体外模拟心肌微环境诱导婴幼儿骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的实验研究

研究结果表明，骨髓间充质干细胞（BMSCs）在心脏微环境中可以自发的分化为心肌细胞（CM）。我们在前人研究的基础上，对应用小鼠CM体外构建的心肌微环境使婴幼儿BMSCs向CM分化的可行性进行了探讨。     

尿失禁病人排泄报警器的研制

长期卧床的患者,诸如许多偏瘫、截瘫、婴儿患者以及由其它疾病致使二便失禁。对于这类病人,二便次频量多,无规律,护理人员难以掌握,若不能及时换掉湿尿布,极易发生并发症———褥疮、尿布温疹、皮肤搔痒等。因此为使患者床铺保持干燥、清洁、舒适、预防卧床并发症的发生,我们研制了受湿报警器。1设计原理设计原则遵循简单、方便、可靠、安全。报警器电路核心采用专用蜂鸣片,加上外围电路及传感器,电路如图1所示。蜂鸣片选用BP机声调,该声音具有清晰、悦耳,不易引起人的反感。蜂鸣片输出信号再通过一级射极放大器,以增加信号输出电流,用以推…     

磁悬浮式带辅助支点离心血泵的可行性研究

提出带一个辅助支点的磁悬浮内置电机式离心血泵，泵出口采用了全新的设计方法，泵进出口及叶轮在一条轴线上，使血泵的流体结构较为合理。陶瓷滚珠支承使泵运行更稳定，可承受更大的负荷，且陶瓷在血液中不会被腐蚀，和血液相容性较好。在此基础上对血泵性能进行了测试，初步实验表明该泵的性能良好，其物理特性能满足临床体外循环及辅助循环的需要。     

小儿骨髓内皮细胞和内皮祖细胞的培养及鉴定

目的探索小儿骨髓内皮细胞和内皮祖细胞的分离培养,为组织工程血管、补片或带瓣管道的制备找新的种子细胞来源.方法采集小儿骨髓,梯度密度离心法分离单核细胞,内皮细胞培养液EGM-2培养,种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿进行体外扩增,分别取48 h内贴壁细胞和48 h后贴壁细胞,应用免疫组化和免疫荧光技术鉴定内皮细胞系列标志:CD34、CD31、FLK-1、VE-Cadherin和Ⅷ因子以及祖细胞标志CD133.结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞表达内皮细胞特异性抗原CD34、CD31、FLK-1、VE-Cadherin和Ⅷ因子,部分表达CD133.培养至第5代细胞形态基本相似,细胞总数可以达到108以上.结论自小儿骨髓可以分离培养出内皮细胞和内皮祖细胞并能体外扩增,可以作为构建组织工程血管、补片或带瓣管道的种子细胞来源.     

脱氢野百合碱诱导犬肺动脉高压模型的建立

目的用药物法建立犬肺动脉高压模型。方法野百合碱经脱氢处理成脱氢野百合碱 (dehydromonocrotaline,DMCT),经心导管注射入犬右心房,于注射药物后4周、8周测定肺动脉压力等血液动力学参数,并行肺组织病理检查,评估周围肺肌性动脉肌化情况、肌性肺动脉中膜肥厚程度。结果 DMCT(3 mg／kg)组8只犬存活2只,DMCT(2 mg／kg)组8只犬与对照组犬均存活。DMCT组4周后平均肺动脉压(mMPAP)(20．7±3．1)mm Hg(1 mm Hg=0．133 kPa),8周后mPAP(30．2±2．6)mm Hg,肺动脉收缩压(sPAP)和肺动脉楔压(PCWP)亦升高,与给药前相比,差异有统计学意义(P<0．01)。DMCT组8周后 mPAP、sPAP与PCWP亦明显高于溶剂对照组,差异有统计学意义,P<0．01。8周后DMCT组直径为15- 50μm的肺肌性动脉肌化数(54．3±6．6)％,直径为100-200μm的肺肌性动脉的中膜厚度百分比(27．3± 5．7)％,均高于溶剂对照组,差异有统计学意义(P<0．01),右心肥大指数增加(P<0．05)。光学显微镜下观察到DMCT组肺泡区肺肌性动脉中膜肥厚,新生内膜形成,管腔变小。结论 DMCT可成功诱导犬肺动脉高压模型,模拟人类终末期肺高压的病理特点。     

异种血管材料重建右室流出道动物模型的建立及围术期的处理

为总结牛颈静脉植入犬肺动脉手术的围术期处理。将10－15kg成年杂种犬10头，开胸后用牛颈静脉壁补片扩大肺动脉。结果：10只犬均存活，其中1条发生术后感染，经清创抗生素治疗后恢复。结果探索：整个手术过程中都应注意预防感染和人员防护，术前要备全所有需要的器械，并对动物进行清洗、备皮；术中要密切观察动物的生命体征；术后要加强监护，妥善处理术后各类并发症。参与动物手术护理时既要符合临床需求，又要考虑到动物实验的特点，才能保证手术的顺利完成。     

内皮祖细胞定向分化平滑肌细胞的实验研究

目的 内皮祖细胞是一种理论上非常合适的血管组织工程种子细胞,最终分化成成熟内皮细胞.实验拟证实内皮祖细胞可以定向分化成平滑肌细胞.方法 以猪为实验动物,采集骨髓单核细胞,分离培养内皮祖细胞,然后应用血小板衍生生长因子(PDGF)BB诱导内皮祖细胞定向分化.通过免疫组化和免疫荧光法鉴定细胞类型.结果 经过诱导的内皮祖细胞定向分化成平滑肌细胞.未经诱导的细胞分化成内皮细胞.结论 内皮祖细胞不仅可以分化成内皮细胞,而且可以在PDGF-BB作用下分化成平滑肌细胞,是一种理想的血管组织工程种子细胞来源.     

先天性心脏病患儿骨髓单核细胞分离培养内皮祖细胞的实验研究

目的探索自先天性心脏病患儿骨髓单核细胞中分离培养内皮祖细胞的方法，期望为儿童组织工程血管、补片或带瓣管道的制备找到新的种子细胞来源。方法采集先天性心脏病患儿骨髓，梯度密度离心法分离单核细胞，内皮细胞培养液EGM-2培养，种植于提前包埋了纤维连接蛋白的培养皿进行体外扩增，取48h后贴壁细胞，应用免疫组织化学和免疫荧光技术鉴定内皮细胞系列标志：CD34、CD31、FLK-1、ve-Cadherin和Ⅷ因子。结果经过梯度密度离心和贴壁法选择的细胞表达内皮细胞特异性抗原：CD34、CD31、FLK-1、ve—Cadherin和Ⅷ因子。培养至第5代细胞形态基本相似，细胞总数可以达到10^8以上。结论自先天性心脏病患儿骨髓单核细胞中可以分离培养出内皮祖细胞并能体外扩增，可以作为先天性心脏病患儿构建组织工程血管的种子细胞来源。     

用牛颈静脉制备抗栓 抗钙化性右心流出道修复材料的实验研究

目的论证用牛颈静脉制备抗栓、抗钙化右心流出道修复材料的可行性。方法用EX-313交联牛颈静脉带瓣胶原管道并用肝素处理其内壁,裁成带单瓣的补片,用其扩大7条犬的肺动脉,同时建立用戊二醛制成的补片扩大肺动脉对照模型。在6个月内观察补片的抗栓、抗钙化、内皮化及组织重构的情况。结果在抗栓、抗钙化、内皮化及组织重构方面EX-313及肝素处理的牛颈静脉明显优于戊二醛处理者。结论经亲水性交联剂EX-313及肝素处理内壁的牛颈静脉有可能成为制作重建右心流出道的基本材料,在进一步研究的基础上它也可能成为组织工程带瓣管道的支架材料。     

深低温停循环下神经生长因子的脑保护作用研究

目的建立一种新的深低温停循环模型,研究深低温停循环（DHCA）对兔大脑皮层、海马组织中神经细胞凋亡情况,探讨DHCA下神经生长因子的脑保护作用。方法健康新西兰大白兔幼兔（0.5 kg）20只,随机均分为2组：实验组（给予生长因子）和对照组（不给予生长因子）。在DHCA前、后不同时间窗监测血清S100β含量,并采用原位末端标记法（TUNEL染色法）观察和测定脑组织神经细胞凋亡的情况。对照分析两组不同时间窗S100β的变化以及神经细胞凋亡的情况。结果实验组幼兔在DHCA后神经细胞凋亡数目显著减少（P〈0.05）,在DHCA后30 min（T2）、1 h（T3）、3 h（T4）、5 h（T5）、12 h（T6）5个时间窗血清S100β蛋白含量明显低于对照组（P〈0.05）。结论给予外源性神经生长因子能明显抑制海马以及皮层神经细胞的凋亡,对深低温停循环后的神经细胞有良好的保护作用。