的质控物和32例不同浓度的患者新鲜血清,分别在4台化学发光免疫分析仪(拜耳ACS180、拜耳ADVIACentuar、强生VitronEci和德普IMMULITE)上进行CEA检测,结果比较分析。结果:经随机区组设计资料的方差分析,不同厂家、不同水平的质控物和不同浓度的患者新鲜血清的测定结果在各检测系统间差异均有显著性(P<0 01);各检测系统间的相关系数均大于0.975;可靠性分析信度系数α均接近1;以强生VitronEci作标准检测系统对其他检测系统作临床可接受性能评价,拜耳ADVIACentuar临床部分可接受,拜耳ACS180、德普IMMULITE临床不接受。结论: 4个检测系统测定CEA结果精密度符合临床要求,但临床可接受性能评价存在不可比性。     

丙型肝炎患者血清肝功能与肝纤维化结果相关性探讨

[ 摘要 ] 目的 探讨肝功能指标：丙氨酸氨基转移酶（ALT）、白蛋白（ALB）、总胆红素（TBIL）在丙型肝炎患者肝纤维化评价中的应用。方法 检测106例丙型肝炎患者和79例健康体检人群的肝功能指标（ALT、ALB、TBIL）和肝纤维化标志物（HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C）的血清含量,并分析它们之间的关系。结果 丙型肝炎患者的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C 、ALT、TBIL含量高于正常人组,ALB低于后者,差异具有统计学意义（P＜0.01）。相关分析表明：ALT与PCⅢ存在显著正相关（r＝0.201,P＜0.05）;ALB与HA、 PCⅢ、Ⅳ-C存在显著负相关（r＝-0.391,-0.239,-0.303,均P＜0.05）;TBIL与HA、LN、PCⅢ和Ⅳ-C存在显著正相关（r＝0.319,0.211,0.377,0.389,均P＜0.05）。结论 丙型肝炎患者的肝脏功能较正常人群有所下降,肝纤维化风险更高。肝功能指标ALT、ALB和TBIL在辅助诊断肝纤维化时有一定作用,三者在丙型肝炎患者肝纤维化评价中的应用价值呈TBIL > ALB >ALT顺序排列。     

人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞培养及生物学特性研究

目的 探讨人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的分离及生物学特性.方法 分别取4例RA患者膝关节滑膜组织、1例软骨瘤患者膝关节滑膜组织和1名健康人膝关节滑膜组织,采用组织块培养法培养FLS,使用相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术(FCM)检测培养细胞的表面标志,酶联免疫吸附法定量检测RA第4代FLS细胞培养液上清液白细胞介素-1受体I型(IL-1RI)和白细胞介素1β(IL-1β)水平.结果 组织块培养法成功培养出FLS.RA患者FLS细胞4~7 d细胞数量明显增加,8~12 d细胞可以长满瓶底.第3代以后细胞均质性最好,3~7代细胞稳定且增殖活跃,8代以后增长缓慢并逐渐老化.软骨瘤患者和健康人滑膜组织培养7 d后才有散在单个FLS细胞爬出,大约16 d后FLS细胞可以长满瓶底.FCM分析RA第4代FLS CD90+细胞的百分率为99.04%,CD3+为2.73%,CD3-CD19+为0.29%,CD3-CD16+CD56+为2.81%,CD14+为5.89%,CD55+为54.17%.RA第4代FLS细胞培养上清液IL-1RI浓度为(158.63±20.32) pg /ml,IL-1β为(4.67±0.82) pg/ml. 结论 组织块培养法能有效分离RA患者FLS,FLS具有高水平表达CD90、IL-1RI和IL-1β的特性.