小鼠脐带间充质干细胞的体外诱导分化

目的分离扩增小鼠脐带间充质干细胞（mouse umbilical cord mesenchymal stem cells,mUCMSCs）探讨其是否可诱导成软骨、脂肪和成骨细胞。方法 通过贴壁培养法将mUCMSCs体外分离、扩增、纯化,倒置显微镜下观察细胞的形态特征,运用流式细胞仪检测分析细胞的抗原标志表达进行鉴定。运用诱导培养液对分离的mUCMSCs分别定向诱导培养为软骨、脂肪和成骨细胞。结果 运用组织贴块培养法可从新鲜脐带中分离到贴壁生长的成纤维样细胞,这些细胞高表达CD29、CD90和CD105,低表达CD34。成软骨诱导后阿新兰染色呈蓝色;成脂诱导后油红O染色,出现红色脂滴;茜红素染色成骨诱导的mUCMSC,可见红色结节。结论 贴壁培养法分离培养所获得的mUCMSCs在体外可诱导分化为软骨、脂肪和成骨细胞。     

节能型实验动物屏障设施的新型设计及应用

随着国内、外实验动物的发展,屏障设施的建立和应用越来越广泛。因此,许多单位投入大量资金搞硬件建设,但对设施运行后的节能考虑较少。目前,国内屏障设施的设计多采用分区控制、变频风机、换热器等来考虑节能,但在送、回风形式上并未改变传统的顶送风、四角回风形式,该送、回风形式由于受到平板饲养架的限制,设计上房间的换气次数多为15-20次/h,实际上动物饲养笼内的换气次数远远低于房间的换气次数,不能有效的保证笼内换气。本作者根据国内、外实验动物设施发展趋势,创新研制出定向流系统（已获得实用新型专利证书,专利号：ZL200520069682.8）饲养动物,同时采用动物饲养系统和房间送、回系统分开控制进行节能设计,有效的保证动物笼内换气和节能。该设计为国内首创,应用本设计夏季可节电47.4 kW.h,按工业用电0.8元/h计算,每小时节约运行成本近38元。     

比格犬一种新雌激素β受体可变剪切体的克隆及鉴定

目的对比格犬雌激素β受体的新剪切体进行克隆与鉴定。方法以比格犬垂体组织为模板,用RT-PCR方法从垂体组织中扩增雌激素β受体,电泳确定新剪切体的存在情况.并对其进行克隆和序列测定.结果利用设计的引物得到2条明显电泳条带,通过测序表明其中一种为新的可变剪切体,目前此可变剪切体尚未见报道。结论得到了雌激素β受体的一种新的可变剪切体,有助于研究雌激素β受体可变剪切体的功能及其在生殖调控过程中的作用。     

产肠毒素大肠杆菌快速检测方法的建立和评价

目的 利用环介导等温扩增（LAMP）技术,建立产肠毒素大肠杆菌（ETEC）的快速、便捷、敏感、特异的检测方法,并对该方法的特异性和敏感性进行评价,为实验动物检测和细菌性腹泻的诊断提供技术支持。方法 根据GenBank公布的产肠毒素大肠杆菌的LT毒素基因序列（S60731.1）设计外引物和内引物进行LAMP扩增,对LAMP特异性和敏感性与PCR方法做比较。结果 建立的LAMP方法检测限为100pg,灵敏度是PCR的10倍以上并具有较高的特异性,利用该方法对27份猴腹泻样品进行LAMP和PCR方法检测, LAMP（60min内）检测结果与PCR符合率为100%,而LAMP（90分钟内）检测敏感性高于PCR。结论 建立了一种用于检测肠毒性大肠杆菌（ETEC）的LAMP检测方法,该方法特异性强,灵敏度高,方便快捷,适合于ETEC临床快速检测。     

黑线仓鼠及其白化突变系血液生理生化值的测定与分析

目的 测定黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化参数,比较两者的差异,为医学实验研究提供参考.方法 用眼球取血的方法采集动物全血,分别制备抗凝血和血清,应用全自动生化分析仪和全自动血细胞分析仪进行测定.用SPSS10.0软件包对测定结果进行分析.结果 测定了黑线仓鼠及其白化突变系的血液生理生化正常值范围,并与其它动物的数据进行了比较.结论 确定了黑线仓鼠与其白化突变系的血液生理生化正常值范围,两者在多项指标上存在差异.而且,黑线仓鼠及其白化突变系的血小板计数均高于小鼠,约高出3倍,这一差异可能有利于两者作为血液凝集实验模型的研究.     

实验动物许可证管理现状分析

随着生命科学研究的发展,我国实验动物科学进入快速发展时期,加强实验动物行业的规范化管理彰显重要。实验动物许可证管理是实验动物工作规范化、科学化管理的重要组成部分,同时也是推进实验动物学科发展的重要途径。随着国家实验动物立法和各省市对实验动物的配套立法等工作,促进了实验动物行业的有序发展,加强实验动物许可证的有效管理,对于促进我国实验动物的产业化和规范国家实验动物管理发挥了重要的推动与保障作用。本文对我国实验动物许可证管理现状进行分析,以对实验动物管理工作提供参考。     

激素所致并发症 X 线观察

应用激素治疗某些疾病常可引起一些并发症,已引起国内外的注意。X 线检查对于确定病变部位、观察病情进展有一定价值,现将临床应用激素所致并发症9例的 X 线检查所见报告如下。临床资料本组9例,男4例,女5例;发病年龄最小者19岁,最大者62岁,7例在40～50岁之间。9例中,5例既往患风湿热和类风湿性关节炎,1例患剥脱性皮炎,1例患雷诺氏病,1例患系统性红斑狼疮,1例原患肝炎;从用激素到出现并发症,最短者1个月,最长者6年。本组多为混合用药,即可的松、强的松、氟美松等并用,用药总计量1000毫克2例,10000～64000毫克6例,1例用量不详。     

巴贝西虫感染黑线仓鼠生物学特性的变化

目的建立巴贝西虫感染的黑线仓鼠模型,明确感染后黑线仓鼠生物学特性的变化规律,为巴贝西虫病的检测与防治提供基础数据资料。方法腹腔注射含巴贝西虫的血液感染黑线仓鼠,感染的第0、2、4、6、8、10、12、14、16、23、30、37天每次取5只动物采集抗凝血和全血,制备血涂片,通过吉姆萨染色检测虫体繁殖情况;分离血液总DNA,用REAL-TIME PCR检测巴贝西虫的在宿主体内的繁殖规律;用全自动生理生化检测仪测定血液生理生化指标;处死动物后分别采集心、肝、脾、肺、肾等器官,称重测定脏器系数;用ELISA法检测感染动物血清中IL-2浓度。结果感染后第4天黑线仓鼠体内的巴贝西虫数量最多,之后整体呈下降趋势,在第12天有一个短暂升高。感染动物的脏器系数变化最大的属于肝脏和脾脏,心、肺和肾脏系数在整个感染期内稍有波,均在正常值范围内。感染动物的血细胞均有波动,在第10、23天两次达峰值,其中白细胞变化最为剧烈;检测到变化的血液生化指标在第12天达峰值。感染动物血清中的IL-2在第10天达峰值,之后连续下降。结论感染巴贝西虫的黑线仓鼠具有典型的蜱传寄生虫病特点,病原侵入一周内达繁殖顶峰,且病原可在宿主体内长期潜伏。宿主免疫响应在第2周达到峰值,与免疫相关的脏器及血细胞有明显的应激反应。据此,可有针对性的开展巴贝西虫病的诊断与防治。     

中国人民解放军第九届实验动物学专业委员会第一次委员会议在重庆召开

经中国人民解放军总后勤部卫生部批准,9月20日至22日解放军第九届实验动物学专业委员会第一次全体委员会议在重庆召开。会议由解放军实验动物学专业委员会主办,第三军医大学承办,是军队实验动物学专业委员会换届后召开的首次会议,来自全军30个单位的42名同志参加了会议。     

环介导等温扩增技术的研究进展和微生物检测应用

环介导等温扩增（Loop-mediated isothermal amplification, LAMP）是一种新型的核酸扩增技术。本文概述其反应原理、技术特点、相关技术、微生物检测应用及发展前景。