脓毒症心肌损害新生大鼠模型的建立

【摘要】 目的 建立一种具有良好稳定性及重复性的能模拟新生儿脓毒症（NS）心肌损害的新生大鼠动物模型,为研究NS致病机制及防治提供模型动物。方法 选取出生10天的健康雄性SD新生大鼠54只,随机分为正常对照组、假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔术组（CLP组）,每组各18只。通过观察血培养菌落生长,采用酶联免疫吸附法（ELISA）对血清肌钙蛋白I（cTNI）浓度、心肌组织肿瘤坏死因子α（TNF α）和白细胞介素1β（IL 1β）含量进行检测,光镜下观察HE染色后心肌组织的病理变化。结果 正常对照组和Sham组新生大鼠的血培养结果均为阴性,CLP组新生大鼠的血培养中检出以大肠杆菌为主的菌落。正常对照组新生大鼠的血清cTNI浓度、心肌组织TNF α和IL 1β含量和Sham组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;CLP组新生大鼠的血清cTNI浓度、心肌组织TNF α和IL 1β含量较Sham组明显增加（P＜0.05）。正常对照组和Sham组的心肌组织HE染色示心肌细胞均未出现炎性改变,但CLP组心肌细胞周围出现了炎性细胞浸润等病理改变。结论 通过盲肠结扎穿孔可建立较为理想的脓毒症心肌损害新生大鼠模型。     

马勃多糖对荷瘤模型小鼠抑瘤作用及生命延长率的影响

目的:研究马勃多糖对荷瘤小鼠的抑瘤作用和生命延长率的影响。方法:采用真菌发酵法生产马勃菌丝,并提取马勃菌丝胞内多糖(CGP)。建立S-180肉瘤和抗艾氏腹水瘤(EAC)荷瘤小鼠动物模型,将所得马勃多糖进行抗S-180小鼠肉瘤和EAC的实验,观察马勃多糖抗肿瘤效果并分别计算抑瘤率和生命延长率。结果:高、中、低剂量马勃多糖对S-180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为41.7%、36.2%、30.7%,对EAC荷瘤小鼠的生命延长率分别为38.9%、46.7%和26.4%,与阴性对照组比较有显著性差异(P0.05,P0.01)。结论:马勃多糖有一定的抑瘤作用,并能有效延长EAC荷瘤小鼠的生存期。     

麻疹-流行性腮腺炎-流行性乙型脑炎联合减毒活疫苗猴体神经毒力研究

目的观察恒河猴对麻疹-流行性腮腺炎(流腮)-流行性乙型脑炎(乙脑)联合减毒活疫苗(Measles,Mumps and Japanese Encephalitis Combined Attenuated Live Vaccine,M-M-JEV)的神经毒力产生及其严重程度,对M-M-JEV进行安全性评价。方法猴两侧丘脑和腰髓内注射M-M-JEV,同时设阴性对照和麻疹减毒活疫苗、乙脑减毒活疫苗及麻疹-流腮联合减毒活疫苗对照,观察临床症状,并检查注射部位、体温、血液学、血液生物化学、摄食量、眼科学以及血清抗体等变化情况;实验结束进行大体病理学和组织病理学检查。结果各项观察指标及检查结果均与对照疫苗或阴性对照相似,相关数据与对照疫苗或阴性对照组比较差异均无统计学意义。结论 M-M-JEV表现出与单价疫苗或相关联合疫苗相似的安全性。     

Duffy、Diego等4种血型系统基因频率及多态性研究

目的了解岳阳汉族人群Kidd(Jk^a/Jk^b)、Duffy(Fy^a/Fy^b)、Diego(Di^a/Di^b)、Dombrock(Do^a/Do^b)4种红细胞血型系统的基因频率和多态性特点,为建立该地区稀有血型库提供数据支持。方法采用聚合酶链式反应-序列特异性引物法(PCR-SSP法)对303名岳阳汉族RhD(+)固定献血者进行4种血型系统基因分型。结果岳阳汉族人群Duffy血型的基因频率为Fy^a=0.9472,Fy^b=0.0528;Dombrock血型基因频率为Do^a=0.0842,Do^b=0.9158;Diego血型基因频率为Di^a=0.0247,Di^b=0.9752;Kidd血型基因频率为Jk^a=0.4802,Jk^b=0.5198。结论岳阳汉族人群Duffy、Diego、Kidd和Dombrock血型系统基因呈多态性分布。     

听障儿童疑问语调发音异常干预的个案研究

目的：探讨听障儿童疑问语调发音异常的矫治方法。方法对1例5岁4个月配戴助听器的疑问语调发音异常听障儿童实施针对性训练,采用单一被试研究方法,对比个案干预前后疑问语调边界调的终点基频值和基频斜率值。结果干预前后被试基线期和处理期的终点基频值（P=0.0156<0.05）和基频斜率值（P=0.0011<0.05）数据呈显著性差异。结论本研究设计的综合性康复训练方案使听障儿童疑问语调发音异常得到有效改善,可为临床康复提供理论与实践依据。     

麻疹-流行性腮腺炎-流行性乙型脑炎联合减毒活疫苗的稳定性研究

目的考察麻疹-流行性腮腺炎（流腮）-流行性乙型脑炎（乙脑）联合减毒活疫苗（Measles,Mumps and Japanese Encephalitis Combined Attenuated Live Vaccine;M-M-JEV）的稳定性。方法将M-M-JEV,37℃放置7d,检测病毒滴度;2-8℃放置0-25个月,检测外观、水分、病毒滴度、安全试验、异常毒性,0月和18个月时进行全检;（-30±2）℃放置0-30个月,检测外观、水分、病毒滴度、安全试验、异常毒性,0月、18个月、30个月时进行全检。结果所有检测结果,均符合2010年版《中华人民共和国药典》三部麻疹减毒活疫苗、流腮减毒活疫苗和乙脑减毒活疫苗的质量标准。结论 M-M-JEV有较好的稳定性。     

EGFR和PD-L1双靶向嵌合抗原受体构建及表达

目的:构建肿瘤相关抗原表皮生长因子受体特异性嵌合抗原受体(EGFR-CAR)和程序性死亡受体-配体1(PD-L1)抗体双修饰慢病毒载体表达系统。方法:人PD-L1-Fc蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合、亚克隆筛选高分泌PD-L1特异性抗体的稳定杂交瘤,酶联免疫吸附试验(ELISA)和Western blot检测抗体特异性,流式细胞术(FACS)鉴定对PD-1配受体封阻性能,Fortebio测定抗体亲和力,抗体全长测序,经保留鼠源CRD1、CRD2和CRD3人源化改造后构建单链抗体(single-chain variable fragment,scFv);人EGFR单克隆抗体杂交瘤系,经5′RACE技术扩增其轻链和重链可变区(VL和VH)基因,构建scFv,克隆至真核载体pcDNA3.1表达鉴定。基因合成EGFR-CAR(引入CD137协同信号胞内功能域)与PD-L1-scFv借助2A序列连接,克隆入慢病毒pLVX-EF1a-IRES-ZsGreen1表达载体,使用Lenti-X Packaging Single Shots (VSV-G)共同转染293T细胞,获得包装病毒,感染293V细胞,FACS测定CAR膜表达,ELISA检测CAR感染293V细胞培养上清中PD-L1-scFv表达情况,转染激活人外周血T细胞,验证CAR膜表达。结果:获得PD-L1抗体11E3,具备高度配受体封阻性能,经人源化改造后,亲和力稳定(2.67×10 -10 mol/L),EGFR-scFv获得有效表达。进一步构建了EGFR-CAR和PD-L1双修饰慢病毒分泌型CAR(CTC0537-1)及膜表达型CAR(CTC0537-2),其病毒感染293V细胞阳性率为10%。CTZ0431-1感染293V细胞后,细胞膜表面表达EGFR-scFv,检测培养上清存在PD-L1-ScFv;CTZ0431-2感染293V细胞后,细胞膜表面EGFR-scFv和PD-L1-scFv有效表达,双表达病毒感染活化T细胞的CAR表达率为39.3%。 结论:成功构建了EGFR-CAR和PD-L1-scFv双表达慢病毒载体,EGFR-CAR中度结合亲和力,此为EGFR靶向和PD-L1抗体双修饰CAR-T细胞的实体瘤治疗研究提供了关键工具。     

中医药治疗艾滋病研究进展

艾滋病是获得性免疫缺陷综合征(Acquired Immunodificiency Syndrome,AIDS)的简称,是由人类免疫缺陷病毒(Human Immunodificiency Virus,HIV)即通称艾滋病病毒感染而引起的进行性致死性疾病.大量的艾滋病患者因为目前采用的西药疗法价格昂贵而得不到及时的救治,给艾滋病的进一步传染埋下了隐患.因此,从国情出发开发传统中医药治疗艾滋病成为我国艾滋病防治工作的当务之急[1].现就近几年来中医药在艾滋病的临床治疗方面进行概述.     

论不断完善西藏农牧区新型医疗保障制度

西藏地处祖国西南边陲，自然环境、气候条件特殊，全区270万人口，农牧区人口占80％，约220万人，农牧区基础设施落后，农牧业效益低，农牧民收入增长缓慢，人口过快增长，这是西藏最重要的区情。西藏农牧区医疗保障制度的宗旨和目的就是提高农牧民健康保障水平，保证农牧民的切身利益，促进农牧区卫生事业的全面发展，加快推进农牧区全面建设小康社会的步伐。如果脱离了西藏农牧区的客观实际，     

血清甲胎蛋白对原发性肝癌诊断值的探讨

目的 探讨血清甲胎蛋白(AFP)对原发性肝癌的诊断值.方法 病理确诊的原发性肝癌104例与肝硬化及肝炎144例作对照,AFP测定采用放免法或化学发光法.将AFP测定值连续划分为9个数据段,按四格表计算敏感度、特异度、准确度、阳性似然比、阴性似然比及诊断优势比;用MetaDiSc1.4绘制受试者工作曲线(ROC),确定最适合的临界值.结果 AFP切割值为20μ/L时的敏感度最高,400μg/L时特异度最高,150μg/L或200μg/L时准确度、阳性似然比、诊断优势比最高,ROC曲线左上角最上方点对应的切割值为150μg/L,最适合临界值为150μg/L.结论 ROC曲线确定AFP为150μg/L时对原发性肝癌诊断效能最高,优于400μg/L.