人app基因转染PC12细胞及效果检测

目的研究转染人app基因后PC12细胞的生物学性状变化和检测app基因在受体细胞中的蛋白表达水平。方法用脂质体转染对数生长期的PC12细胞,细胞分为3组:转染PCDNA3的正常对照组,app转染组和变异的V642Iapp转染组。用G418筛选阳性细胞,建立稳定表达的细胞株。采用Western印迹法检测目的基因蛋白质的表达情况。使用细胞形态学方法、MTT法观察转染后对生长的影响。结果Western印迹法显示,转染app和V642Iapp组有人的APP蛋白表达。细胞形态无明显改变,MTT测定转染后细胞的倍增时间和生长时间没有因为目的基因的导入而改变。结论正常条件下培养,过度表达人的APP对细胞的形态、倍增时间和生长无明显影响。     

实体瘤的细胞遗传学研究

肿瘤的染色体改变对其行为有重要影响,这不仅表现在恶性肿瘤的分型、预后上,对阐明肿瘤的发生机理也有重要作用。直至90年代,占全部肿瘤5％的血液和淋巴系统肿瘤的染色体研究资料已占全部肿瘤的90％,相反,占全部肿瘤80％的实体瘤,其染色体研究资料,仅占全部肿瘤的10％,而这些资料又大部分来源于对实体瘤细胞系的研究,原发性实体瘤的资料仅占全部肿瘤染色体研究资料的1％。这是由于原发实体瘤必需在手术室中取材,难于准确认定肿瘤增生旺盛的区域;染色体     

肺癌细胞A549中FAK通过下游PI3K/AKT途径抗失巢凋亡

目的 研究FAK调节肺癌细胞A549抗失巢凋亡的功能和信号通路。方法 应用光镜观察，Hoechst33342染核、电镜、Western Blot、RNA干涉技术、PI3K的抑制剂，对FAK调节肺癌细胞A549抗失巢凋亡的功能和信号通路进行研究。结果 发现肺癌细胞A549具有抗失巢凋亡的能力；A549细胞悬浮培养时，FAKtyr-397/861/925的活性随时间的延长逐渐增加又降低，磷酸化的PI 3K和AKT表现出与其一致的活性变化；通过RNA干涉实验发现干涉组比对照组细胞出现明显的凋亡现象，同时PI3K/AKT的磷酸化水平下降；PI3K的抑制剂组比对照组出现更多的凋亡细胞。结论 FAK在肺癌细胞A549抗失巢凋亡中发挥了重要作用，其抗失巢凋亡的机制是通过激活下游PI3K/AKT通路来实现的。     

淀粉样前体蛋白过度表达细胞模型的建立及对细胞增殖和凋亡的影响

目的:建立淀粉样前体蛋白过度表达的细胞模型,并观察其对PC12细胞形态及细胞增殖的影响和在氧化应激损伤时,对细胞生长及凋亡的影响。方法:实验于2003-09/2004-12在哈尔滨医科大学遗传与细胞生物学教研室完成。用脂质体转染对数生长期的PC12细胞,细胞分为3组:转染真核表达载体的正常对照组;淀粉样前体蛋白过度表达组;642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变淀粉样前体蛋白过度表达组,建立稳定表达的细胞株。用Western印迹法验证转染效果。使用细胞形态学方法、四甲基氮唑兰法观察对细胞形态和生长的影响;使用四甲基氮唑兰法、Hoechst33342观察在无血清培养24h后,100μmol/L过氧化氢作用4h对PC12细胞(经神经生长因子处理分化为交感神经元样细胞而接近于神经元)的影响。结果:①Western印迹法结果:转染真核表达载体的正常对照组无人的淀粉样前体蛋白表达,而淀粉样前体蛋白过度表达组和642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变:淀粉样前体蛋白过度表达组有人的淀粉样前体蛋白表达,说明转染成功。②野生型淀粉样前体蛋白和突变型642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变:淀粉样前体蛋白过度表达组基因转染PC12细胞后,与转染真核表达载体的正常对照组相比细胞形态及细胞突起的数量和长度无明显改变。③四甲基氮唑兰法测定结     

家族性肌萎缩性侧索硬化症的遗传学与超氧化物歧化酶(SOD-1)

家族性肌萎缩性侧索硬化症占肌萎缩性硬化症的5％～10％,它与21号染色体相连锁。在这些家系中证实有SOD-1变异。     

MIF基因多态性及其与疾病关系的研究进展

巨噬细胞移动抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)是一种具有多种生物活性的细胞因子,处于免疫调节的中心环节,在机体的炎症和免疫反应中起重要作用.在一些疾病中,MIF的表达水平发生改变.其启动子的两个多态位点影响其表达,并且与某些疾病的易感性、严重性及抗药性相关.本文首先介绍MIF的生物学功能,然后对近些年来MIF基因多态性与疾病易感性与严重性的研究进展作一综述.     

逆转录病毒类载体在基因治疗中的发展和应用

在当前的基因治疗临床实验中，最常用的基因运载体是经过人工改建的、携带有正常人类DNA的病毒，通过感染的方式包裹和运送基因到人类细胞中。其中，逆转录病毒类载体无论是在应用广度和研究深度上都远超过其他病毒。这主要是因为与其他病毒相比，逆转录病毒的免疫原性低，感染效率高，整合性强，外源基因表达效率高，并且病毒本身具有一定的靶向性。本文将就逆转录病毒类载体的特点、应用和目前研究的重点做一简要综述。     

地塞米松体外诱导大鼠胚胎垂体生长激素细胞的实验研究

目的探讨糖皮质激素和生长激素释放激素(GHRH)对大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化的作用。方法利用免疫组化、放射免疫分析、RT-PCR和免疫电镜等方法,研究糖皮质激素体外诱导GH细胞分化的最佳浓度、所需要的最短时间及GHRH在大鼠胚胎垂体细胞分化中的作用。结果在体外培养的大鼠胚胎垂体细胞中,地塞米松能提高GH mRNA的表达水平,增加GH细胞内分泌颗粒的积聚。当GHRH浓度达到1 ×10-7 mol/L 时,可以增强地塞米松对GH细胞的诱导分化作用。结论地塞米松能够促进GH细胞的体外分化,并具有一定的剂量依赖性。GHRH与地塞米松具有协同效应,共同促进GH细胞的分化与分泌。     

家族性肌萎缩性侧索硬化症的遗传学与超氧化物歧化酶（SOD—1）

家族性肌萎缩性侧索硬化症占肌萎缩性硬化症的５％￣１０％，它与２１号染色体相连锁。在这些家系中证实有ＳＯＤ－１变异。     

黑龙江省异常血红蛋白的研究 Ⅲ.3,200名中小学生异常血红蛋白调查报告

我国异常血红蛋白的调查研究开始于1964年,前些年曾发现30余种异常血红蛋白,但均未作结构分析,近年来北京、上海等地开始用“指纹法”(高压电泳——层析双向分离法)进行异常血红蛋白结构分析。已发现的异常血红蛋白主要分布在南方沿海省份和内蒙等地,东北地区未见