体外诱导胎盘来源间充质干细胞分化为神经元样细胞的实验研究

目的:探索体外诱导胎盘间充质干细胞(PMSCs)分化为神经元样细胞的方法。方法:消化胎盘组织,贴壁培养细胞,观测形态并用流式细胞仪检测其细胞表面标志;用含叔丁对甲氧酚(BHA)、二甲基亚砜(DMSO)及碱性成纤维细胞因子(b-FGF)的条件培养基培养细胞,诱导分化为神经元样细胞,采用免疫细胞化学的方法对分化的细胞进行鉴定。结果:胎盘组织的贴壁细胞与骨髓间充质干细胞(BMSCs)有相似形态和细胞表面标志,诱导后细胞表达神经元和星形胶质细胞标志神经元特异性的烯醇化酶(NSE)、和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论:胎盘组织中存在能分化为神经元样细胞的间充质干细胞。     

三例主动脉夹层动脉瘤病理分析

例1,女,25岁,阵发性胸骨下段、上腹胀痛7d,恶心、呕吐胃内容物1次。BP166/76mmHg。入院次日凌晨突然死亡。病理检查:心包腔内充满370ml血液及血凝块,主动脉起始部外膜向外膨出,偏中央有0·5cm线形裂口,中膜自主动脉瓣缘始向远端分层剥离,形成夹层腔,纵贯升主动脉、主动脉弓、胸主动脉,达腹主动脉膈下12cm处,其剥离面宽窄不一,占周径的60%~100%,内膜于升主动脉、主动脉弓及胸主动脉各有1个完全或不完全的横裂口,剪开时内层呈套管状或片块状翻卷,切片示双层膜粘液变性,弹力纤维和平滑肌纤维肿胀,排列方向紊乱,外膜充血、出血,纤维母细胞增生…     

间充质干细胞在人胎盘组织中的染色定位

目的探索间充质干细胞(MSCs)在人胎盘组织中的分布规律。方法取正常剖宫产之足月健康产妇的新鲜胎盘组织,按中央带、中间带、边缘带、绒毛板层、中间层和基底板层分为9组:Aa、Ab、Ac、Ba、Bb、Bc、Ca、Cb、Cc。连续切片,以抗CD166、抗CD44、抗CD29分别做免疫荧光和免疫组化染色。显微镜下观察阳性细胞分布区域,采用HPIAS-1000彩色病理图像分析系统进行图像分析。结果CD166、CD44、CD29阳性表达细胞的分布情况较一致,主要集中于血管内皮下及血管附近间质内。胎盘中央带中间层(Ab)阳性细胞较集中,阳性表达的强度较强,其OD值与其它组差异有统计学意义(P<0.05)。边缘带阳性细胞稀少,阳性表达的强度较弱。结论胎盘各部位均存在CD166、CD44、CD29阳性表达的细胞,但脐带附着处下方胎盘中间层相对其他部位可能为MSCs富集区域。     

间充质干细胞在人胎盘组织中的染色定位及整体灌注分离培养

背景:由于间充质干细胞在成人骨髓的数量以及分化能力随年龄的增长而减低,不同的胎儿组织被用来研究是否存在间充质干细胞.胎盘组织中间充质干细胞主要分布在羊膜和绒毛膜等来源于胎儿的组织,其抗原表达、分化潜能与骨髓间充质干细胞特征相似.目的:观察间充质干细胞在人胎盘组织中的分布规律.设计、时间及地点:观察性实验,于2008-02/2009-03在无锡第三人民医院烧伤研究所完成.材料:在产妇知情同意的情况下,经医院伦理委员会批准,获取临床正常剖宫产之足月健康产妇的新鲜胎盘组织,所选择的胎盘脐带附着点均在胎盘中央或稍偏位,大小及质量在正常范围内.方法:将胎盘组织分为3组,分别是中央带组即脐带附着处,边缘带组即距脐带附着点最远处和中间带组即两者之间中点处.分别全层连续切片,以抗CD166、抗CD44、抗CD29分别做免疫荧光和免疫组织化学染色,显微镜下观察阳性细胞分布区域,采用HPIAS一1000彩色病理图像分析系统进行图像分析,同时应用整体灌注的方法分离培养细胞并用流式细胞仪鉴定原代和第6代培养细胞的表面标志.主要观察指标:组织切片免疫荧光和免疫组织化学染色阳性细胞表达及分布情况,分离培养细胞的生长情况以及细胞表面标志.结果:3个标记物CD166、CD44、CD29阳性表达细胞的分布情况较一致,主要集中于血管内皮下及血管附近间质内;胎盘中央带阳性细胞较集中,阳性表达的强度较强,边缘带阳性细胞稀少,阳性表达的强度较弱.整体灌注的方法可以分离培养细胞,流式细胞仪检测结果显示,原代以及第6代胎盘间充质干细胞均表达CD105、CD106和CD166,不表达CD34和HLA-Dr,两代细胞表达强度无明显区别,与骨髓间充质干细胞的表面标志相一致.结论:胎盘各部位均存在CD166、CD44、CD29阳性表达的细胞,细胞的分布与血管有一定的相关性,脐带附着处下方胎盘组织相对其他部位可能为间充质干细胞富集区域.     

胎盘源间充质干细胞对T淋巴细胞因子分泌的影响

目的从人胎盘组织中分离培养获得间充质干细胞（MSCs）,并进一步研究其对异体T淋巴细胞细胞因子白细胞介素2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）分泌的影响。方法首先从胎盘组织中分离培养胎盘间充质干细胞（PM-SCs）,在体外观测其形态,并通过细胞表面抗原表达、分化潜能等特征进行鉴定;然后将体外分离培养扩增的PMSCs按照不同比例加入双向混合淋巴细胞培养体系（MLR）中,共同培养3d后,用ELISA法检测各组MLR上清中细胞因子IL-2与IFN-γ的含量。结果从人胎盘组织中分离培养获得MSCs,具有与骨髓间充质干细胞（BMSCs）极为相似的细胞形态及细胞表面标志,并且还具有与BMSCs相似的跨胚层分化能力,能在一定条件下被诱导分化出神经元样细胞。PMSCs与同种异体混合淋巴细胞共同培养后,能有效抑制MLR中T淋巴细胞细胞因子IL-2与IFN-γ的分泌（P〈0.05）。结论胎盘组织是MSCs的有效来源,PMSCs具有与BMSCs相似的生物学特性及免疫调节机制,为MSCs的研究提供了又一重要的细胞来源。     

胎盘源间充质干细胞对T淋巴细胞体外增殖的影响

目的从人胎盘组织中分离培养获得间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）,并进一步研究其对T淋巴细胞体外增殖的影响。方法首先从胎盘组织中分离培养胎盘间充质干细胞（PMSCs）,在体外观测其形态,并通过细胞表面抗原表达、分化潜能等特征进行鉴定;然后将体外分离培养扩增的PMSCs,按照不同比例加入双向混合淋巴细胞培养体系（mixed lymphocyte reaction,MLR）中,共同培养6d后,测定T淋巴细胞的增殖。结果从人胎盘组织中分离培养获得问充质干细胞,具有与骨髓间充质于细胞（BMSCs）极为相似的细胞形态及细胞表面标志,表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34、CD45、CD106和HLA—DR,并且还具有与BMSCs相似的跨胚层分化能力,能在一定条件下被诱导分化出神经元样细胞。PMSCs与同种异体混合淋巴细胞共同培养能抑制T淋巴细胞的体外增殖。结论胎盘组织是MSCs的有效来源,PMSCs具有与BMSCs相似的生物学特性及免疫调节机制。它为问充质干细胞的研究提供了又一重要的细胞来源。     

间充质干细胞在人胎盘组织中的染色定位及整体灌注分离培养

背景：由于间充质干细胞在成人骨髓的数量以及分化能力随年龄的增长而减低，不同的胎儿组织被用来研究是否存在间充质干细胞。胎盘组织中间充质干细胞主要分布在羊膜和绒毛膜等来源于胎儿的组织，其抗原表达、分化潜能与骨髓间充质干细胞特征相似。 目的：观察间充质干细胞在人胎盘组织中的分布规律。 设计、时间及地点：观察性实验，于2008-02/2009-03在无锡第三人民医院烧伤研究所完成。 材料：在产妇知情同意的情况下，经医院伦理委员会批准，获取临床正常剖宫产之足月健康产妇的新鲜胎盘组织，所选择的胎盘脐带附着点均在胎盘中央或稍偏位，大小及质量在正常范围内。 方法：将胎盘组织分为3组，分别是中央带组即脐带附着处，边缘带组即距脐带附着点最远处和中间带组即两者之间中点处。分别全层连续切片，以抗CD166、抗CD44、抗CD29分别做免疫荧光和免疫组织化学染色，显微镜下观察阳性细胞分布区域，采用HPIAS-1000彩色病理图像分析系统进行图像分析，同时应用整体灌注的方法分离培养细胞并用流式细胞仪鉴定原代和第6代培养细胞的表面标志。 主要观察指标：组织切片免疫荧光和免疫组织化学染色阳性细胞表达及分布情况，分离培养细胞的生长情况以及细胞表面标志。 结果：3个标记物CD166、CD44、CD29阳性表达细胞的分布情况较一致，主要集中于血管内皮下及血管附近间质内；胎盘中央带阳性细胞较集中，阳性表达的强度较强，边缘带阳性细胞稀少，阳性表达的强度较弱。整体灌注的方法可以分离培养细胞，流式细胞仪检测结果显示，原代以及第6代胎盘间充质干细胞均表达CD105、CD106和CD166，不表达CD34和HLA-Dr，两代细胞表达强度无明显区别，与骨髓间充质干细胞的表面标志相一致。 结论：胎盘各部位均存在CD166、CD44、CD29阳性表达的细胞，细胞的分布与血管有一定的相关性，脐带附着处下方胎盘组织相对其他部位可能为间充质干细胞富集区域。     

P16,Ki67与HPV16/18在宫颈病变中的表达及其临床意义

目的:研究多肿瘤抑制基因P16、细胞核增殖抗原Ki67及高危型人乳头状瘤病毒(high riskhuman papilloma virus,HPV16/18)在宫颈病变中的表达和临床意义。方法:采用免疫组织化学Elivision两步法检测P16和Ki67在宫颈非特异性炎症、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelialneoplasia,CIN)I级、Ⅱ级和Ⅲ级及宫颈鳞状细胞癌中的表达,用原位杂交法检测HPV16/18的表达。结果:P16蛋白表达在非特异性炎症、CINⅠ级、Ⅱ级和Ⅲ级及宫颈癌中的阳性率分别为20.0%,55.6%,93.6%和100.0%;Ki67蛋白表达在非特异性炎症、CINⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级及宫颈癌中的阳性率分别为17.6%,61.1%,89.4%和100.0%,不同组别间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。而且P16和Ki67的阳性表达率及染色强度呈递增趋势,表达存在分层现象。HPV16/18在非特异性炎症、CINⅠ级、Ⅱ级、Ⅲ级及宫颈癌中的阳性率分别为30.0%,61.1%,82.9%和100.0%,宫颈病变中HPV16/18的阳性率显著高于非特异性炎症组。结论:P16和Ki67蛋白检测作为宫颈病变的有效的生物学标记,可联合HPV16/18 DNA检测应用于宫颈癌及其癌前病变的筛查和诊断中。     

伴有梭形细胞分化的小肠原发T细胞淋巴瘤1例

胃肠道淋巴瘤多发生于胃,小肠原发少见,且多为B细胞型,由于其起病隐匿、无典型的临床表现、预后差、目前缺乏有效的小肠检查手段,漏诊率及误诊率比较大.肠病相关性T细胞淋巴瘤伴有梭形细胞分化的病例尚未见报道,本文就无锡市第三人民医院最近的1例伴有梭形细胞分化的肠病相关性T细胞淋巴瘤进行分析讨论.     

HMGB1与MMP-9在早期胃癌患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨血清高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在早期胃癌中的表达及临床意义。 方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测92例早期胃癌患者血清HMGB1和MMP-9水平,并与40例胃良性病变患者和30例健康对照者比较。 结果胃癌组患者血清HMGB1与MMP-9水平明显高于胃良性病变组和健康对照组（P均<0.05）,而胃良性病变组与对照组差异不明显（P>0.05）;相关分析显示,胃癌患者血清HMGB1和MMP-9水平之间呈正相关（P<0.01）,血清HMGB1和MMP-9的表达水平与淋巴结转移和胃癌的分化程度密切相关（P<0.05）,胃癌患者手术后HMGB1和MMP-9水平较手术前明显下降（P<0.05）。 结论HMGB1和MMP-9与早期胃癌的发生发展有关,检测血清HMGB1和MMP-9水平对于早期胃癌的辅助诊断、疗效监测及预后判断具有重要的临床意义。