TRPC1基因缺失对小鼠空间学习记忆的影响

目的:探讨TRPC1基因对小鼠空间学习和记忆的影响.方法:取4月龄野生S129小鼠(对照)和TRPC1基因敲除的S129小鼠(TRPC1 KO)各10只,采用Morris水迷宫检测其学习和记忆能力.小鼠进行连续5d的空间探索训练以找到平台位置淀位航行实验),记录每组小鼠每天4个象限的潜伏期.在学习结束后的第7天进行长期记忆的检测(空间探索实验),记录小鼠第1次到达平台位置的时间(探索时间)和游泳轨迹、穿越平台次数、总路程、平均速度、目标象限活动时间百分比和目标象限活动路程百分比等体现小鼠记忆能力的参数,采用t检验比较两组实验结果的差异.结果:在维持5d的学习阶段,野生对照小鼠和TRPC1 KO小鼠的潜伏期差异无统计学意义(P＞0.05).在长期记忆检测阶段,野生对照小鼠和TRPC1 KO小鼠的潜伏期、穿越平台的次数、平均速度、总路程、目标象限活动时间百分比和目标象限活动路程百分比的差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:TRPC1基因敲除未影响4月龄小鼠的学习和记忆能力.     

不同粒径二氧化硅致人永生化表皮细胞氧化应激相关蛋白表达水平改变

目的探讨不同粒径二氧化硅(SiO2)染毒致人永生化表皮细胞(HaCaT)氧化应激相关的抗氧化酶:含铜与锌超氧化物歧化酶(SOD-1)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GSR)蛋白表达水平的变化。方法不同质量浓度(5.0、10.0、15.0 mg/L)的15 nm和>100 nm的SiO2作用于HaCaT细胞24 h后,采用蛋白印迹法(Western blotting)观察各组细胞内SOD-1、CAT和GSR蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,不同粒径SiO2处理HaCaT后,细胞内SOD-1、CAT和GSR蛋白表达水平差异具有统计学意义(P<0.05)。对于15 nm组,SOD-1、CAT和GSR的蛋白表达水平随SiO2水平的增加呈现下降趋势;对于>100 nm组,3个蛋白的表达水平随SiO2水平的增加而上调。结论不同粒径SiO2的处理下,细胞内SOD-1、CAT和GSR等氧化应激相关抗氧化酶蛋白表达水平呈现明显的变化,提示SiO2诱导的生物学效应与粒径有关。     

老年人饮食与轻度认知功能障碍的相关性研究

目的 探讨饮食因素与老年人轻度认知功能障碍（MCI）的关系。方法 以2017年3-11月在深圳市某医院体检并诊断为MIC的≥60岁老年人为病例组,按性别相同、年龄 ± 3岁的原则匹配无MIC者为对照组,对2组人群进行饮食相关调查,采用单、多因素分析方法分析MCI的影响因素。结果 本研究共纳入MIC病例和对照组人群各137名,病例组的家庭年收入、文化程度、蔬菜、淡水贝/虾、鸡蛋的摄入量及绿茶等与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。多因素条件Logistic回归分析表明,文化程度越高（OR=0.651）,患MCI的风险越低;蔬菜（OR=2.405）及淡水贝/虾（OR=3.796）摄入频次越高,患MCI的风险越高。结论 应提倡健康科学的饮食方式,从日常生活方式入手实施一级预防,减缓认知功能障碍的发生。     

CYP1A2基因沉默及其对三氯乙烯毒性影响

目的 构建细胞色素氧化酶1A2(CYP1A2)基因沉默载体,转染L02人正常肝细胞(简称“L02细胞”),建立CYP1A2沉默细胞株并观察其对三氯乙烯(TCE)毒性的影响.方法 设计合成短发卡RNA(shRNA),连接到pLKO.1-puro质粒中构建CYP1 A2 shRNA慢病毒表达载体,感染L02细胞.筛选CYP1A2沉默细胞株,采用荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法鉴定.分别采用浓度为0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol/L的TCE(设为相应的染毒剂量组)对L02细胞和CYP1A2沉默细胞染毒12h,同时设置二甲基亚砜溶剂对照组(即0.00 mmoL/L染毒剂量组),观察凋亡基因[B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8、Caspase-9]和癌基因(c-fos、c-myc、K-ras、p53)等基因表达的变化.结果 测序证明插入pLKO.1-puro载体的CYP1A2基因干扰序列与设计的shRNA 序列一致.CYP1A2沉默细胞的CYP1A2mRNA和CYP1A2蛋白相对表达水平分别较L02细胞下降75.9％和82.4％(P＜0.01).TCE染毒后,0.25 ～4.00 mmol/L 4个染毒剂量组CYP1A2沉默细胞Bcl-2表达水平均高于相应染毒剂量组L02细胞(P＜0.01);部分0.25 ～4.00 mmol/L染毒剂量组Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和c-fos、c-myc k-ras、p53相对表达水平均低于相应染毒剂量组的L02细胞(P＜0.05或P＜0.01).结论 CYP1A2沉默降低TCE对L02细胞凋亡基因和癌基因的活化作用.     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠卵巢病理和超微结构的影响

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢病理和超微结构的影响,评价DEHP对雌性大鼠的生殖毒性作用。方法：SPF级5周龄雌性SD大鼠40只,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)和DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组10只,每天灌胃1次,每周5次,连续染毒6周。染毒结束后称量大鼠体质量及卵巢质量,计算卵巢脏器系数;光镜下观察大鼠卵巢病理改变;电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构的变化。结果：各染毒组大鼠体质量与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),高剂量组卵巢质量和脏器系数较对照组明显增加(P<0.01);普通光学显微镜检查发现DEHP处理后卵巢组织卵泡结构受损,电镜观察发现DEHP处理后颗粒细胞线粒体肿胀、线粒体嵴减少、胞浆空泡化、核染色质完全凝聚、出现凋亡小体、细胞变性坏死。结论：DEHP对大鼠卵巢毒性明显,影响卵泡发育,引起颗粒细胞凋亡。     

Hoechst33342/PI双染法和TUNEL染色技术检测神经细胞凋亡的对比研究

目的： 利用Hoechst33342/PI双染法和原位末端标记法(TUNEL)染色检测纳米二氧化硅(nm-SiO2)对神经细胞凋亡的影响,比较两种检测方法的优缺点。方法：以体外培养的人神经母细胞瘤SK-N-SH为研究对象,15和30 nm粒径的nm-SiO2(剂量为2.5、5、10 μg/mL)分别处理细胞24 h,另设1~5 μm SiO2组和溶剂对照组,采用Hoechst33342/PI双染法和TUNEL染色检测各处理组对SK-N-SH细胞凋亡的影响。结果：与对照组相比,两种检测方法分析均显示了nm-SiO2处理组SK-N-SH细胞凋亡率显著增加(P<0.05),且具有尺寸、剂量依赖性,而微米级SiO2对凋亡的影响不显著(P>0.05)。结论：nm-SiO2能诱导SK-N-SH细胞凋亡。Hoechst33342/PI双染法特异性高,简单易行;TUNEL法灵敏度高,能检测少量的细胞凋亡,但成本较高,两种方法可结合使用以便更加准确的检测神经细胞的凋亡。     

山奈酚对氯化铜诱导的细胞损伤的预防作用

目的 通过体外实验探讨山奈酚(Ka)对氯化铜(CuCl₂)诱导的A53T突变性人源α-synuclein转基因神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)损伤的预防作用。方法 CCK8法测定CuCl₂的半数抑制浓度(IC₅₀)值，确定染毒浓度。将实验分为对照组、CuCl₂处理组(简称模型组)和CuCl₂处理前用Ka干预组(简称干预组)。将细胞以5 000个/孔接种到96孔板孵育，24 h后在干预组的培养基中加入30μmoL/L Ka预孵育2 h, 2 h后在模型组和干预组中加入含有Cu²⁺的培养基，24 h后进行实验。采用酶联免疫吸附测定和免疫印迹实验检测山奈酚对Cu²⁺干预后细胞乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、ATP水平和细胞凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)表达的影响。结果 CuCl₂IC₅₀值为117.7μmoL/L,本研究以接近1/2 IC₅₀值为染毒浓度。通过酶...     

黄腐酚的神经保护作用研究进展

<正>近年来,越来越多的药物研发工作者将重心关注到天然药物中,主要是由于其具有低毒性、作用靶点广泛等优势。黄腐酚(xanthohumol)由啤酒花蛇麻腺分泌产生,是啤酒花中主要的异戊二烯基黄酮类物质[1]。由于其具有预防癌症、抗氧化、抗衰老、心血管保护及免疫调节等多种生理作用,黄腐酚近年来在医学界备受关注[2-3]。本研究介绍了黄腐酚的来源及药物特性,并从神经保护作用及其可能作用机制方面进     

三聚氰胺与三聚氰酸对雄性大鼠的肾脏损伤及预后

目的研究三聚氰胺与三聚氰酸联合染毒后大鼠的肾脏损伤及预后。方法 80只成年雄性SD大鼠经口暴露于三聚氰胺和三聚氰酸,设1个对照组和3个实验组,每组20大鼠,每天对动物经口灌胃染毒1次,连续28d,停止染毒后继续观察14d,实验结束时收集大鼠血液、肾脏进行检测。结果三聚氰胺与三聚氰酸联合染毒会造成雄性SD大鼠体重增加受到抑制,肾脏脏器系数与血液生化指标改变,肾脏发生结晶现象,部分肾小管与肾小球结构破坏,肾脏病理损伤在停止染毒14d后并无缓解。结论三聚氰胺与三聚氰酸联合经口28d染毒引起雄性SD大鼠肾脏的病理损伤,在停止染毒后14d并无明显改善。