体外无肝素连续性肾脏替代治疗的相关因素对人凝血功能的影响

【目的】体外探讨无肝素连续性肾脏替代治疗（CRRT）过程中相关因素时人凝血功能的影响。【方法】以健康人血样本为研究对象，等比例加入置换液、聚砜膜空心纤维后通过恒温旋转的方式体外模拟CRRT过程中相关因素对血液凝血功能的影响，根据影响因素不同实验分为碳酸氢钠、聚矾膜空心纤雏及血流切应力三个组，分别检测PT、APTT及血小板计数值三个指标。【结果】随着碳酸氧钠浓度的增加，其对应实验小组血样本的PT、APTT及血小板计数值均较正常对照组显著有显著性（P〈0．05）；随着空心纤维数目的增加，对应的实验小组PT、APTT值及血小板计数值均较正常对照组显著有显著性（P〈20．05）；随着旋转速度的增加，对应实验小组的血小板计数值与正常对照组差异有显著性（P〈0．05）。【结论】随着CRRT置换液中碳酸氢钠浓度、聚砜膜面积及血流切应力的改变，机体凝血功能可以受到显著影响。     

1 108例终末期肾脏疾病血液透析病人原发疾病构成及相关因素分析

目的 回顾性研究终末期肾脏疾病（end stage renal disease，ESRD）血液透析病人原发疾病构成及其相关因素。方法 收集ESRD血液透析病人1108例，分析其原发疾病构成、年龄、性别、透析治疗持续时间、转归、生存率和死亡原因。结果 301例病人透析时间超过3个月，其中43．9％仍在进行血液透析治疗，最长者已存活13年；13．0％病人已行肾脏移植；19．9％转至外院治疗；7．3％改为腹膜透析；1．3％因经济困难放弃治疗；14．6％病人死亡。ESRD维持性血液透析病人1年生存率为93．53％，3年生存率为68．92％。5年生存率62．51％。死亡原因为心血管事件占54．5％，脑血管意外占20．5％。结论 本组病人以中、老年为主，男性多见。ESRD血液透析病人主要原发疾病为慢性肾小球肾炎，主要死亡原因为心血管事件和脑血管意外。     

去甲斑蝥素对蛋白负荷肾病大鼠干预的研究

目的 观察去甲斑蝥素对蛋白负荷肾病大鼠蛋白尿及肾脏病理的影响。 方法 摘除SD大鼠右肾，腹腔注射牛血清白蛋白，建立蛋白负荷肾病模型后分成模型组和去甲斑蝥素组；对照组仅注射生理盐水。检测各时间点各组大鼠尿蛋白定量（24 h）。第5周末处死大鼠，检测血常规及生化指标；肾组织行光镜、电镜及免疫荧光染色作病理学检查。 结果 与对照组比较，模型组肾重/体重、各时间点尿蛋白定量（24 h）、肾小球硬化指数、小管间质病理损伤积分均显著升高（P均 ＜ 0.01）， 血清白蛋白（Alb）显著降低（P ＜ 0.01)。电镜结果显示模型组小鼠肾小球系膜区有明显电子致密物沉积，足突融合；免疫荧光显示IgG和C3沉积于系膜区（3+～4+）。去甲斑蝥素干预后，肾病大鼠除Alb升高（P ＜ 0.01）外，上述其余指标均显著降低（P ＜ 0.05或0.01)；系膜区有散在电子致密物沉积，足突灶状融合；IgG和C3免疫荧光染色强度减弱。各组间Scr、BUN、ALT及血常规差异均无统计学意义。 结论 去甲斑蝥素能显著降低蛋白负荷肾病大鼠尿蛋白，减轻其肾小管间质病理损伤，且无肝肾毒性及骨髓抑制等严重不良反应。     

葡萄籽原花青素对糖尿病大鼠糖基化终产物及肾脏结缔组织生长因子的影响

系统性红斑狼疮（SLE）伴抗磷脂综合征（antiphospholipid syndrome,APS）并发视网膜血管阻塞较为罕见,现报告1例。患者,女,15岁,因反复水肿3个月,视物模糊20 d入院。入院时双眼视力0.01,双下肢轻度水肿。实验室检查BUN 21.05 mmol/L,Scr 138.2μmol/L.UA 369.8μmol/L,Alb 22.5 g/L,Glo 28.6 g/L,TG 4.52 mmol/L,     

转化生长因子β1短发夹RNA对白蛋白刺激人肾近曲小管上皮细胞细胞因子表达的影响

目的 研究pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1（TGF-β1）短发夹RNA（shRNA）对人血清白蛋白（HSA）致人肾近曲小管上皮细胞（HK2细胞）增殖，TGF-β1、结缔组织生长因子（CTGF）和纤连蛋白（FN）表达的影响，并探讨有关机制。方法 构建TGF-β1shRNA的pcDU6载体质粒，体外培养HK2细胞株。采用脂质体转染将表达TGF-β1shRNA的pcDU6质粒载体（pcDU6-A1-A2和peDU6-B1-B2）分别导人实验组细胞。用HSA（5g／L）刺激HK2细胞12h或24h。四甲基偶氮唑盐（MTF）比色法测定细胞增殖水平。RT-PCR半定量分析HK2细胞中TGF-β1、CTGF和FNmRNA的表达水平；双抗夹心酶联免疫吸附法检测HK2细胞培养液中TGF-β1及FN蛋白质水平。结果 HK2细胞在HSA刺激下，其TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显上调，培养液中TGF-β1和FN的蛋白质含量亦明显升高（P〈0．05）。与pcDU6空载体组比较，pcDU6载体质粒介导的TGF-β1shRNA干扰组TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显下调（P〈0．05）。TGF-β1shRNA转染HK2细胞后12h或24h，细胞培养液中TGF-β1和FN蛋白质含量明显下降，HK2细胞增殖被部分抑制（P〈0．05）。在细胞增殖、TGF-β1、CTGF及FN基因表达方面，TGF-β1shRNA干扰组组间比较，以及pcDU6空载体转染组与HSA刺激组比较，差异均无统计学意义。结论 peDU6载体质粒介导的TGF-β1shRNA能够明显抑制HSA刺激下HK2细胞增殖、TGF-β1、CTGF和FN基因的表达。HSA刺激HK2细胞增殖及CTGF和FN基因的过表达可能通过TGF-β1介导。     

人正、反义转化生长因子beta1基因真核表达载体的构建

目的 :构建人转化生长因子beta 1(TGFβ1)正、反义基因真核表达载体。方法 :从人胎脑的cDNA文库中扩增出TGFβ1共 12 84bp长的DNA片段后 ,与T载体直接进行高效连接 ,并测序证实无突变。接着利用TGFβ1引物两端所设计的酶切位点将目的片段定向亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1( )。构建的正反义表达重组体 (pcDNA3.1 TGFβ1和pcDNA3.1 antiTGFβ1)经限制性内切酶消化证实其中有目的片段完整插入。结果 :本实验成功构建了人正、反义TGFβ1基因真核表达载体。结论 :人正、反义TGFβ1基因真核表达载体的构建 ,为今后研究腹膜纤维化的防治奠定了实验基础。     

石蜡切片免疫荧光染色在肾脏病理诊断中的应用

我们应用石蜡切片免疫荧光染色法,对肾活检组织进行免疫荧光染色,取得了较好的效果,现报道如下。1材料与方法1.1材料选用中南大学湘雅二医院肾脏病研究所肾活检标本35例,其中狼疮性肾炎(LN)10例,乙肝相关性肾炎(HBVGN)5例,IgA肾病(IgAGN)10例,膜性肾病(MN)5例,肾小球轻微病变(G     

人腹膜间皮细胞的培养及特征

目的 :建立人腹膜间皮细胞 (HPMC)培养模型 ,检测HPMC细胞外基质蛋白及白细胞介素 (IL - 8)的表达。方法 :采用胰蛋白酶 -EDTA消化法 ,从人的腹膜组织中分离HPMC。采用形态学和链霉菌抗生物素蛋白 过氧化物酶连接法 (即SP法 ) ,对培养细胞进行鉴定。采用SP法检测HPMC纤维连接蛋白 (FN)、胶原Ⅲ和胶原V及转化生长因子 (TGF) β1表达。采用逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)检测HPMCIL - 8mRNA和FNmRNA的表达。结果 :光镜示细胞融合后呈多边形 ,超微结构下可见丰富的微绒毛和内质网 ,免疫组化染色结果示HPMC可表达角蛋白 ,波形蛋白 ,胶原Ⅲ ,FN ,TGFβ1蛋白 ,Ⅷ因子、胶原V表达阴性。人腹膜间皮细胞亦表达FNmRNA和IL - 8mRNA。结论 :HPMC培养模型的建立 ,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及IL - 8在腹膜透析中的作用提供理论依据。     

丹参及生脉液对阿霉素所致大鼠肾小球硬化的实验性治疗作用

观察丹参及生脉液对阿霉素所致 Ｓ Ｄ 大鼠肾小球硬化实验性治疗作用。摘除大鼠左肾７ ｄ 后,尾静脉注射阿霉素（６ ｍ ｇ·ｋｇ － １） 。隔日腹腔注射丹参及生脉液,８ 周后处死大鼠。观察血红蛋白（ Ｈｂ） 、血尿素氮（ Ｂ Ｕ Ｎ） 、胆固醇（ Ｃｈ） 及２４ ｈ 尿蛋白含量; Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法测定肾皮质Ⅳ型胶原（ Ⅳｃｏｌ ．） 及层粘连蛋白（ Ｌ Ｎ） ;用免疫组化法,计算机图象分析肾小球系膜区Ⅳｃｏｌ ．及 Ｌ Ｎ 含量。结果显示：模型丹参及模型生脉液组肾皮质、肾小球系膜区Ⅳｃｏｌ．及 Ｌ Ｎ 含量明显低于模型对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０５） ,高于正常对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０１） 。提示丹参及生脉液能减轻阿霉素所致肾小球硬化的程度。