微波仪用于犬脾部分切除术断面止血的实验观察

目的　探寻解决脾部分切除术中控制出血的有效方法。方法　采用交叉设计的方法对 8条犬应用微波仪和常规手术行脾部分切除术的对比实验研究 ,记录单位面积切除断面的出血量及手术时间 ,术后即刻、术后 1w及术后 2w取脾标本观察其大体改变及镜下改变。结果　微波术出血量为 2 .73± 1.2 3ml/cm2 ,手术刀常规切除术出血量为 6.4 6± 2 .34ml/cm2 ,两者在统计学上有显著性差异 (P <0 .0 5) ;微波术的平均手术时间为 6.2 7± 1.71min/cm2 ,常规手术的平均手术时间为 6.60± 1.98min/cm2 ,两者在统计学上无明显差异 (P >0 .10 ) ;从术后愈合情况来看 ,尽管微波术在术后 1w内脾断面组织有明显的坏死 ,但 1w后脾组织愈合与常规手术无明显差异。结论　应用微波仪行脾部分切除术具有出血少、止血好、操作方便等优越性 ,可作为临床脾部分切除术的止血方法。     

尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁抗肺癌作用研究

目的 探讨尿胰蛋白酶抑制剂(urinary trypsin inhibitor,UTI)对人肺癌细胞系A549细胞体内外抗肿瘤作用.方法 选用尿胰蛋白酶抑制剂乌司他丁(ulinastatin),设置乌司他丁 0、100、200、400 U/mL四个浓度组及CTX3 μg/mL阳性对照组,采用MTT比色法检测乌司他丁对A549细胞增殖抑制作用,采用侵袭小室法检测乌司他丁对A549细胞的侵袭抑制作用.建立人肺腺癌(A549)细胞裸鼠异种抑制瘤模型,设置乌司他丁 0万单位、2.5万单位、5万单位组、10万单位组及CTX 0.1 g阳性对照组,通过绘制移植瘤生长曲线、统计分析瘤重和肺转移灶,检测乌司他丁对裸鼠体内肺腺癌抑制增殖和转移的作用.结果 增殖抑制率分别为0%、17.82%、25.46%、42.73%、57.46%,显示乌司他丁对人肺癌细胞系A549细胞具有增殖抑制作用;侵袭指数分别为16.44%、13.06%、11.73%、7.63%、8.12%,表明乌司他丁能有效抑制人肺癌细胞系A549细胞的侵袭;瘤重抑制率分别为0%、56.19%、61.11%、68.53%、89.17%;抗肺转移率分别为0%、75.36%、85.51%、90.75%、86.94%,显示乌司他丁能有效抑制裸鼠肺癌移植瘤的生长及转移.结论 乌司他丁对人肺癌细胞系A549细胞具有体内外抗肿瘤作用,该作用表现为抑制肿瘤增殖并突出表现于抑制肿瘤转移.     

骨髓间充质干细胞修复兔皮肤缺损创面的实验研究

目的研究骨髓间充质干细胞(MSCs)参与皮肤缺损创面修复重建表皮的可能性,为组织工程化皮肤提供新的种子细胞来源。方法自体来源的骨髓MSCs应用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后,以Ⅰ型胶原为载体植入兔背部左侧全层皮肤缺损创面(治疗组),右侧全层皮肤缺损创面仅植以Ⅰ型胶原作为对照组。于术后6、12天观察创面收缩率,记录愈合时间;术后4、5周切取创面中央再生皮肤组织,行常规病理和BrdU免疫组织化学染色检测,进行对比研究。结果创面收缩率,治疗组>对照组(P<0.05);愈合时间,治疗组<对照组(P<0.05)。常规病理检测治疗组再生皮肤表皮层明显增厚,细胞数目显著增多;免疫组化检测,在治疗组再生皮肤附件毛囊内层以及表皮基底层、棘层可见BrdU阳性标记细胞。结论骨髓间充质干细胞在全层皮肤缺损创面可能分化为表皮细胞参与表皮重建并具有促进创面愈合的作用。     

TCRP1在口腔鳞癌中介导顺铂耐药的体内实验研究

目的 TCRP1是新近从舌癌耐药细胞系Tca8113/PYM中克隆出来的一个新基因,前期体外实验研究表明TCRP1在口腔鳞癌细胞中能特异地介导对顺铂化疗耐受,本研究将进一步探讨TCRP1在体内实验中介导化疗耐受的作用。方法通过建立TCRP1过/沉默表达裸鼠移植瘤模型,观测TCRP1对化疗药物5-Fu、cDDP的作用敏感性的影响并初步探讨其机制。结果肿瘤生长曲线及肿瘤瘤重结果显示TCRP1能增强裸鼠移植瘤对顺铂的耐药性,而对5-Fu则没有影响。TUNEL检测发现TCRP1高表达的组织中凋亡细胞计数更少。结论 TCRP1是一个新的耐药相关基因,其作用机制与通过增强口腔鳞癌细胞凋亡抗性有关。     

SDF-1、MMP-7在乳腺癌中的表达及相互关系

目的探讨基质细胞衍生因子（SDF-1）、基质金属蛋白酶-7（MMP-7）在乳腺癌中的表达及相互关系。方法采用免疫组化SP法检测50例乳腺癌和33例正常乳腺组织中SDF-1和MMP-7的蛋白表达,并进行相关分析。结果SDF-1、MMP-7在乳腺癌组织中的表达为76％和72％,与正常乳腺组织的表达（33％和27％）比较,差异有显著性（P〈0．01）。其中SDF-1表达在患者肿瘤大小、淋巴转移两项指标上存在组间差异（P〈0．05,P〈0．01）,MMP-7表达在淋巴转移方面存在组间差异（P〈0．01）。SDF-1和MMP-7两种蛋白表达之间存在相关性（P〈0．05）。结论SDF-1和MMP-7在乳腺癌的发生发展中可能有重要协同作用。     

缺氧诱导因子 1α及血管内皮生长因子的表达与胃癌生物学行为的关系

目的探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达及其与临床病理因素的关系. 方法对48例手术切除后的胃癌标本进行连续切片和HIF-1α、VEGF免疫组织化学检测. 结果 HIF-1α蛋白呈高表达,阳性率为66.7%,VEGF阳性表达率为60.4% .HIF-1α、VEGF与胃癌的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期密切相关,VEGF阳性表达与HIF-1α阳性表达程度呈正相关. 结论胃癌组织中VEGF的表达依赖于HIF-1α;HIF-1α及VEGF过表达与胃癌的不良生物学行为有关,可能成为预测胃癌侵袭转移的重要指标.     

缺氧诱导因子的表达与胃癌血管生成关系的研究

目的探讨缺氧诱导因子(HIF-1α)的表达与胃癌组织中血管生成的相互关系。方法对48例手术切除后的胃癌标本进行连续切片和HIF-1α、VEGF蛋白的免疫组织化学检测,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并计数微血管密度(MVD)。结果在48例胃癌组织中,HIF-1α阳性表达32例(66.7%),VEGF阳性表达29例(60.4%),胃癌组织的MVD值为42.5土14.7,均与正常胃黏膜组比较,差异有显著性。HIF-1α的表达与VEGF的表达、MVD值呈正相关。结论HIF-1/αVEGF通路在胃癌血管生成过程中起重要作用。     

微小RNA-218在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的:检测微小RNA-218(microRNA-218,miR-218)在鼻咽癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义.方法:收集鼻咽癌活检组织标本54例,同时以35例正常及慢性炎性反应鼻咽黏膜活检组织作为对照,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RFQ-PCR)法检测鼻咽癌组织及对照组织中miR-218的表达情况,分析miR-218表达水平与鼻咽癌临床病理参数之间的关系,以及与患者预后的关系.结果:与对照鼻咽黏膜组织相比,miR-218在鼻咽癌组织中的表达水平普遍下调.鼻咽癌组织中miR-218平均表达量明显低于对照鼻咽上皮组织,差异有统计学意义(P=0.000).miR-218表达水平在低分化鼻咽癌组织明显低于高/中分化鼻咽癌(P=0.032),临床Ⅲ/Ⅳ期鼻咽癌组织明显低于临床Ⅰ/Ⅱ期鼻咽癌(P=0.007),有转移的鼻咽癌组织明显低于无淋巴结转移的鼻咽癌(P=0.019).Kaplan-Meier生存分析发现,miR-218表达水平越高,患者生存时间越长(P＜0.05).结论:miR-218与鼻咽癌的发生、临床进展及预后密切相关,它可能成为鼻咽癌新的潜在的治疗靶点及诊断预后分子标志物.     

miR-216b通过靶向调控蛋白激酶Cα基因的表达抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭

目的 明确miR-216b是否通过靶向调控蛋白激酶Cα(PKCα)基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭.方法 构建PKCα 3'非编码区(UTR)-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告系统检测miR-216b对PKCα 3'UTR-荧光素酶活性的影响.将miR-216b模拟物转染鼻咽癌细胞CNE2,采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测PKCα mRNA和蛋白的表达水平.将PKCαsiRNA转染CNE2细胞,通过MTS细胞增殖实验和Transwell侵袭实验观察PKCα基因表达下调对CNE2细胞增殖和侵袭的影响.将PKCα重组质粒与miR-216b模拟物共转染CNE2细胞,通过MTS细胞增殖实验检测CNE2细胞的增殖能力.结果 双荧光素酶报告检测结果显示,miR-216b能特异性地与PKCα mRNA的3'UTR结合,下调荧光素酶活性,其活性约为转染对照模拟物细胞的62.4％.过表达miR-216b的CNE2细胞中PKCα mRNA和蛋白的表达水平均降低,与对照细胞比较,分别降低49.1％和55.7％.siRNA干扰PKCα表达能抑制CNE2细胞的增殖和侵袭能力,能部分模拟miR-216b的抑瘤功能.过表达PKCα能部分逆转miR-216b对CNE2细胞的增殖抑制作用.结论 miR-216b通过靶向调控PKCα基因的表达来抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭.     

p16蛋白和VEGF在乳腺癌组织中的表达及相关性研究

 目的　探讨 p16蛋白、VEGF在乳腺癌组织中的表达及其相关性。 方法　采用SABC免疫组化技术 ,检测 5 3例乳腺癌标本中p16蛋白及VEGF的表达。结果　p16蛋白、VEGF的阳性表达率分别为5 4 .7%和 79.2 5 % ,其表达均与患者的年龄、肿瘤大小、绝经状况、ER、PR的表达无关 (P >0 .0 5 ) ,p16蛋白的表达与乳腺癌的组织学分级、TNM分期及淋巴结转移呈负相关 (P <0 .0 5 ) ;VEGF的表达则与组织学分级及淋巴结转移密切相关 (P <0 .0 5 )。结论　p16蛋白与VEGF在乳腺癌中的表达具有相关性 ,两者在乳腺癌的发生、发展中可能起协同作用 ,并可作为判断乳腺癌生物学行为的有用指标。