携带tPA基因转移的真核表达载体的构建研究

目的　构建一种无形成病毒及激活原癌基因之虞的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋ ）ｔＰＡ，以探讨其对纤溶活性的影响。方法　用分子克隆方法，将人ｔＰＡ ｃＤＮＡ 与真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋ ）重组，并对重组质粒进行ＤＮＡ 测序。结果　重组质粒ｐｃＤＮＡ３．１（＋ ）ｔＰＡ 经Ｋ ｐｎＩ和ＸｂａＩ酶切后，出现了５．４ｋｂ 与 ２．０ｋｂ 两个片段；经ＰｓｔＩ酶切后出现了 ７８ｂｐ，４１４ｂｐ，６２２ｂｐ，２．０Ｋｂ 及４．２Ｋｂ 五个片段；经ＥｃｏＲＩ酶切后，出现了４７２ｂｐ 及６．９Ｋｂ 两个片段；测序结果证明为人全长ｔＰＡ ｃＤＮＡ。结论　该新型表达质粒的构建为探讨基因防治脑梗塞等血栓性疾病提供了新工具，新思路     

三十年的回顾

1978年,党的十届三中全会确定了改革开放的路线,迎来了"科学的春天",为我国科学发展开辟了崭新的道路.由于历史的原因,我国遗传学,特别是医学遗传学的发展曾受到很大的影响,而在20世纪60～70年代国际上遗传学、分子生物学的发展突飞猛进,取得了很多突破性进展.     

高低转移肺腺癌细胞系中肿瘤抑制基因p16、p21和p53表达研究

目的 探讨肿瘤抑制基因对肺腺癌细胞生长的抑制作用。方法 利用FuGene转染方式分别将p21和p16基因的表达质粒转入－对肺腺癌细胞系Anip973和AGZY83－a中,同时用含野生型p53 基因的腺病毒感染p16基因转染前后的这一对细胞系。对P16和P21蛋白过表达的细胞系进行了细胞生长曲线、克隆形成率、原位末端标记分析和流式细胞仪分析。结果 p16基因的过表达只能使细胞系的G1期细胞比例提高,但细胞生长曲线,克隆形成率均未出现改变,未检测到凋亡信号。P21蛋白过表达的一对细胞系细胞生长曲线斜率降低,克隆形成能力下降,并出现明显的G1期阻滞,但未检测到凋亡信号。p53基因感染AGZY83－a,Anip973及经过p16基因转染的细胞AGZY83－ap16和Anip973p16后呈现时间依赖性表达,细胞生长曲线和四唑盐比色法分析提高,野生型p53基因的大量表达明显抑制以上4种细胞的生长,Anip973和Anip973p16的生长抑制率高于AGZY83－a和AGZY83－ap16;Anip973p16和AGZY83-ap16的生长抑制率高于Anip973和AAGZY83－a。这4种细胞在感染p53后出现典型的凋亡信号。结论p16基因的过表达并不能抑制细胞系的生长,而p21基因的过表达通过G1期阻滞抑制这1对肺腺癌细胞的生长;野生型p53基因在AGZY83－a和Anip973中高效表达可产生明显的细胞生长抑制效应;野生型p53基因对肺腺癌高转移细胞系Anip973抑制作用更为明显。     

真核表达载体pcDNA3.1(+)tPA的构建

目的 构建一种无形成病毒及激活原癌基因可能的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋）ｔＰＡ,以探讨其对纤溶活性影响。方法 用分子克隆方法,将人ｔＰＡｃＤＮＡ与真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（＋）重组,并对重组质粒进行ＤＮＡ测序,结果 重组质粒ｐｃＤＮＡ３．１（＋）ｔＰＡ经ＫｐｎＩ和ＸｂａＩ酶切后,出现了５．４ｋｂ与２．０ｋｂ两个片段,经ＰｓｔＩ酶切后出现了７８ｂｐ,６２２ｂｐ,２．０ｋｂ及４．２ｋｂ五个片     

17例原发性非小细胞肺癌的比较基因组杂交研究

目的：分析非小细胞肺癌的遗传物质不平衡状态，为寻找非小细胞肺癌相关基因、揭示其病因提供线索。方法：应用比较基因组杂交技术分析了17例原发性非小细胞肺癌。结果：发现1p、3q、6p、7p、8q、19p、22q为DNA序列拷贝数高频增加区，3p和9p为高频缺失区。结论：非小细胞肺癌具有广泛的遗传物质不平衡，丰硕于1p、3q、6p、7p、8q、19p、22q、3p和9p区域的一些已知和未知的基因可能与其发生演进相关。     

COL1A2基因多态性的研究进展

COL1A2基因是位于常染色体上的一种编码人类 I型胶原的基因。这种基因具有大量的突变位点而且常染色体突变位点能够稳定地传递 ,因而利用这种多态性来进行人类学研究是非常有意义的。本文主要就 COL 1A 2基因在人类的起源和迁移以及它在与人类疾病相关性的研究进展方面作一综述     

最新的人类基因图

人类基因图几乎开始被填满。已鉴定了1,200多个基因位点(基因在染色体上所占位置)。大多数(1,100个以上)是在常染色体上,其中120多个已定位在特定的常染色体上。至于性染色体,96个位点位于X染色体,2个位点在Y染色体上。据V.A.Mckusick和一位著名遗传学家估计,1,200个基因大约只占人类全部基因的1/50。至今已在基因图上定位的基因都是所谓结构基因,因为它们指令旦白质多肽链的氨基酸序列。它们只存在单一拷贝,并按孟德尔定律组合。     

p53介导的凋亡相关基因的研究进展

p5 3是重要的细胞周期调控基因之一 ,在参与维持细胞周期的正常运行中起着重要作用。p5 3基因通过诱导细胞发生 G1 期阻滞修复损伤 DNA和诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞的增殖。在 p5 3基因介导细胞凋亡的通路中 ,有许多已知和未知的相关基因发生作用。本文就 p5 3基因调控细胞凋亡途径的上、下游已知基因作一综述。     

Huntington舞蹈病分子遗传学研究与基因诊断的现状与前景

Huntington舞蹈病(HD)是一种常见的中枢神经系统退行性变疾病,致病基因完全外显。最近Laird提出了一个较为合理的显性花斑位置效应模型,认为HD致病基因的突变是因为邻近的DNA发生改变,影响到其结构基因的活性。并认为X-染色体上的一个隐性多态位点影响着HD突变基因在后代中的表达,表现为亲源性效应。HD连锁标记的研究也取得可喜的进展,大量连锁研究表明它们与HD位点的连锁关系是:D4 S62-D4S10-D4S90-HD-端粒。本文着重介绍了HD分子遗传学研究的进展及HD症状前早期诊断和产前诊断的研究现状及伦理学问题与对策,为HD的基因诊断研究和临床应用提供参考。