献血者与血液透析患者TT病毒感染调查

目的 了解TTV在广东地区献血者与血液透析人群中的感染情况。方法 应用半巢式PCR对南方医院输血中心1998年注册的献血者与血液透析中心维持性血液透析病人进行TTV感染调查。结果 在103例献血者中有20例检出TTV，检出率为19％；86例血液透析病人中有48例检出TTV，检出率为55．8％。结论 我国献血者中存在较高的TTV感染率，血液透析病人中TTV感染率远远高于献血者，透析器污染和使用血制品可能是原因。     

献血者中TTV检测及新基因型鉴定

目的 :了解TTV在广东地区献血者人群中感染情况。方法 :应用半巢式PCR和克隆测序对南方医院输血中心 1998年初注册的献血者进行TTV感染调查和病毒基因序列分析。结果 :在 10 3名献血者中有 2 0名检测出TTV ,检出率为 19%。用自动测序仪测序得到的TTV序列片段 (1915～ 2 185核苷酸片段 )与通过互连网下载的基因TTV日本株比较 ,同源性在 6 6 8%～ 99.3%。结论 :我国献血者中存在较高的TTV感染率 ,所分离到的两毒株可能为国内一种新的TTV基因亚型 G2c型。     

肺炎衣原体荧光PCR检测方法的建立和应用

目的采用Taqman探针技术,组建肺炎支原体荧光PCR基因检测方法。方法对GenBank登录的肺炎衣原体的基因序列进行生物信息学分析,针对保守区域设计引物和探针,组建实时荧光PCR检测方法。对来自本院的560份临床咽拭子样本和肺泡冲洗液样本进行检测。采用流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒进行特异性评价。结果本实时荧光PCR方法对甲型流感病毒(甲型、乙型)、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒无特异性反应。本院的临床样本检出26份,其中咽拭子9份,肺泡冲洗液17份。结论肺炎支原体荧光PCR检测方法可用于肺炎衣原体感染的辅助诊断。     

幽门螺杆菌NCTC11639基因hpaA的克隆表达及鉴定

目的获取幽门螺杆菌（Hp）hpaA基因的序列。预测其编码蛋白hpaA作为候选疫苗的可行性。在大肠杆菌表达系统中表达hpaA。方法提取Hp标准株NCTC11639的基因组DNA。使用PCR扩增hpaA基因。克隆入pGEM—T载体中测序。并进行同源性分析。将hpaA克隆入表达载体pGEX-4T-1中，诱导表达。SDS-PAGE电泳鉴定。结果同源性分析表明hpaA具有很高的保守性，成功构建出可以高效、分泌型表达hpaA的原核表达系统。结论hpaA具有高保守性，在Hp各菌株中普遍存在，是有良好应用前景的Hp候选疫苗。     

乙肝患者血清前S1、前S2抗原的检测及临床意义

采用ELISA法检测500例乙肝患者和120例健康体检者乙肝血清标志物(HBV M)、PreS1、PreS2抗原;采用PCR法检测HBV DNA.发现500例HBsAg阳性患者中,PreS1总阳性率为73.2%,PreS2总阳性率为72.2%;HBeAg( )的各组中PreS1、PreS2抗原的阳性率均显著高于HBeAg(-)的各组;PreS1、PreS2抗原在HBV DNA( )组中的检出率分别高于HBV DNA(-)组.认为PreS1、PreS2抗原与HBeAg具有很好的一致性,与HBV病毒颗粒密切相关,具有重要的诊断价值.     

肾移植术后排斥反应与巨细胞病毒感染有关

目的 :探讨巨细胞病毒 (CMV)感染在肾移植术后的发生率及CMV感染与排斥反应的关系。方法 :检测2 0 8例肾移植受者术后CMVDNA和 48例肾移植受者血清CMVIgM、IgG抗体。并定期复查CMVDNA ,对CMVDNA阳性的患者给予抗病毒治疗。结果 :术后CMVDNA阳性受者急性排斥反应的发生率增加 ,经抗CMV治疗 ,则排斥反应减少。结论 :预防和治疗CMV感染的重要性     

外周血树突状细胞与HBV慢性感染的研究进展

树突状细胞（dendritic cell，DC）是起源于骨髓的专职抗原递呈细胞（antigen presenting cell，APC），具有启动T细胞介导的免疫应答功能，因其表面具有众多树突状突起而得名，由美国学者Steinman及Cohn于1973年发现。自从Romani等建立了应用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte-macrophage colony—stimulating factor，rhGM-CSF）和重组人白介素-4（rhIL-4）从人外周血大规模培养制备DC的方法后，人们又建立并完善了多种培养扩增DC的方法，这使得对DC的研究得以深入。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性分析及相关耐药基因的检测

[目的]了解耐甲氧西林金黄色葡萄球茵(MRSA)的耐药性及相关耐药基因的存在状况.[方法]采用纸片扩散法对56株MRSA进行11种抗茵药物敏感性测定,采用PCR法检测相关耐药基因mecA基因和ermB基因.[结果]所有菌株对万古霉素均敏感;对青霉素G、苯唑西林普遍耐药;对红霉素、阿奇霉素、复方新诺明、环丙沙星也表现出很高的耐药性,耐药率达90%以上;对阿米卡星、庆大霉素、呋喃妥因和利福平的耐药率分剐为46.4%、83.9%、5.3%和55.4%.mecA基因和ermB基因的阳性率分别为100%和78.6%.[结论]临床分离的MRSA多重耐药性十分严重,相关耐药基因表达率高,应引起临床重视.     

呼吸道合胞病毒抗原酶联免疫吸附测定检测方法的建立及应用

目的建它呼吸道合胞病毒抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,应用其对来源于本院的临床样本进行检测.方法建立ELISA方法,检测标本中的呼吸道合胞病毒,与呼吸道合胞病毒细胞培养检测方法进行对照,并利用该方法进行该病毒2007年在广州市的流行性分析.结果本方法的灵敏度略高于呼吸道合胞病毒的细胞培养检测方法,对甲型流感病毒(H3N2亚型、H1N1亚型)、乙型流感病毒、副流感病毒(Ⅰ型、Ⅲ型)、呼吸道腺病毒(Ⅲ型、Ⅶ型)无特异性反应.结论本呼吸道合胞病毒抗原ELISA检测方法可用于呼吸道合胞病毒感染的临床诊断和鉴别诊断.     

利用亚细胞组分蛋白分离技术有效提取细胞骨架及其相关蛋白

目的建立一种可用于后续双向电泳研究的细胞骨架及相关蛋白的提取方法。方法采用亚细胞组分蛋白分步提取方法,
根据提取过程中细胞形态变化,提取后组分蛋白电泳图谱等优化提取条件。用双向凝胶电泳、免疫印迹分析、蛋白质点质谱鉴
定等方法验证该提取方法的重复性和各组分蛋白提取纯度。结果各组分蛋白的双向电泳蛋白图谱差异明显,具备各自特征性
的蛋白点分布,各组分标志蛋白FAK、Integrin-β1、Histone H1和cytokeratin 19分别只表达在细胞浆、细胞膜、细胞核和细胞骨架
组分。细胞骨架蛋白组分中约90%以上的蛋白质点经质谱鉴定为细胞骨架及相关蛋白。结论亚细胞组分蛋白顺序提取方法
具有较好的重复性,提取组分选择性较高,并且能够有效提高低丰度蛋白的检出效率,是一种比较理想的进行蛋白质组学研究
的样本预处理方法。