Polymyxin B antagonizing biological activity of lipopolysaccharide

Objective ： To investigate the mechanism of polymyxin B （ PMB ） antagonizing the biological activity of Hipopolysaccharide （LPS）. Methods： The affinity of PMB for LPS and lipid A was assayed by biosensor, and the neutralization of PMB for LPS （2 ng/ml ） was detected by kinetic turbidimetric limnins test. The releases of TNF-α and IL-6 in murine peritoneal macrophages （PMφ） after exposure to LPS （ 100 ng/ml） were detected, and the expression levels of TLR4, TNF-α and IL-6 mRNA in PMφ induced by LPS （100 ng/ml） were measured by RT-PCR. Results： PMB had high-affinity to LPS and lipid A with dissociation equilibrium constants of 18.9 nmol/L and 11.1 nmol/L, respectively, and neutralized LPS in a dosedependent manner. Furthermore, PMB could markedly inhibit the expressions of TLR4, TNF-α and IL-6 mRNA and the release of cycokines in LPS-stimniated murine PMφ. Conclusions： PMB neutralizes LPS and inhibites the expression and release of cycokines in macrophages, in which the affinity of PMB for lipid A plays an important role.     

利用激光共聚焦显微镜研究MP多肽抑制粒细胞呼吸爆发造成的脂质过氧化作用

目的：研究MP多肽抑制呼吸爆发的作用机制。方法：培养人白细胞系THP1细胞，对照组细胞培养体系中仅给予内毒素(LPS，100ng／ml)刺激，治疗组在同样浓度的LPS刺激同时加入MP多肽(20μM)，采用乙酰乙酸盐2，7二氯氢化荧光素(D399)和碘化丙啶(PI)双标记，用D399及PI对两组细胞进行染色。激光共聚焦显微镜检测两组细胞D399在细胞内的脂质过氧化产物2，7二氯荧光素及PI的荧光强度。     

烧伤削切痂植皮手术中的综合止血措施

目的探讨减少烧伤削切痂植皮手术中出血的方法。方法 233例拟行削切痂植皮手术的烧伤患者被随机分为两组,A组(118例)术中采取包括持续止血带控制下肢体削痂植皮方法,头皮止血带技术,以及痂下注射肿胀技术等综合止血措施。B组(115例)采用传统的止血方法。前瞻性地调查了两组的手术失血量、输血量、植皮成活率和术后并发症。结果A组的失血量和输血量比B组分别减少48％和59％(P<0.001);两组患者植皮成活率和皮片下血肿发生率无显著性差异(P>0.05)。结论采用综合性止血措施能有效地控制烧伤削切痂植皮手术中的失血,减少输血量。     

以Lipid A为靶点拮抗内毒素中药的筛选

目的利用生物传感器跟踪技术从抗炎中药中筛选出具有拮抗内毒素的中药,为进一步对中药拮抗内毒素活性成分的分离纯化提供实验依据。方法将革兰阴性细菌的脂质A(Lipid A)包被于生物传感器的非衍生板建立靶点,跟踪测定赤芍、大黄、黄芩等78种中药的水提物和醇提物与Lipid A的结合活性,再将筛选出的中药去鞣质后与定量的内毒素(LPS,20、50ng·ml-1)37℃孵育30min后,测定孵育后的样品与Lipid A的结合情况,以评价样品内的活性物质含量。结果在所筛选的78种中药中有12种中药的水提物与Lipid A具有较高的亲和活性,在这12种中药中有6种中药的醇提物与Lipid A也具有较高的亲和活性;通过对所筛选出的12种中药的水提物去除鞣质后与LPS的消耗实验,发现所筛选出的12种中药均含有除鞣质以外的与lipid A具有特异性结合的物质,并且12种中药中能与Lipid A发生特异性结合作用的活性物质含量存在较大的差异。结论生物传感器跟踪技术是一种快速、准确、有效的筛选平台,筛选出的12种中药均含有非鞣质类能与lipid A发生特异性结合作用的物质,为进一步对12种中药抗内毒素有效部位或单体的分离提供了重要的实验依据。     

十字形中厚皮片移植修复大腿残端巨大创面四例

大腿截肢后不仅需要外科治疗修复残端创面,还需顾及义肢装配及其功能康复.2010年1月-2011年12月,笔者对4例患者大腿截肢后残端巨大创面实施十字形大张中厚皮片移植,在修复创面的同时,为义肢装配和肢体功能康复奠定了良好的基础,现介绍如下.     

碱性成纤维细胞生长因子在创伤修复中的应用

1996以来,我院应用碱性成纤维细胞生长因子气霉剂(珠海东大生物工程公司产品)治疗多种创伤创面(主要为烧伤创面),疗效满意,现报告如下:1 资料与方法1.1 一般资料 本组共136例(男74例,女62例)。年龄最小者0.5y,最大者67y。Ⅱ度烧伤67例,Ⅱ度烧伤兼有Ⅲ度烧伤者51例,其它伤面18例。本组中化学性烧伤18例,电烧伤5例,热力烧伤95例,褥疮2例,供皮区17例。1.2 治疗方法 将每支碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)干粉(36000 U)溶于10ml溶媒中,喷用于1500cm~2创面。对Ⅱ度烧伤创面在彻底清除坏死组     

早期削痂治疗度创面为主的大面积烧伤14例

目的　探讨以 度为主的大面积烧伤创面的处理方法 ,以期缩短创面治疗时间。方法　 1997年以来收治的以 度创面为主大面积烧伤 14例 ,采用早期削痂以猪皮覆盖为主 ,结合自体皮移植的方法治疗。结果　 14例全部治愈 ,平均手术次数为 1.2 1次。 11例一次手术治愈 ,创面愈合时间 14～ 34天 ,平均为 2 3± 5 .6天。结论　以 度为主的大面积烧伤创面利用本法治疗可较好地保护创面 ,减少创面加深或感染 ,缩短创面治疗时间     

大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜免疫功能的变化与意义

目的 :观察大鼠肠缺血再灌注损伤后肠黏膜免疫功能的变化 ,并探讨其与肠源性细菌内毒素移位的关系。方法 :采用大鼠小肠缺血 45min再灌注模型 ,分别于再灌注后即刻、2h、6h、2 4h用免疫放射法测定肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量 ;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 (MTT)测定Peyer’s淋巴结 (PP)、上皮内淋巴细胞 (IEL)和固有层淋巴细胞 (LPL)增殖活力 ;无菌取肠系膜淋巴结行细菌培养 ,统计细菌移位率 ;取门静脉血检测内毒素。结果 :肠缺血再灌注后肠黏膜中sIgA含量及淋巴细胞增殖活性均明显下降 (P <0 0 1) ,血浆内毒素含量较再灌注前显著升高 (P <0 0 1) ;并于再灌注后 2h起出现肠系膜淋巴结细菌移位 ;肠黏膜内sIgA含量及肠道相关淋巴组织淋巴细胞增殖活力与肠源性细菌内毒素移位呈显著负相关 (r =-0 5 5 3～ -0 75 3 ,P <0 0 1)。结论 :肠缺血再灌注损伤后肠黏膜免疫功能下降 ,与肠外细菌内毒素移位的发生密切相关。     

大黄对烧伤家兔口服补液复苏休克指标的改善作用

目的探讨生大黄对烧伤休克家兔口服补液复苏的改善作用。方法选取48只家兔,随机均分为A组(空白对照)、B组(烧伤未复苏)、C组(0.9%盐糖口服补液)、D组(0.9%盐糖+大黄口服补液)。比较各组家兔致伤后2、4、8、12、24 h测定中心静脉压(CVP)、血清乳酸、平均动脉压(MAP)和24 h尿量。结果本研究所有家兔均存活,D组休克指标总体优于B组及C组。讨论大黄对严重烧伤家兔口服补液复苏有较好的协同作用。     

雷帕霉素抑制大鼠移植肝胆管上皮细胞增殖作用的研究

目的探讨雷帕霉素对大鼠移植肝胆管上皮细胞增殖及其周围成纤维细胞活化的抑制作用。方法“二袖套法”建立大鼠原位肝移植模型,并随机分为供肝冷保存1h组、12h组、雷帕霉素组（冷保存12h组术后给予雷帕霉素）、对照组。分别于术后1、3、7、14d检测血清ALT、TB、ALP,免疫组化法检测各组胆管上皮细胞增殖率及肌纤维母细胞分布,并统计各组生存率。结果冷保存12h组术后生存率明显低于冷保存1h组（P=0.0174）,血清ALT〉200IU/L、ALP〉160IU/L、TB〉3.6μmol/L,持续高于冷保存1h组（ALT〈160IU/L、ALP〈200IU/L、TB〈3.6μmol/L）,各时相点胆管上皮细胞增殖率（7%,27.8%,23.1%,17.8%）显著高于冷保存1h组（2%,6%,2.6%,2.3%）和对照组（1.3%）。冷保存12h组术后7、14d可见胆管周围较多肌纤维母细胞聚集;雷帕霉素组术后2周生存率与冷保存12h组接近（P=0.89）,胆管上皮细胞增殖率（5.9%,15.8%,13.6%,11.4%）明显降低,胆管周围肌纤维母细胞分布较少。结论冷保存-再灌注直接损伤肝脏,诱导胆管上皮细胞增殖及肌纤维母细胞聚集,雷帕霉素明显抑制胆管上皮细胞增殖及肌纤维母细胞活化并对移植肝具有保护作用。