DNA探针板杂交法检测临床标本中结核杆菌的应用

目的：在酶标板上进行ＤＮＡ探针杂交,评价其在检测临床标本中结核杆菌的应用价值。方法：收集７１份结核性标本和３２份非结核性标本,进行ＤＮＡ扩增,把扩增产物分别进行电泳和ＤＮＡ探针杂交,比较其结果。结果：７１份结核性标本电泳法阳性率为４５１％,ＤＮＡ探针法阳性率为６９０％;３２份非结核性标本二者均为阴性。结论：ＤＮＡ探针杂交可提高临床标本中结核杆菌的阳性检出率,是结核病早期诊断的一种新方法。     

结核分枝杆菌吡嗪酰胺耐药相关蛋白的原核表达及纯化

目的构建结核分枝杆菌pncA基因的原核表达质粒,获得结核分枝杆菌吡嗪酰胺酶的表达蛋白。方法制备结核分枝杆菌基因组DNA,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段;通过pET28a构建表达载体pET28a-pncA,序列测定证实正确后转化大肠埃希菌DH10b,经IPTG诱导表达His-吡嗪酰胺酶融合蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白。结果扩增出结核分枝杆菌pncA基因并构建了具有正确基因序列的质粒载体pET28a-pncA,转化大肠埃希菌BL21后经诱导产生了分子质量单位约20ku的表达产物,并得到纯化的带His标签的目的蛋白。结论构建了结核分枝杆菌pncA基因原核表达质粒,并诱导表达了His-吡嗪酰胺酶融合蛋白,为进一步研究吡嗪酰胺耐药性奠定了基础。     

聚合酶链反应在结核病诊断上的应用研究

本文运用ＰＣＲ检测技术，对５５例正常人，３５例非结核性肺部疾病患者，１４６例肺结核病人作对照，用抗酸染色法以及分枝杆菌培养法作对比分析，检测结果为ＰＣＲ检测法阳性率明显高于涂片和培养法，特异性为９７．８％，敏感世为８０％。由于其方法简单，检测速度快，灵敏度高，为结核病的诊断和鉴别诊断提供可靠的依据。     

结核病五项实验检测方法的对比分析

目的 对实验检测方法进行对比分析,探讨对结核病诊断的价值?方法 选健康人53 名?肺结核70 例及非结核肺部疾患30 例,采用痰涂片?培养?结明试验?酶联免疫法及聚合酶链反应检测进行对比分析?结果 涂片?培养?酶联免疫法特异性高,但敏感性低于50 % ,其次为聚合酶链反应法,结明试验特异性与敏感性分别为98.1 % 及64.2 % ?结论 结明试验具有特异性高?简便?快速等特点,是结核病诊断的一种有力辅助手段?     

河南省2010年结核病流行病学抽样调查点细菌学检测结果分析

目的 了解河南省人群中结核分枝杆菌的流行特征。 方法 依据《全国第五次结核病流行病学抽样调查实施细则》的抽样规则,抽取河南省36个点代表,共涉及18个地市的36个县,实检49 091名,均进行X线摄片检查,共发现肺结核可疑症状者和（或）X线胸片异常者2877例,收集此部分人群的痰标本,对痰标本进行涂片镜检、分离培养、菌株鉴定,以及一、二线抗结核药物（异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、对氨基水杨酸、卡那霉素、氧氟沙星、丁胺卡那霉素、卷曲霉素）的耐药试验。 结果 在2877例可疑肺结核患者中发现痰涂片阳性者35例,涂阳率1.22%;分离培养的2875例中获得45株结核分枝杆菌,结核分枝杆菌阳性率为1.57%,其中北京基因型菌株占91.11%（41/45）,非北京基因型占8.89%（4/45）。肺结核患者任一耐药率和耐多药率分别为28.89%（13/45）、6.67%（3/45）。 结论 河南省结核分枝杆菌以北京基因型为主,仍为耐药结核病的高负担地区,需采取更加有效的防治策略和措施来控制结核病。     

河南省第二轮结核病耐药监测及耐药趋势研究

目的掌握河南省2001年结核病耐药水平,评价1996—2001年耐药趋势,为结核病控制决策提供参考。方法采用整群抽样随机抽取30个监测点,各监测点连续入选43个新涂阳病人,同时纳入其间的复治涂阳病例。痰涂片镜检采用Ziehl-Neelsen法,培养用L-J培养基。对培养阳性的菌株用TCH和PNB进行菌型鉴定。对四种抗结核药物:INH,RFP,EMB和SM采用比例法进行药敏试验。结果总耐药率、初始耐药率及获得性耐药率分别为35.3%,29.8%和60.8%;总MDR率、初始MDR率和获得性MDR率分别为:12.9%,7.8%和36.6%。2001年河南省总耐药率、初始耐药率及总MDR率、初始MDR率较之1996年有所下降,但获得性耐药率及获得性MDR率变化不明显。结论河南省结核病耐药率仍处于全国5个监测省份之首和全球前几位,应引起高度重视。同时提示河南省需采取得力措施落实DOTS策略。     

河南省结核病分子流行病学调查研究

目的探讨河南省结核分支杆菌的分子流行病学分布特征。方法样本的获得采用全省范围等比例分层整群随机抽样;构建以IS6110 RFLP DNA指纹方法和以DR为基础的Spoligotyp ing DNA指纹方法;采用Gel compare 4.1软件对DNA指纹图谱进行聚类(c luster)分析。结果共获得186株可进行IS6110 RFLP DNA指纹分析的结核分支杆菌;其中59.14%(110/186)用Spoligotyp ing DNA指纹方法鉴定为“北京基因型”菌株。结论北京基因型结核分支杆菌在河南省呈较高水平的流行。     

PCR在结核病诊断上的应用研究

ＰＣＲ在结核病诊断上的应用研究闫国蕊杨建华祖燕叶德普ＰＣＲ检测技术自１９８９年被列入结核病诊断以来尚有不同的认识，为此我们在研究方法学的基础上来确认ＰＣＲ在结核病诊断上的特异性和敏感性。研究对象为正常健康人５５例；非结核性肺病患者３５例（其中肺炎１３...     

结核病五项实验检测方法的对比分析

目的 对实验检测方法进行对比分析，探讨对结核病诊断的价值。方法 选健康人５３名、肺结核７０例及非结核肺部疾患３０例，采用痰涂片、培养、结明试验、酶联免疫法及聚合酶链反应检测进行对比分析。结果 涂片、培养、酶联免疫法特异性高，但敏感性低于５０％，其次为聚合酶链反应法，结明试验特异性与敏感性为９８．１％及６４．２％。结论 结明试验具有特异性高、简便、快速等特点，是结核病诊断的一种有力辅助手段。