Relaxin protects myocardial microvascular endothelial cells from hypoxia-reoxygenation injury北大核心

BACKGROUND: Relaxin can significantly improve cardiac and renal dysfuction caused by pathological factors, inhibit myocardial hypertrophy, have an anti-fibrosis effect, and improve ischemia-reperfusion injury. However, its protective mechanism against hypoxia-reoxygenation injury of endothelial cells remains unclear. OBJECTIVE: To investigate the protective mechanism of relaxin against hypoxia-reoxygenation injury of myocardial microvascular endothelial cells. METHODS: Mouse myocardial microvascular endothelial cell line (H5V cells) was used for the experiment. Cells were treated by three different interventions: in control group, cells were normally cultured for 33 hours; in model group, cells were treated by 6-hour hypoxia followed by 3-hour reoxygenation); and in relaxin group, 24 hours of routine culture (180 ng/mL relaxin), 6 hours of hypoxia and 3 hours of reoxygenation (180 ng/mL relaxin) were given to simulate myocardial hypoxia-reperfusion injury. Cell permeability and Caspase-3 activity were then detected. Levels of tumor necrosis factor-α, interleukin-1β and interleukin-6 in cell supernatants were detected by ELISA. Expressions of VE-cadherin, Akt, and GSK-3β at mRNA and protein levels were detected by RT-PCR and western blot, respectively. RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the control group, the cell permeability and expression of caspase-3 increased significantly in the model group (P < 0.05). Compared with the model group, the cell permeability and expression of caspase-3 decreased in the relaxin group (P < 0.05). Moreover, the levels of tumor necrosis factor-α, interleukin-1β and interleukin-6 were elevated in the model group, while the levels were significantly decreased after relaxin treatment (all P < 0.05). There were no significantly changes in the mRNA and protein expressions of VE-cadherin, Akt1, and GSK-3β mRNA among three groups (all P > 0.05). Compared with the control group, the expression of phosphorylated VE-cadherin, Akt1 and GSK-3β were decreased in the model group (P < 0.05), and relaxin treatment reversed these changes to the control levels (P < 0.05). To conclude, relaxin treatment could enhance VE-cadherin expression, reduce hypoxiareoxygenation-induced microvascular endothelial cell damage, inhibit inflammatory cytokine release, and reduce cell apoptosis, which may be related to the activation of the Akt/GSK-3β signaling pathway. © 2023, Publishing House of Chinese Journal of Tissue Engineering Research. All rights reserved.     

脂联素通过减轻氧化应激治疗动脉粥样硬化的研究

观察不同滴度的脂联素腺病毒载体对高脂饮食载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型的影响,以探讨脂联素抗动脉粥样硬化（AS）是否与减轻氧化应激有关。将48只健康成年12周龄载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为4组,对照组,模型组,低剂量脂联素组,高剂量脂联素组。对照组给予正常饮食8周;模型组给予高脂饮食8周;低剂量脂联素组每两周经尾静脉注射脂联素腺病毒载体1．0×108p．f．u,实验期间高脂饮食;高剂量脂联素组每两周经尾静脉注射脂联素腺病毒载体5．0×108p．f．u．实验期间高脂饮食。实验结束后,摘眼球采血取血清,测定总胆固醇（TC）,甘油三酯（TG）,低密度脂蛋白（LDL-C）,高密度脂蛋白（HDL-C）,以及血清脂联素（APN）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活性,丙二醛（,MDA）含量,取小鼠主动脉血管。实时荧光定量扩增法（RT-PCR）测定小鼠主动脉血管APN,内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的表达。与模型组比较,外源性的脂联素降低了血清TG,TC,LDL-C,MDA的含量,血清SOD活性增加,上调动脉血管中APN和eNOS的表达。AS损伤面积明显减少,分别降低了26％和31％（P＜0．05）,脂纹区的脂滴直径降低极显著（P＜0．01）,随着APN剂量的增加,AS损伤逐步减轻,但是低剂量脂联素组和高剂量脂联素组的差异没有统计学意义。减轻氧化应激是脂联素抑制动脉粥样硬化的一种保护机制和途径。     

诱导多能干细胞向心肌细胞定向分化调控的研究进展

ESCs和iPSCs具有强大的自我更新和分化潜能，iPSCs避免了免疫排斥、伦理、宗教和法律等诸多限制，受到干细胞与再生医学领域的广泛关注，其定向诱导分化受到热烈追捧。近几年，科学家们已成功将iPSCs诱导成各种成体细胞，并应用于各种疾病的治疗，iPSCs 定向诱导分化有很大的进展，但是为了将iPSCs应用于临床，解决人类面临的各种疾病，真正造福于人类健康，其定向分化的制备率、安全性以及分化机制还有待进一步深入研究。     

清醒状态昆明小鼠随日龄变化的心电图分析

目的限制大鼠活动致束缚应激形成大鼠亚健康状态模型,观察亚健康状态大鼠氧自由基变化及中药干预效果。方法雄性SD大鼠40只,体重320—360g,随机分成4组,即正常对照组、模型对照纽、抗衰老片组和六味地黄丸组,每组10只。除正常组外,其它各组每天限制大鼠活动3h,形成束缚应激,建立亚健康状态大鼠模型。在造模同时,各给药组灌胃给予相应的药物。试验第14d和21d,各组随机取5只大鼠,经腹腔取静脉血,测定SOD、GSH-Px活性和MDA、LD含量。结果模型对照组大鼠血清中SOD、GSH-Px活性明显降低俾〈0．05,P〈0．01）,MDA、LD含量明显升高（P〈0．05）;给予抗衰老片后显著提高大鼠血清中SOD、GSH-Px活性和降低血清MDA、LD含量（P〈0．05,P〈0．01）。结论连续每日限制活动3h可使大鼠产生束缚应激,导致抗氧化能力降低,这可能与亚健康状态的形成有关。给予抗衰老片和六味地黄丸可明显提高血清中SOD、GSH—Px活性和降低MDA、LD含量。     

成都市社区精神分裂症免费治疗对医疗费用的影响

目的探讨社区精神分裂症免费药物治疗对患者医疗费用的影响。方法纳入成都市金牛区贫困精神分裂症患者140例,随机分为两组,其中70例免费给药。随访1年,比较随访前后1年内患者及家庭的直接费用与间接费用。结果免费治疗组与对照组随访后在患者缺勤天数、患者间接损失、间接费用差异有统计学意义（P〈0.01）;免费治疗组自身前后比较直接损失、家属缺勤天数、家属间接损失、PANSS有明显下降（P〈0.01）。结论社区精神分裂症免费服药能有效控制病情,间接减少医疗费用支出,减轻家属负担。     

血管变异对糖尿病大鼠急性下肢缺血模型的影响及动脉造影的评估意义

目的通过动脉造影法对糖尿病鼠下肢急性缺血模型进行评估,探讨血管变异对糖尿病急性下肢缺血模型构建的影响。方法 30只雄性Wistar鼠,经高脂喂养后腹腔注射STZ(40 mg/kg)诱发糖尿病模型,血糖达16.8 mmol/L后,再手术结扎股动脉,造成左下肢急性缺血模型,喂养28 d后用动脉造影法测定下肢血流。结果 83.3%大鼠(25只)空腹血糖水平达16.8 mmol/L,结扎后1~7 d,大体观察下肢显著性缺血(P<0.05),28d大体观察下肢形态基本恢复到术前水平,缺血侧下肢肌肉较对侧略萎缩,但行动自如;动脉造影显示,28 d后来自于髂内动脉的动脉分支明显增粗,其远端血管代偿性增加,供应膝关节及以下区域。结论大鼠下肢有来自于髂内动脉的分支参与供血,此变异对缺血模型的建立有影响;使用动脉造影法可以发现此类变异,并准确评估糖尿病下肢缺血及血管的代偿性改变。     

基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞移植治疗糖尿病下肢缺血☆

背景：基质细胞衍生因子1α被证明可以促进内皮祖细胞归巢。 目的：观察基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞移植治疗糖尿病模型鼠下肢缺血的疗效。 方法：取雄性Wistar鼠30只,25只成功建立糖尿病模型大鼠,随机数字表法分为3组,对照组注入等量生理盐水,共培养组注射与基质细胞衍生因子1α共培养的内皮祖细胞,内皮祖细胞组注入未进行共培养的内皮祖细胞。 结果与结论：MTT检测结果显示,基质细胞衍生因子1α能显著增加内皮祖细胞的增殖能力(P < 0.01)。移植后第28天动脉造影显示共培养组缺血侧下肢动脉显影血管数多于内皮祖细胞组和对照组(P < 0.05)。提示采用基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞,有利于使糖尿病大鼠缺血下肢血供改善,主要来自于新生血管形成和/或原有细小血管的代偿性增粗。     

基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞移植治疗糖尿病下肢缺血

背景：基质细胞衍生因子1α被证明可以促进内皮祖细胞归巢。 目的：观察基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞移植治疗糖尿病模型鼠下肢缺血的疗效。 方法：取雄性Wistar鼠30只,25只成功建立糖尿病模型大鼠,随机数字表法分为3组,对照组注入等量生理盐水,共培养组注射与基质细胞衍生因子1α共培养的内皮祖细胞,内皮祖细胞组注入未进行共培养的内皮祖细胞。 结果与结论：MTT检测结果显示,基质细胞衍生因子1α能显著增加内皮祖细胞的增殖能力(P < 0.01)。移植后第28天动脉造影显示共培养组缺血侧下肢动脉显影血管数多于内皮祖细胞组和对照组(P < 0.05)。提示采用基质细胞衍生因子1α预处理内皮祖细胞,有利于使糖尿病大鼠缺血下肢血供改善,主要来自于新生血管形成和/或原有细小血管的代偿性增粗。     

C57胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞分离、培养及鉴定

背景：培养的心肌细胞被广泛应用于心肌细胞的生理特性、毒性实验、基因工程、疾病模型和药物筛选等方面的研究。获得纯度较高活性良好的品系小鼠心肌细胞是研究的关键前提。 目的：分离和培养C57小鼠胎鼠、乳鼠及成年小鼠心室肌细胞。 方法：应用机械切碎心室肌后,胰蛋白酶消化不同发育阶段的C57小鼠心室肌细胞,差速贴壁1 h纯化心室肌细胞,锥虫蓝染色判定心肌细胞活力,体外分别培养48~72 h后分别行倒置显微镜、扫描及透射电镜观察细胞形态,微电极阵列评价细胞电生理指标,免疫组化鉴定。 结果与结论：经3~6次消化后,心室组织消化完全,即刻细胞存活率大于85%。倒置显微镜下观察,细胞呈梭形、多角形。12 h有少部分细胞搏动,48 h细胞交织成网,搏动呈同步性,搏动频率30~90次/min。说明用胰蛋白酶组织消化法可以成功地分离、培养,并获得形态、活力良好的胎鼠、乳鼠及成年C57小鼠心室肌细胞。     

驴细管精液冷冻效果研究

采用假阴道法采集成年种公驴精液,经品质评定后,用5种不同冷冻保存液稀释、平衡,冷冻保存制作细管冷冻精液,以筛选适宜的驴精液冷冻保存液和冷冻保护剂.结果表明:乳糖-葡糖-甘油-卵黄液为最佳种冷冻保存液(P<0.05);甘油为最佳冷冻保护剂,其适宜浓度为5%,精子冻后活率平均为0.36.畸形率≤27.4%,顶体完整率82.2%,解冻后常温下精子存活时间为8.2h.