干扰素-γ受体1部分缺陷病临床及分子特征分析

目的本研究纳入1例8月龄时发生播散性卡介苗病的女性患儿,旨在探讨IFNGR1缺陷病的临床及分子特征。方法总结1例常染色体显性遗传IFNGR1部分缺陷病患儿临床资料,Q-RT-PCR检测IL-12-IFN-γ轴功能,流式细胞术检测PHA刺激的T细胞表面IFNGR1蛋白表达,Sanger测序法分析IFNGR1基因。结果患儿常规免疫功能无异常。患儿抗凝血经BCG+rhIFN-γ同时刺激后IL-12B的表达水平比单独使用BCG刺激略有增加(P0.05),但较健康对照显著降低(P0.05);IFNGR1蛋白表达高于健康对照。基因测序发现患儿IFNGR1第6外显子存在c.819_822del4(p.N274Hfs*2)杂合突变,父母均无此突变。结论常染色体显性遗传IFNGR1基因部分缺陷病极为罕见,易发生播散性分枝杆菌感染,应尽早检测IL-12-IFN-γ轴功能、相关蛋白表达并行基因分析确诊。     

先天性心脏病患儿血清甲状旁腺素水平观察

目的探讨先天性心脏病(CHD)患儿甲状旁腺功能。方法用放射免疫法(IRMA)测定18例学龄前期CHD患儿血清甲状旁腺素(parathyrin,PTH)水平,并测定其血清Ca2 、Mg2 浓度;17例门诊体检的健康儿童作为对照。结果CHD患儿血清PTH水平(14.87±6.02ng/L)较对照组(19.68±5.76ng/L)明显降低,两者比较差异有显著性(P<0.05),CHD组中有8例(44.4%)患儿血清PTH<10ng/L,而对照组均高于10ng/L;CHD患儿血清Ca2 和Mg2 较对照组略低,但无统计学意义(P>0.05)。结论CHD患儿甲状旁腺素分泌不足,存在亚临床甲状旁腺功能低下。     

IL—12对新生IFN—γ产生的影响

白细胞介素１２（ＩＬ－１２）是一种重要的细胞因子，由单核／巨噬细胞，Ｂ细胞产生，诱导Ｔ细胞和ＮＫ细胞产生γ干扰素（ＩＦＮ－γ）在细胞免疫反应发挥多种作用，新生儿产生ＩＬ－１２的能力鲜见报道，本用逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）方法检测８例新生儿脐血单个核细胞（ＣＢＭＣ）ＩＬ－１２Ｐ４０ｍＲＮＡ和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，及ＥＬＩＳＡ法新生儿ＣＢＭＣ培养上清ＩＦＮ－γ浓度；并观察重组ＩＬ－１２     

BALB/c鼠和裸鼠呼吸道合胞病毒感染比较研究

目的 比较普通BALB/c鼠和裸鼠呼吸道合胞病毒(RSV)感染免疫及炎症反应特点.方法 BALB/c鼠和裸鼠感染RSV后不同时间空斑形成试验检测肺组织病毒滴度,计数支气管肺泡灌洗液(BALF)白细胞总数和分类,HE染色分析肺组织病理学改变,免疫组化检测肺组织F4/80+细胞和CD49b+细胞.ELISA检测BALF中TNF-α、IFN-r、IL-12和IL-10浓度.结果 BALB/c鼠和裸鼠感染RSV后肺组织病毒滴度在第3天达峰值,感染裸鼠带毒时间更长,在感染后各天病毒滴度明显高于BALB/c鼠(P＜0.05),肺组织病理改变也更重.感染BALB/c鼠和裸鼠BALF白细胞总数明显升高,分类以淋巴细胞为主.感染裸鼠与感染BALB/c鼠比较,肺组织检测到更多的F4/80+巨噬细胞和CD49b+NK细胞(P＜0.05),BALF中TNF-α、IL-12和IL-10水平更高(P＜0.05).结论 RSV感染裸鼠与BALB/c鼠比较,病毒复制水平更高,时间更持久,炎症反应更重.单核巨噬细胞和NK细胞是RSV感染重要的免疫细胞和炎症细胞,炎症反应强度并不一定与T细胞免疫应答平行.     

外源性IL-4基因表达对K562细胞增殖及死亡的影响

目的：观察外源性ＩＬ－４对Ｋ５６２增殖及死亡的影响。方法：用逆转录病毒载体将ＩＬ－４ｃＤＮＡ导入Ｋ５６２细胞,检测其增殖反应,用流式细胞依及ＤＮＡ片段凝胶电泳检测细胞增殖周期及凋亡情况,用台盼蓝排除法计数死亡细胞。结果：高表达ＩＬ－４的Ｋ５６２细胞增殖反应明显低于表达株。亲代Ｋ５６２株;前者２过程中死亡细胞百分率明显升高且可被ＩＬ－４单克隆抗体阻断,但其自发凋亡细胞数及增殖周期均无改变。结论Ｌ：外     

小发卡RNA抗呼吸道合胞病毒效应的研究

目的 为从基因水平抑制呼吸道合胞病毒（respiratory syncytial virus，RSV）的复制，针对RSV的M2-2基因构建小发卡结构状RNA（short hairpin RNA，shRNA）重组质粒，在细胞水平观察shRNA对RSV复制的影响。方法 将成功构建的针对RSV M2-2基因的重组质粒pshRNA8260转染HEp-2细胞，利用光镜观察pshRNA8260对RSV致HEp-2细胞病变效应（cytopathogenic effect，CPE）的影响并计算CPE抑制率，空斑形成实验检测RSV滴度变化。结果 成功构建了针对人RSV M2-2基因mRNA的pshRNA8260重组质粒，研究发现pshRNA8260能明显改善RSV所致的病变效应，降低RSV在细胞内复制的病毒滴度。结论 针对RSV M2-2基因的pshRNA82（g）重组质粒具有明显的特异性抗RSV效应的作用。     

先天性心脏病患儿的免疫功能状态

目的：先天性心脏疾病(CHD)患儿易发生感染,有作者认为CHD可能是DiGeorge综合征(DGS)的一部分,CHD患儿对感染的易感性与其存在不同程度的免疫缺陷有关。本文探讨CHD患儿有无免疫功能缺陷,结合文献讨论CHD与DGS的关系。方法：通过胸部X片回顾性观察因患肺炎而住院的72例单纯性和34例复杂性CHD新生儿胸腺影的大小,50例同日龄肺炎新生儿作为对照。检测28例学龄前期CHD患儿外周血淋巴细胞亚群、淋巴细胞增殖功能及外周血单个核细胞(PBMC)白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)mRNA表达情况及培养上清中IL-4和IFN-γ水平,血浆IgG、IgA、IgM及C3水平。20例同年龄健康儿童作为对照。结果：所有新生儿胸片均可见到胸腺影,单纯性和复杂性CHD新生儿胸腺影大小与肺炎新生儿比较差异均无显著性(P>0.05);学龄前期CHD患儿外周血CD3+,CD4+,CD8+,CD19+及CD16+CD56+T细胞和CD4+/CD8+与对照组差异无显著性(P>0.05);血浆免疫球蛋白及C3水平与对照组比,差异也无显著性(P>0.05);PBMC加植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)刺激后的每分钟脉冲数、PBMC培养上清中IL-4,IFN-γ水平和mRNA表达与对照组比较差异无显著性(P均>0.05)。结论：并非所有CHD患儿均伴有胸腺发育不全或免疫功能缺陷,CHD患儿易感染不一定是先天性免疫功能低下的表现。     

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目的分析儿童静脉注射免疫球蛋白(IVIG)不敏感川崎病的临床特点。方法对2005-01—2005-12在重庆医科大学儿童医院住院的233例川崎病的患儿进行病例回顾性分析。结果IVIG不敏感川崎病共31例(占13.3%)。IVIG不敏感川崎病中男女性别比为4.17∶1,明显高于IVIG敏感川崎病1.43∶1(P<0.05)。两组川崎病年龄构成差异无显著性(P>0.05)。IVIG不敏感川崎病中有中度以上冠状动脉扩张或冠状动脉瘤者6例(6/31,19.4%),明显高于IVIG敏感川崎病(5/202,2.4%)(P<0.05)。川崎病患儿发生IVIG耐药的可能危险因素有外周血白细胞、中性粒细胞比例、血红蛋白、C反应蛋白、血沉、血浆白蛋白、乳酸脱氢酶等,分析结果提示血浆白蛋白降低及男性可能与IVIG不敏感川崎病有关,但仅此两项指标尚不能预测IVIG不敏感川崎病的发生。IVIG不敏感川崎病冠脉病变发生危险因素无阳性发现。IVIG不敏感川崎病患儿中14例通过复用IVIG后临床症状得以缓解,仅8例在复用IVIG后症状仍不能控制而加用激素治疗。结论IVIG不敏感川崎病并不少见且较IVIG敏感川崎病更易发生较严重冠状动脉病变,川崎病患儿发生IVIG耐药及IVIG不敏感川崎病冠脉病变发生的危险因素不肯定。复用IVIG及必要时在抗凝基础上加用激素对IVIG不敏感川崎病治疗有较好疗效。     

白细胞介素-27基因多态性与结核病易感性的关系

目的：探讨重庆地区汉族人群白细胞介素-27（IL-27）基因多态性与结核病易感性的关系.方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态（PCR-RFLP）和序列特异性引物多聚酶链反应（PCR-SSP）分析385例结核病患者和391例健康对照的IL-27基因的-964A/G和2905T/G位点多态性,统计分析基因多态性与结核病易感性的关系.结果：IL-27基因-964位点存在A、G二态性,表现为AA纯合、GG纯合、AG杂合三种基因型,2905位点存在T、G二态性,表现为TT纯合、GG纯合、TG杂合三种基因型.IL-27基因的-964A/G位等位基因和基因型分布频率分别在结核组与对照组间的差异均有统计学意义（P〈0.05）,结核组的等位基因A频率（66.4%）明显高于对照组（59.1%）（χ2=8.80,P=0.003）,结核组AA基因型频率（48.1%）明显高于对照组（38.1%）（χ2=7.83,P=0.005）.-964A/G位等位基因和基因型分布频率在结核菌阳性患者组与结核菌阴性患者组间的差异亦有统计学意义（P〈0.05）,结核菌阳性组的A等位基因频率（70.8%）明显高于结核菌阴性组（61.1%）（χ2=8.11,P=0.004）.2905T/G位基因型和等位基因分布频率在结核组与对照组间差异无统计学意义.结论：IL-27基因-964A/G多态性与结核病易感性相关,携带-964A等位基因的人群更易患结核病,结核分枝杆菌阳性率高,而2905位T/G多态性与结核病易感性无明显相关性.     

自身免疫性疾病与免疫缺陷病的分子生物学基础

免疫系统的功能包括识别自身、排除异己。Ｔ淋巴细胞在免疫反应过程中具有重要作用。正常情况下 ,Ｔ细胞只对非自身抗原进行排斥 ,以维持机体的稳定。在某些情况下 ,免疫系统自身耐受性遭受破坏 ,或外来抗原与自身抗原的分子模拟 ,使机体对自身抗原建立起免疫反应 ,或在消灭外来抗原的同时 ,对自身组织成分产生明显的免疫应答反应 ,造成自身组织损伤和相应的功能障碍 ,称自身免疫性疾病 (ＡＤ)。ＡＤ与免疫缺陷病关系密切 ,是原发性免疫缺陷病 (ＰＩＤ)的常见临床表现。已发现多数原发性免疫缺陷病为单基因遗传性疾病 ,而ＡＤ为多基因遗传性…