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聚己内酯的细胞毒性和动物急性毒性实验 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究聚己内酯(PCL)对L 929细胞生长抑制作用的影响及其对小鼠急性毒性的作用.方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和吖啶橙荧光染色法研究不同浓度的PCL浸提液对L 929细胞生长抑制的影响;选用清洁级昆明种小鼠进行了动物急性毒性实验研究.结果:不同浓度的PCL浸提液对L 929细胞在2,4,7 d显示毒性级别分别为1级,0级,0级,PCL各处理组细胞与正常对照组细胞的凋亡指数差异无显著性.日给药量20 g·kg-1时,给药组小鼠行为活动正常,与对照组小鼠的体重相比差异无显著性.结论:高分子材料PCL符合生物体应用的基本要求,安全无毒有较佳的生物相容性.25%PCL混悬液小鼠灌胃给药,对小鼠基本无毒. 相似文献
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结肠癌、直肠癌传统上是西方富裕国家最常见的恶性疾病,在过去几十年来,世界格局发生了变化,随着亚洲发展中国家的经济发展,结肠癌、直肠癌发病率急剧上升.到2030 年,全球结肠癌、直肠癌负担预计将增加60 %,新增病例将超过220 万,死亡病例将超过110万[1].结直肠癌是一种高度侵袭性的癌症,许多病人死于此疾病,该病已成为中国第5 位癌症相关死亡的主要原因[2].结直肠癌的发病机制尚不清楚,但究其病因是多因素、内部和外部因素共同所致.基因多态性与结直肠癌的相关性有助于预测病程并采取预防措施,确定特定药物治疗的潜在目标[3].为提高病人的存活率,新的生物标记物在结肠癌、直肠癌诊断或预后的应用十分重要[4].细胞极性对组织稳态至关重要,细胞的顶端-基底极性破坏,开启和推动癌症多种类型的进展.维持细胞极性的常见分子有 E -cadherin 和Crumbs3等.维持细胞组织结构和生理功能的细胞外基质蛋白有Collagen type I (Col-I)和Hyaluroni-dase-1 (Hyal-1 ).实体瘤与周围微环境协同,促进肿瘤生长和转移.因此,研究肿瘤细胞和其微环境中的组件可以阐明发病机制,提供更多癌症早期诊断和预防的有效方法. 相似文献
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目的 体外拼装适合在乳酸链球菌表达的人粒-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte—macrophage colony stimulatingfactor,hGM—CSF),并构建载体pNCSF。方法 根据hGM-CSF的氨基酸序列及乳酸链球菌偏好的密码子,将hGM—CSF基因外显子的全长碱基序列用DNAWORKS程序设计成16条互补的寡核苷酸片段,并且分别在第1条和第16条寡核苷酸片段上分别设计PstⅠ和BamHⅠ酶切位点,将相同终浓度的寡核苷酸混合进行PCR反应,完成hGM-CSF基因拼接,得到目的基因片段,对寡核苷酸片段进行拼装和扩增.产物稀释后进一步纯化扩增,在Tag酶存在的条件下对产物两末端加T,然后TA克隆于pGEM T easy载体中,经酶切鉴定得到阳性克隆并经测序验证。然后亚克隆于含有P59启动子、USP45蛋白信号肽的pNBC1000载体。结果通过PCR得到420左右目的DNA片段,获得了hGM—CSF和pNCSF阳性克隆。其DNA测序结果与设计序列完全一致。结论 运用基因拼装及克隆技术成功拼装了hGM—CSF基因及构建了载体pNCSF,为乳酸链球菌表达重组hGM—CSF奠定了基础。 相似文献
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Galectin-3在不同病理分期大肠癌中的差异表达研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探讨galectin-3在三种不同病理分期的大肠癌细胞中的差异表达,及其表达与大肠癌病理特征的关系。方法体外培养SW1116、W480和LOVO3种不同病理分期大肠癌细胞株,用RT—PCR方法研究galectin-3在mRNA水平的表达;Western-blot方法研究galectin-3在蛋白水平的表达,用免疫细胞化学方法对galectin-3进行细胞定位研究。结果galectin-3主要表达在大肠癌细胞浆中,在细胞膜也有少量表达。在Duck's分期依次为A期-D期的三种大肠癌细胞株:SW1116-SW480-LOVO细胞中,galectin-3的表达在mRNA水平和蛋白水平都依次增强,各纽间都有统计学意义(P〈0.05)。结论galectin-3主要表达在大肠癌细胞浆和胞质中,Galectin-3在大肠癌细胞中的表达与大肠癌细胞的恶性程度有关,可作为大肠癌转移的指标。 相似文献
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目的:构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子乳酸链球菌表达载体,为进一步研究人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在乳链菌的表达及其治疗价值奠定基础。方法:实验于2005-04/2006-03在南方医科大学南方医院消化病研究所完成。①载体pNCSF的构建:将质粒集落刺激因子及含有P59启动子、USP45蛋白信号肽的pNBC1000质粒分别加入BamH Ⅰ和Pst Ⅰ进行双酶切,并用Apa Ⅰ、Sac Ⅰ进行双酶切鉴定,重组质粒命名为pNCSF。②SDGFP的TA克隆及载体pNCSFGFP的构建:将经过优化适合在乳链菌表达的人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子基因克隆于含有P59启动子、USP45蛋白信号肽的pNBC1000载体,得到重组质粒pNCSF;同时设计上下游引物经PCR扩增增强荧光表达蛋白(EGFP),TA克隆后经测序验证,再连接于pNCSF获得重组质粒pNCSFGFP。③载体pTRCSF、pTRCSFGFP的建立:将获得的pNCSF和pNCSFGFP进一步克隆于穿梭载体pTR1001c,以获得人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子乳链菌表达载体pTRCSF及pTRCSFGFP。结果:①载体pNCSF构建结果:酶切鉴定产物经1.0%的琼脂糖凝胶电泳后,发现有(含启动子P59、信号肽USP45、人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子)720bp的目的片段。②SDGFP的TA克隆及载体pNCSFEGFP的构建结果:SDGFP阳性克隆产物经EcoRⅠ酶切鉴定得到775bp目的片段。pNCSFEGFP酶切鉴定产物经1.0%的琼脂糖凝胶电泳后,发现有(含启动子P59、信号肽USP45、人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、SDGFP)1495bp的目的片段。③穿梭质粒pTRCSF、pTRCSFGFP酶切鉴定结果:经Xba Ⅰ、Sac Ⅰ进行双酶切鉴定,分别得到约717bp、1492bp大小目的片段。结论:获得了人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子乳链菌表达载体pTRCSF及pTRCSFGFP,并经酶切鉴定和测序证实。 相似文献
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