2型糖尿病患者载脂蛋白E基因多态性的研究

目的：探讨中国人2型糖尿病患者载脂蛋白E（apoE)基因多态性及其与血脂和载脂蛋白水平的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性酶切片段长度多态性法，分别对74例2型糖尿病患者及191例血脂、血糖正常且无糖尿病史者的apoE基因型、空腹血脂及载脂蛋白AI、AⅡ、B100、CⅡ、CⅢ及E进行全面分析。结果：2型糖尿病患者的血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC），低密度脂蛋白胆固醇（LDLC），非高密度脂蛋白胆固醇（nHDLC),载脂蛋白B100、CⅡ、CⅢ、E水平及TG／HDLC比值较对照组显著升高（P＜0．01）；血清高密度脂蛋白胆固醇（HDLC），apoE/apoCⅢ比值显著降低（P＜0．05）。2型糖尿病组与对照组apoE基因频率分布无显著性差异（P＞0．05）。携带ε2等位基因组血清TG／HDLC比值较E3／3基因型显著降低；而携带ε4等位基因组血清apoAⅡ水平较E3／3基因型及携带ε2等位基因组显著升高（P＜0．001）。结论：2型糖尿病患者apoE基因多态性与血TG／HDLC及apoAⅡ有一定关联。     

内源性高甘油三酯血症患者血浆VLDL、LDL及HDL对血凝的影响

目的：研究内源性高甘油三酯血症(HTG)患血浆极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)是否发生了氧化修饰及其对血凝的影响。方法：对2l例内源性高甘油三酯血症患与2l例年龄性别相近的正常人的血脂、脂质过氧化物进行了分析。用一次性密度梯度超速离心法分离血浆VLDL、LDL及HDL，测定这三种脂蛋白的234nm光吸收、相对电泳迁移率(REM)和硫代巴比妥酸反应物质(TBARS)，分别将这三种脂蛋白加入由正常人新鲜混合血浆构成的反应系统中，按试剂盒分别测定凝血酶原时间(PT)及活化部分凝血酶原时间(APIT)。结果：内源性HTG患血浆TG含量平均升高2．73倍，HDLC下降l.7l倍，同时LPO升高1．22倍;HTG组VLDL、LDL及HDL的REM、234nm光吸收值、TBARS含量均较对照组显增加(P＜0．01)，表明内源性HTG患血浆VLDL、LDL及LDL均发生了氧化修饰生成Ox—VLDL、Ox-LDL.PT及APTT在分别加入HTG组的VLDL、LDL及HDL后均比加入相应正常组脂蛋白明显缩短(P均＜0．05)。相关分析表明，HTG组血浆VLDL及HDL相对电泳迁移率(REM)与PT呈负相关(P＜0．01)。结论：HTG患血浆VLDL、LDL及HDL发生了氧化修饰，并使PT及APTT明显缩短。     

微电场通过活化黏着斑激酶信号通路促进缺氧条件下绒毛外滋养细胞的迁移/侵袭

摘要:目的：探讨微电场刺激及缺氧条件对黏着斑激酶（FAK）信号通路的作用及对人胎盘绒毛外滋养细胞系HTR-8/SVneo迁移/侵袭的影响。 方法：划痕实验分析绒毛外滋养细胞在缺氧条件下的迁移情况;western blot检测微电场刺激后绒毛外滋养细胞FAK Tyr397和pY576/577位点及其下游柱蛋白（paxillin）分子磷酸化水平,并检测微电场刺激5、10 h后HTR-8/SVneo细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达水平;2、5、10 μmol/L FAK抑制剂PF-573228处理HTR-8/SVneo细胞后观察细胞行为,并用western blot检测其MMP 2的表达水平。 结果：微电场刺激能改善缺氧条件下HTR-8/SVneo细胞的迁移速度;与对照组比较,缺氧条件下微电场刺激可促使FAK-Tyr397位点磷酸化水平及paxillin分子表达水平明显升高（P均<0.05）,而pY576/577位点则无明显改变;经微电场刺激5、10 h后,HTR-8/SVneo细胞MMP-2表达水平均升高（P均<0.05）;经FAK抑制剂处理后,HTR-8/SVneo细胞对微电场的应答反应明显受抑制,其MMP-2表达水平降低。 结论：微电场可能通过活化FAK信号通路促进缺氧培养绒毛外滋养细胞的迁移/侵袭。     

异鼠李素及橙皮甙抑制LDL氧化修饰作用的研究

目的:研究黄酮类中药异鼠李素及橙皮甙是否具有抑制LDL氧化修饰的作用。方法:按一次性密度梯度超速离心法分离人血清LDL,分别加入5.0μmol/L异鼠李素及橙皮甙与LDL温育3 h,然后利用Cu2 介导体外氧化修饰脂蛋白的方法,观察LDL氧化修饰不同时间,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基的动力学改变,并与对照组比较。结果:Cu2 介导LDL氧化修饰时,在2、4、6、8、12及24 h后,其A234、REM、TBARS及蛋白质羰基含量均逐步增加;加入5.0μmol/L异鼠李素及橙皮甙的实验组,Cu2 LDL的氧化修饰分别延迟2~4 h和2 h,其A234、REM、TBARS及载脂蛋白羰基含量较对照组降低;异鼠李素实验组分别较对照组降低23.5%~40.4%、20.5%~37.7%、18.6%~30.3%及20.1%~52.4%(P<0.001);橙皮甙实验组分别降低11.1%~21.2%、9.2%~28.3%、13.7%~21.3%及5.0%~43.8%(P<0.001,P<0.01,P<0.001及P<0.05)。结论:异鼠李素及橙皮甙均可抑制Cu2 诱导的LDL的氧化修饰,且异鼠李素的抗氧化作用较及橙皮甙强。     

成都地区重度子痫前期患者雌激素受体α基因PvuⅡ和XbaⅠ多态性的研究

目的 探讨雌激素受体αa(estrogen receptor,ESRa)基因变异是否与重度子痫前期发病有关联.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法对成都地区131例重度子痫前期患者和223名健康孕妇ESRα基因PvuⅡ和XbaⅠ多态性进行分析.结果 ESRα基因PvuⅡ位点T、C等位基因的频率在重度子痫前期组为0.580、0.420.在正常孕妇组为0.576、0.424;Xba Ⅰ位点A、G等位基因的频率在重度子痫前期组为0.763、0.237,在正常孕妇组为0.807、0.193.上述位点在两组间等位基因的频率差异均无统计学意义(P＞0.05).经调整年龄和体重指数因素后,正常孕妇组PvuⅡ位点T等位基因携带者(TT或TC基因型者)收缩压水平显著高于CC纯合型者[(114.00±1.44)mmHg或(114.33±1.21)mmHg vs(108.62土1.91)mmHg,P＜0.05];未见重度子痫前期组该位点对血压水平存在影响.也未见正常孕妇组和患者组Xba Ⅰ位点与血压水平有关联.结论 ESRa基因PvuⅡ和Xba Ⅰ多态性与成都地区汉族人重度子痫前期的发病无关联,但Pvu Ⅱ多态性与正常妊娠妇女的收缩压水平有关.     

apoCⅢ在富含甘油三酯脂蛋白代谢中的作用

apoCⅢ在富含甘油三酯脂蛋白[乳糜微粒（CM）及VLDL，TRL]代谢中起关键作用。 CⅢ主要在肝脏合成，apoCⅢ基因与apoAI与AIV基因紧密相邻成族位于第11号染色体长臂，长约3．1kb，在正常人空腹血浆中apoⅢ（0.10g/L)主要（约70％）与HDL结合，高甘油三酯血症患者血浆apoCIII水平显著升高，并主要（约86％）与VLDL结合，研究表明，VLDLaoCIII/LDL-apcCIII比值与冠心病严重程度相关，苯氧酸类降腊药物使TG降低主要由apc C III mRNA水平降低及PPAR活性有关，转人apcCIII基因小鼠apo CIII的高表达可引起高甘油三酯血症，如同时伴apoE升高，则血TGI不升高，apoC III抑制CM及VLDL的代谢一方面是由于它可抑制脂蛋白脂酶（LPL）的活性，使CM及VLDL中TG降解减弱，另一方面，它可降低肝脏对含apE的TRL及其残骸的摄取。     

实验性高甘油三酯血症大鼠凝血和纤溶的变化

观察实验性高甘油三酯血症大鼠凝血和纤溶的变化,建立大鼠内源性及外源性高甘油三酯血症模型,测定大鼠空腹12～14 h血浆甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇及血糖浓度,并观察其与凝血时间、血小板计数、纤维蛋白原含量和凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间、组织型纤溶酶原激活物活性及纤溶酶原激活物抑制剂 1活性的关系.结果发现,饲高糖膳食3天及6天后,大鼠血浆甘油三酯分别是对照组分别的2.43倍及2.9倍(P<0.001),血糖分别增加80%及39%(P<0.01).饲高脂膳食3天及6天后,大鼠血浆甘油三酯分别是对照组的2.3倍及1.6倍(P<0.05).但两组血浆总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇与对照组均无明显差异.饲高糖膳食与饲高脂膳食3天及6天后,凝血酶原时间及活化部分凝血酶原时间均较对照组明显缩短(P<0.05).饲高糖膳食6天及饲高脂膳食3天,纤维蛋白原分别较对照组增加84%及122%(P<0.05).两组纤溶酶原激活物抑制剂 1活性较对照组明显增高(P<0.05),凝血时间、血小板计数及组织型纤溶酶原激活物活性与对照组无明显差异.相关分析表明,血浆甘油三酯与纤维蛋白原含量、纤溶酶原激活物抑制剂 1活性呈正相关(P<0.01),与凝血酶原时间、活化部分凝血酶原时间呈负相关(P<0.05).血浆总胆固醇和血糖与纤维蛋白原呈正相关(P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇与凝血时间、凝血酶原时间呈正相关(P<0.01). 结果发现, 血浆甘油三酯升高促进凝血系统活性增强,纤溶系统活性降低.     

内源性高甘油三酯血症患者凝血及纤溶活性的改变及其与血脂、载脂蛋白的相关分析

目的　研究内源性高甘油三酯血症患者凝血及纤溶活性的改变及其与血脂及载脂蛋白的相关性。方法　测定内源性高甘油三酯血症 ( HTG)患者及正常对照者凝血酶原时间 ( PT)、活化部分凝血酶原时间 ( APTT)、组织型纤溶酶原活化物活性 ( t- PA)以及纤溶酶原活化物抑制物 - 1活性 ( PAI- 1)、血浆纤维蛋白原 ( Fg)含量和血清脂质及载脂蛋白含量。结果　 HTG患者 PT和 APTT较对照组显著缩短 ( P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,Fg含量及 PAI-1活性显著增强 ( P<0 .0 1) ,t- PA活性无明显差异。 PT与 HDL - C水平呈显著正相关 ( r=0 .44 5 ,P<0 .0 1) ,与TG、apo C 、BG含量及 BMI呈负相关 ( r=- 0 .2 94,- 0 .3 2 0 ,- 0 .2 82 ,- 0 .2 72 ,P<0 .0 5 ) ,APTT与 TG及apo C 含量呈负相关 ( r=- 0 .3 45 ,- 0 .3 2 0 ,P<0 .0 5 )。 t- PA活性与 BG浓度呈显著负相关 ( r=- 0 .3 3 6,P<0 .0 1)。 PAI- 1活性及 Fg含量与 TG、apo C 、C 及 E含量呈正相关 ( r=0 .40 0 ,0 .40 8,0 .497,0 .45 4,P<0 .0 1及 r=0 .64 2 ,0 .5 81,0 .673 ,0 .3 0 4,P<0 .0 1) ,与 HDL - C水平呈负相关 ( r=- 0 .3 66,- 0 .5 2 4,P<0 .0 1)。结论　内源性高甘油三酯血症患者血浆凝血活性增加及纤溶活性降低与血脂异常有关     

间日疟原虫抗独特型抗体的制备和鉴定

利用低渗透析-Sephadex G200层析制备电泳纯、并具免疫活性的IgM型抗Pv红内期McAb(6H_6G_(11))免疫家兔,获得抗-6H_7G_(11)独特型抗体(Anti-6H_7G_(11)Id)。经免疫双扩散、ELISA以及竞争性免疫实验和动物实验表明,该Anti-6H_7G_(11) Id具有针对相应独特型决定簇的特异性,为半抗原抑制性Ab_2,并能模拟Pv抗原的作用,为交叉反应独特型。