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目的探究RNA干扰封闭AKT2对人肝癌细胞吉西他滨化疗敏感性的影响。方法设计合成AKT2小干扰RNA,筛选稳定表达细胞株。采用RT-PCR对AKT2mRNA水平变化进行检测。对AKT2蛋白表达,使用Western blot方法进行检测。分析SMMC7721细胞增殖,受AKT2-shRNA的影响情况。进行细胞凋亡检测。对凋亡相关基因蛋白表达,进行Western blot检测。结果对照组SMMC7721-GFP、SMMC7721表达,比SMMC7721-AKT2-shRNA中AKT2的表达较高。针对AKT2的shRNA,对AKT2 mRNA的表达有干扰的作用。干扰组SMMC7721-AKT2-siRNA中AKT2的表达,比对照组更低。对照组的细胞生长速度比实验组更快。AKT2-shRNA会使肿瘤细胞对凋亡药物的敏感性增加。结论RNA干扰封闭AKT2,会增加人肝癌细胞对吉西他滨化疗的敏感性,shRNA联合常规化疗,可以用来改善常规化疗的效果。 相似文献
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患者男 ,3 0岁。因反复畏寒、高热 40余天 ,经多家医院诊治无效而来我院就诊。 1个月前曾有右颈部淋巴结肿大。查体 :体温 40 .5℃ ,双侧腹股沟触及数个大小不等的肿大淋巴结 ,肝、脾未触及 ,心率 12 0次 /min ,律齐 ,左胸骨旁第 4肋间可闻及响亮高调吹风样杂音。血尿培养均未见细菌生长 ,结核抗体及肥达氏反应阴性。胸部X线检查 :两肺未见病变 ,右上纵隔及肺门淋巴结肿大。超声检查 :肝实质回声均匀 ,右肝内测及一团状强回声 ,1.4cm× 0 .8cm ,后方伴声影 ,胆囊大小为 6.7cm× 2 .3cm ,囊腔内见 0 .6cm× 0 .4cm ,0 .7cm× 0 .6cm的团状强… 相似文献
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目的探讨复方皂矾丸在鼻咽癌同步放化疗中对骨髓造血功能的保护。方法 160例Ⅱ~Ⅳa期鼻咽癌患者,随机分为治疗组(复方皂矾丸+同步放化疗)80例,对照组(同步放化疗)80例,两组均在根治性放疗的同时给予顺铂100mg/m2,D1、D22、D43化疗,治疗组同时给予复方皂矾丸口服,对照组不给予特殊处理。结果治疗组和对照组在近期疗效、胃肠道反应、肝肾功能损害方面差异无统计学意义(P>0.05),而在同步放化疗导致的白细胞下降、贫血、血小板下降方面,治疗组的发生率和程度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论复方皂矾丸在鼻咽癌同步放化疗中应用,可有效预防和治疗同步放化疗导致的骨髓抑制,保证同步放化疗的顺利进行,值得进一步推广。 相似文献
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目的 构建MHC-I荧光四聚体真核表达质粒,并表达、纯化该蛋白,以更简便地检测特异性T细胞.方法 运用分子克隆技术,构建sKb-ZsGreen-6 × His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化.结果 经酶切及测序鉴定证实成功构建了MHC-I荧光四聚体真核表达质粒并完成表达、纯化,并经SDS-PAGE电泳证实.结论 得到了纯化的MHC-I荧光四聚体,并经流式细胞术证实其与β2-微球蛋白、OVA肽结合后能被B3Z细胞识别,为特异性T细胞检测提供了一种更方便的方法. 相似文献
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目的 构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法.方法 构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与,12细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位.结果 构建了B2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定.结论 β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定. 相似文献
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高聚生胸腔内注射治疗恶性胸水的临床观察 总被引:7,自引:0,他引:7
恶性胸水是肺癌等胸部恶性肿瘤的严重并发症之一,消除胸水对提高患者生存质量及后续治疗起着关键的作用。我院自1998年10月至2004年10月应用高聚生治疗恶性胸水,取得了满意的疗效,现报告如下。 相似文献
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人microRNA-146a慢病毒表达载体的构建及鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建针对has-miR-146a的慢病毒表达载体,并鉴定成熟has-miR-146a在细胞内表达水平。方法PCR扩增pri-miR-146a,克隆于慢病毒载体plenti-GFP中,转染293FT细胞,收获并浓缩慢病毒颗粒,感染Jurkat细胞。结果成功构建了has-miR-146a的慢病毒表达载体,建立了高效转染系统。结论建立了高效稳定表达has-miR-146a的慢病毒转染系统。 相似文献
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