对CUS抑郁症大鼠模型海马齿状回突触改变的体视学研究

目的 运用无偏体视学方法定量研究慢性不可预知应激(chronic unpredictable stress, CUS)模型大鼠海马DG体积、DG突触密度、突触总数的改变情况.方法 筛选4～5周龄雄性SD大鼠分为对照组(n=15)和CUS组(n=23).CUS组大鼠通过孤养并结合慢性不可预知应激方式建立模型,对照组每5只为1笼,正常喂养.建模期间,每周进行糖水偏好试验.建模4周后,结合糖水偏好试验、旷场实验、高架十字迷宫实验对两组大鼠行为学表现进行评估.随后运用现代体视学与免疫组织化学相结合的方法测量两组大鼠海马DG体积、DG突触密度和突触总数.结果 经过4周CUS干预后,CUS组大鼠与对照组相比,体质量显著降低(P＜0.05),糖水偏好显著下降(P＜0.05);旷场实验中央区域路程、中央路程比和中央时间比显著降低(P＜0.05).CUS组大鼠海马DG突触密度[(0.48±0.13) /μm3]和突触总数(6.713 5×1o8)较对照组大鼠[突触密度(0.15 ±0.03)/μm3,突触总数(2.103 3×109)]显著下降(P＜0.05).结论 抑郁症模型大鼠海马DG的突触总数减少、突触密度减小,表明海马齿状回突触改变可能是抑郁症发病的重要神经结构基础之一.     

抑郁症模型大鼠海马内小胶质细胞数量和炎症因子表达增加

目的 探讨慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)抑郁症模型大鼠海马小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞和炎症因子的变化情况.方法 选取6～8周龄的雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,在适应性饲养、糖水偏好基线调整及筛选后采用分层随机法分为空白对照组(n=19)和CUS干预组(n=48),给予CUS干预组大鼠5周的CUS干预,运用糖水偏好实验来评估两组大鼠的抑郁样行为,筛选出成模大鼠16只,即CUS模型组.采用免疫组织化学与体视学相结合的方法对两组大鼠海马各亚区小胶质细胞的总数量进行精确定量研究,运用免疫荧光方法评估大鼠海马各亚区活化小胶质细胞的密度,并采用实时定量PCR技术检测海马炎症因子的水平.结果 与空白对照组相比,CUS模型组大鼠的体质量明显下降(P＜0.01)、糖水偏好百分比显著降低(P＜0.01);CUS模型组大鼠海马CA1、CA2/3和DG区小胶质细胞的总数量较空白对照组均显著增加(P＜0.001,P=0.002,P=0.002);CUS模型组大鼠海马CA1、CA2/3和DG区活化小胶质细胞的密度和比例较空白对照组均显著增加(P=0.011,P=0.015,P＜0.001;P=0.018,P=0.019,P＜0.001);相对于空白对照组,CUS模型组大鼠海马炎症因子IL-1β和iNOS的mRNA表达量显著升高(P=0.012,P=0.020).结论 抑郁症模型大鼠海马各亚区内小胶质细胞总数量、活化小胶质细胞的密度和比例增加,炎症因子表达升高,表明海马小胶质细胞的改变可能参与抑郁症的病理过程.     

氟西汀对抑郁模型大鼠海马CA1区少突胶质细胞作用的研究

目的：探讨抗抑郁药物氟西汀对抑郁症慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）模型大鼠海马CA1区内CNPase+少突胶质细胞的作用。方法：选用青年雄性Sprague Dawley（SD）大鼠（4~6周龄）,随机分为对照组（12只）和模型组（38只）,给予模型组大鼠连续4周的CUS干预。随后依据大鼠的糖水偏好百分比筛选出模大鼠,随机分为CUS组（12只）和CUS+fluoxetine组（FLX组）（12只）,第5~7周CUS组和FLX组继续给予慢性应激,同时FLX组大鼠给予5 mg/（kg·d）氟西汀腹腔注射,对照组和CUS组给予等量生理盐水腹腔注射。干预结束后利用免疫组织化学方法结合现代体视学对大鼠海马CA1区CNPase+少突胶质细胞的数量进行精确的三维定量研究。结果：实验发现,CUS模型组大鼠的体质量（251.4±15.9） g较对照组（323.3±25.9） g明显下降（P=0.00）,但与FLX组大鼠的体质量（257.9±22.7） g相比无差异（P=0.473）。CUS组大鼠的糖水偏好百分比（62.0±14.2）%明显低于对照组（89.2±4.8）%（P=0.000）及FLX组（78.2±12.8）%（P=0.020）。CUS组大鼠海马CA1区CNPase+细胞数量（18 650.7±1 812.0）明显低于对照组（33 606.9±4 471.4）（P=0.007）及FLX组（29 080.7±2 877.5）（P=0.042）。结论：大鼠海马CA1区内少突胶质细胞在抑郁症发病过程中可能起着重要作用,氟西汀治疗可防止抑郁症模型大鼠海马CA1区的CNPase+少突胶质细胞的丢失。本研究结果为探索新的抗抑郁策略提供了形态学基础。     

抑郁症易感性差异与海马CA3区及DG内树突棘数量变化的相关性研究

目的：探讨在慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）模型中压力耐受大鼠海马结构CA3及海马齿状回（dentate gyrus,DG）内树突棘数量的改变情况,以期深入了解抑郁症发病的结构基础。方法：选用4~5周龄雄性sprague-dawley（SD）大鼠,将糖水偏好稳定的大鼠随机分为空白对照组和CUS造模组,造模组采取孤养并给予4周的CUS干预。根据糖水偏好结果筛选出CUS敏感组和CUS耐受组。利用免疫组织化学结合体视学方法对每组抽选出的5只大鼠海马结构CA3和DG内的树突棘数量进行精确的三维定量研究。结果：与空白对照组、CUS耐受组相比,CUS敏感组的糖水偏好百分比均明显下降（P=0.000,P=0.000）,而空白对照组与CUS耐受组的糖水偏好百分比无明显差异（P=0.262）;与空白对照组和CUS耐受组相比较,CUS敏感组大鼠海马结构CA3区内的树突棘数量明显下降（P=0.008,P=0.004）,CUS敏感组大鼠海马结构DG区内的树突棘数量也明显下降（P=0.001,P=0.001）;而在大鼠海马结构CA3及DG内,CUS耐受组与空白对照组的树突棘总数目无明显差异（P=0.656,P=0.950）。结论：CUS耐受组大鼠海马结构CA3及DG内树突棘的数量不受CUS干预的影响,提示海马结构内树突棘数量可能是抑郁症易感性差异的关键因素之一,为抑郁症的治疗提供了新的方向。     

肝X受体激动剂GW3965对应激小鼠海马小胶质细胞活化的影响

目的:研究肝X受体（LXRs）激动剂GW3965对慢性不可预知性应激（CUS）抑郁模型小鼠海马CA1、CA2/3和DG区内小胶质细胞密度和神经炎症的作用。方法:选取4～6周龄的雄性C57BL/6J小鼠，适应性喂养1周后，随机分为对照组（control）、对照+GW组（GW）、抑郁模型组（CUS）以及抑郁模型+GW组（CUS+GW）。对CUS组和CUS+GW组小鼠进行10周的CUS干预；从第7周起，对GW组和CUS+GW组小鼠进行4周的GW3965给药。第10周末进行行为学测试后运用免疫荧光方法评估小鼠海马各亚区内小胶质细胞的密度，并采用Western Blot检测海马炎症因子的水平。结果:10周的CUS干预显著减少C57小鼠的体重以及糖水偏好实验结果，并显著增加强迫游泳实验中小鼠的不动时间；4周的GW3965治疗可以逆转以上结果。CUS干预显著增加小鼠海马CA1区、CA2/3区和DG区内Iba1⁺小胶质细胞密度，以及海马炎症因子IL-1β、TNF-α和转录因子NF-κB的蛋白表达水平，显著降低抗炎介质CD206的蛋白表达水平；而GW3965治疗可逆转上述变化。结论...     

抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞作用的研究

目的：探讨抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马齿状回（dentate gyrus,DG）区少突胶质细胞的作用。方法：4~6周清洁级雄性SD大鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组（10只）和建模组（60只）,建立慢性不可预知性应激（chronic unpredictable stress,CUS）抑郁症模型,为期4周。利用糖水偏好实验筛选出成模大鼠（23只）,随机分为CUS组（12只）及Anti-Lingo-1组（11只）。运用Morris水迷宫评估对照组,CUS组和抗Lingo-1组的行为学水平,采用体视学方法计算各组大鼠海马DG区的少突胶质细胞数量。结果：应激4周和抗Lingo-1抗体治疗3周后,Morris水迷宫实验中,与对照组（3.4±0.2）相比,CUS组（2.4±0.2）大鼠Morris水迷宫第6天穿越平台次数明显降低（F=20.049, P=0.004）;与CUS组比较,抗Lingo-1组（4.3±0.3）大鼠穿台次数明显增加（F=20.049, P=0.000）。体视学研究结果表明,与对照组[（4.9±1.1）×104]比较,CUS组[（3.1±1.3）×104]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显减少（F=8.747, P=0.026）;与CUS组比较,Anti-Lingo-1组[（6.1±1.1）×104]大鼠海马DG区少突胶质细胞数量明显增加（F=8.747, P=0.001）。结论：抗Lingo-1抗体可以改善抑郁症大鼠的认知障碍,抗Lingo-1抗体对抑郁症伴认知障碍大鼠海马DG区少突胶质细胞的作用可能是抗Lingo-1抗体改善抑郁症大鼠认知障碍的重要形态学基础之一。     

Nω硝基左旋精氨酸甲酯对大鼠海马CA1区毛细血管的影响

目的 探讨Nω硝基左旋精氨酸甲酯(Nω-nitro-左旋精氨酸methyl ester,L-NAME)对大鼠空间学习、记忆能力和海马CA1区毛细血管的影响.方法 内导管成功埋植后,阻断剂组(L-NAME组)大鼠每日给予5 μL的1μmol/μL L-NAME侧脑室注射,对照组(Sham组)每日给予5μL生理盐水侧脑室注射,持续4周.然后用Morris水迷宫测试大鼠空间学习和记忆能力,用试剂盒检测海马组织中NOS活性及NO含量,用体视学方法测定海马和海马CA1区总体积、海马CA1区毛细血管总长度、总表面积和总体积.结果 水迷宫实验中L-NAME组的潜伏期显著长于Sham组(P =0.006);L-NAME组海马组织中的NOS活性及NO含量均显著低于Sham组(P＜0.01);L-NAME组海马体积、CA1区体积与Sham组比较差异无统计学意义(P＞0.05);L-NAME组CA1区毛细血管总长度、毛细血管总表积、毛细血管总体积均较Sham组显著减少(P＜0.05).结论 L-NAME可以导致大鼠空间学习、记忆能力下降和大鼠海马CA1区毛细血管总长度、总表面积以及总体积减少.     

压力耐受大鼠和压力易感大鼠大脑白质及白质内有髓神经纤维的体视学研究

目的 探讨在慢性不可预知性应激(chronic unpredictable stress,CUS)后压力耐受大鼠大脑白质体积及白质内有髓神经纤维总体积的改变,分析对压力的耐受能力是否与大脑白质的改变有关.方法 选用50只4～5周龄雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠,采用完全随机法分为空白对照组和模型组.模型组的大鼠在给予4周的CUS之后,根据糖水偏好实验(sucrose preference test,SPT)的结果筛选出压力易感组和压力耐受组.采用旷场实验(open field test,OFT)评估各组的行为学水平,运用体视学方法计算各组大鼠白质体积和白质内有髓神经纤维的体积.结果 压力易感组的蔗糖偏好百分比显著低于空白对照组和压力耐受组(P＜0.01).压力耐受组OFT总成绩显著优于空白对照组和压力易感组(P＜0.01).压力耐受组的白质体积显著性高于压力易感组(P＜0.01),但与空白对照组比较,差异没有统计学意义(P＞0.05).压力耐受组白质的有髓神经纤维总体积显著性高于压力易感组(P＜0.01),与空白对照组相比差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 白质和白质内有髓神经纤维的改变可能与抑郁易感性差异存在关系.     

肝X受体激动剂对抑郁模型小鼠海马树突棘数目的影响

目的:探讨肝X受体(LXRs)激动剂GW3965对慢性不可预知性应激(CUS)诱导的抑郁症模型小鼠海马结构各亚区CA1、CA3和DG内树突棘数目变化的影响。方法:选取雄性C57BL/6J小鼠，经过适应性喂养和糖水基线调整后，被随机分为对照组(control)、对照+GW3965组(GW)、抑郁模型组(CUS)以及抑郁模型+GW3965组(CUS/GW)。CUS组和CUS/GW组小鼠接受连续10周的CUS干预，GW组和CUS/GW组小鼠在CUS干预的第7周开始接受4周的GW3965给药。第10周末进行行为学测试，之后应用免疫组化及现代体视学技术精准定量小鼠海马结构各亚区树突棘密度和总数目改变。结果:持续数周的应激使小鼠的体质量及糖水偏好百分比明显下降，强迫游泳不动时间显著增加。体视学结果显示CUS干预使小鼠CA1、CA3和DG区树突棘密度和数量明显减少。4周GW3965治疗改善了小鼠的抑郁样行为及逆转了DG区树突棘密度和总数目的下降。结论:LXRs激动剂GW3965对CUS模型小鼠DG区树突棘总数目的影响可能是其发挥抗抑郁作用的神经生物学基础之一。