热休克蛋白在喉癌中的表达

目的探讨热休克蛋白（ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＨＳＰｓ）在喉癌组织及其正常喉粘膜中的表达。方法采用狭缝杂交（Ｓｌｏｔｂｌｏｔａｎａｌｙｓｉｓ）技术对２１例喉癌组织及其正常喉粘膜的ＨＳＰ９０、ＨＳＰ７０和ＨＳＰ２７ｍＲＮＡ表达水平进行检测。结果①ＨＳＰ９０α和ＨＳＰ７０在喉癌组织中呈过度表达，表达量是自身正常喉粘膜的５倍以上。②ＨＳＰ２７和ＨＳＰ９０β在喉癌组织及正常喉粘膜中呈低水平表达，其表达量在两种组织中差异无显著性。结论ＨＳＰ７０和ＨＳＰ９０α在喉癌的致病过程中起着重要的作用。弄清它们的作用机理，将为ＨＳＰｓ用于喉癌的生物治疗提供理论依据。     

热休克蛋白与肿瘤

热休克蛋白是生物细胞在受到各种理化因子刺下产生的一类高度保守的蛋白质，具有“分子伴侣”作用。ＨＳＰ与肿瘤细胞的增殖密切相关。ＨＳＰｓ－肽复合物通过活化体内多个ＣＴＬ克隆，可望特异杀伤同一种肿瘤内所有肿瘤细胞，打破免疫耐受，消灭残存瘤组织，克服目前肿瘤中难以解决的抗原多变性及细胞异质性等困难。ＨＳＰ７０反义ＲＮＡ通过阻断肿瘤细胞ＨＳＰ７０的表达抑制肿瘤细胞增生，诱导肿瘤细胞凋亡亦为肿瘤的基因治疗提供     

反义HSC70与mtP53和肿瘤耐药关系的探讨

目的 观察反义HSC70RNA对MCF7／Adr人乳腺癌细胞耐药性影响,探讨其与突变型p53稳定性和肿瘤耐药间的关系。方法 利用DNA重组技术将人HSC70DNAt片段反向克隆至真核载体pLXSN中,构建反义人HSC70真核表达质粒pX-AHSC70。用脂质体方法将重组质粒转染至MCF7／Adr人乳腺癌细胞内,以PCR确定转染细胞中外源DNA存在后,Western blot检测HSC70蛋白的抑制程度。MTT法检测细胞耐药性的影响。p53稳定性实验分析反义HSC70RNA对突变型p53半衰的改变。结果 经G418筛选获得稳定表达反义HSC70RNA细胞株MAc70,与空载体MAX细胞相比,HSC70蛋白表达下降42％,细胞耐药性显著下降。p53稳定性实验表明,其胞内突变型p53含量下降,半衰期缩短,稳定性明显下降。结论 反义HSC70RNA能够明显降低HSC70蛋白表达,导致乳腺癌细胞的耐药性下降,提示HSC70可能通过增强突变型p53稳定性的途径而参与MCF7／Adr乳腺癌细胞的耐药。     

热休克蛋白90α(HSP90α)在大肠杆菌中的表达

目的 :探讨热休克蛋白 90α的生物学功能 ,获得高质量及充足的HSP90α蛋白。方法 :采用PCR的方法扩增HSP90αcDNA5’端 42 4bp片段 ,在起始密码子位置制造一个NcoI酶切位点 ,将PCR产物克隆到中间载体 ,再通过合适的酶切位点将其余片段连接到此载体 ,形成一个带有NcoI突变位点的HSP90αcDNA全长克隆。最终将HSP90α全部编码cDNA插入到pET 16b表达载体中。结果 :经诱导表达 ,SDS PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约 83kD处有一诱导蛋白带。WesternBlot证明表达产物与抗HSP90α抗血清有特异的免疫反应。结论 :构建成了T7启动子控制下的HSP90α表达质粒。     

入hsp90p基因的热诱导表达与染色质活化的关系

目的研究人hsp90β基因的热诱导表达与染色质活化的关系.方法采用有机汞亲和层析柱分离热诱导前后Jurkat细胞内的活性和非活性染色质,然后采用狭缝杂交技术比较热诱导前后人hsp90β基因在活性和非活性染色质中的分布,并用Northern印迹杂交的方法研究热休克诱导下的hsp90β mRNA表达.结果发现热休克诱导使细胞内人hsp90β基因在活性染色质中的含量明显增加,并与内源性的hsp90βmRNA表达水平一致.结论首次证实人hsp90β基因的热诱导表达在染色质水平受“基因开关”的调控,为研究人类细胞热应激机制提供了新的模型.     

空腹胃液中挥发性亚硝胺含量与胃癌和萎缩性胃炎关系的研究

目的验证胃癌的亚硝胺病因假说。方法在江苏省扬中县,对经过胃镜和病理确认的胃癌１０２例、萎缩性胃炎９０例、正常及浅表性胃炎１４６例,用气相色谱热能分析仪的方法,测定比较其胃液挥发性亚硝胺的含量,并用试纸法测定了胃液的ｐＨ值。结果胃液的ｐＨ值随胃粘膜的病变严重程度而上升。人群亚硝胺的总检出率在各组都很高,胃癌组、萎缩性胃炎组、正常及浅表性胃炎组的亚硝胺的总检出率分别为９９０２％、９８８９％、９８６３％。组间无显著差异（Ｐ＞００５）。但各种亚硝胺,如二甲基亚硝胺、二乙基亚硝胺、甲基卞基亚硝安、亚硝基吡咯烷、亚硝基哌啶的检出率,胃癌组、萎缩性胃炎组都比正常浅表性胃炎组有增高趋势。这种升高趋势从亚硝胺含量的比较上则更为显著。胃癌组和萎缩性胃炎组二甲基亚硝胺、二乙基亚硝胺含量及亚硝胺总量都比正常和浅表性胃炎组有显著增高（Ｐ＜００１）。结论亚硝胺可能与胃癌和萎缩性胃炎的发生有一定的关系。     

ASSOCIATION OF HELICOBACTER PYLORI INFECTION WITH PRECANCEROUS LESIONS AND STOMACH CANCER. A CASE-CONTROL STUDY IN YANGZHONG COUNTY

Previous study has raised H. pylori infection as a suspected biologic risk factor for gastric cancer. A comparative case-control study involving precancerous lesions and gastric cancer was conducted in Yanzhong county, an area with one of the highest rates of gastric cancer in China to study the relationship between the H. pylori infection and gastric cancer. Subjects in the study were all randomly selected participants of a screening program for gastric cancer sponsored by the Cancer Institute of CAMS in cooperation with Yangzhong county Hospital. Totally, 125 normal controls, 108 superficial gastritis, 111 atrophic gastritis and 110 gastric cancer patients were included in our study according to endoscopy and pathology, result. Status of H. pylori infection was evaluated by measuring Ig G antibody in plasma with ELISA assay.Our result showed Odds ratios of H. pylori infection were higher among gastritis and cancer groups, 4.5(95% CI 2. 5-7.9) for superficial gastritis, 6.3 (95% CI 3.4-12) for atrophic gastritis, 3. 3 (95% CI 1.9-5.9) for gastric cancer. It was found in our study that consumption of pickled vegetables and drinking dirty water increased the relative risk of H. pylori infection for both precancerous lesions and gastric cancer and that H. pylori infection had higher risk of atrophic gastritis and gastric cancer for males and also higher risk of atrophic gastritis for olders. Our results strongly support the casual role played by H, pylori infection in the carcinogenic process of gastric mucosa.     

热休克前后人hsp90β基因DNaseI高敏感位点的研究

１材料与方法１１材料限制性内切酶ＳａｃＩ、脱氧核糖核酸酶Ⅰ（ｄｅｏｘｙｒｉｂｏｎｕｃｌｅａｓｅⅠ，ＤＮａｓｅⅠ）为德国ＢｏｅｈｒｉｎｇｅｒＭａｎｎｈｅｉｍ公司产品；Ｊｕｒｋａｔ细胞株、人ｈｓｐ９０β基因组ＤＮＡ１１０２ｂｐ／１７３ｂｐ片段由本...