多发性骨髓瘤微小RNA基因序列突变的检测及其意义

目的 了解多发性骨髓瘤(MM)患者微小RNA(miRNA)基因突变率及其临床意义.方法 采用聚介酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)银染法检测4种人类MM细胞系(KM-3、ARH-77、U266、RPMI8226)、20例MM患者及20例血液学正常者12种miRNA基因突变,实验结果结合临床分析.结果 细胞系KM-3、RPMI8226检测出miRNA-335基因突变;MM患者中检出miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变各1例,总突变率为15.00%(3/20);正常对照组未检出突变.病例组突变者中1例确诊4个月左右死亡,2例取材时已处于疾病终末期.结论 miRNA基因在MM中存在较高的突变率,miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变可能与MM发病机制有关;发生突变的患者(表现)临床预后差,对miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变的检测可能有助于对MM病程进展和预后的分析.     

多发性骨髓瘤微小RNA基因序列突变的检测及其意义

 目的　了解多发性骨髓瘤（MM）患者微小RNA（miRNA）基因突变率及其临床意义。方法　采用聚合酶链反应单链构象多态性（PCR-SSCP）银染法检测4种人类MM细胞系（KM-3、ARH-77、U266、RPMI8226）、20例MM患者及20例血液学正常者12种miRNA基因突变,实验结果结合临床分析。结果　细胞系KM-3、RPMI8226检测出miRNA-335基因突变;MM患者中检出miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变各1例,总突变率为15.00 %（3／20）;正常对照组未检出突变。病例组突变者中1例确诊4个月左右死亡,2 例取材时已处于疾病终末期。结论　miRNA基因在MM中存在较高的突变率,miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变可能与MM发病机制有关;发生突变的患者（表现）临床预后差,对miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变的检测可能有助于对MM病程进展和预后的分析。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂减轻糖尿病肾间质巨噬细胞的浸润

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂对糖尿病肾脏的保护作用。方法 STZ尾静脉注射建立大鼠糖尿病模型。用免疫组化方法检测大鼠肾脏巨噬细胞的表达。比较血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗组与非治疗组肾脏CD68+巨噬细胞的表达。结果糖尿病成模后,巨噬细胞在肾间质的表达明显增加。血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗组较非治疗组肾间质巨噬细胞的浸润减少加(P<0.01),伴随蛋白尿的减轻。结论血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂可减轻糖尿病大鼠肾脏炎症浸润。     

氯化镉对人肾小管上皮细胞形态及生存率的影响

目的 探讨氯化镉对人肾小管上皮细胞( HK-2细胞)形态及生存率的影响. 方法 用DMEM培养液传代培养 HK-2 细胞,生长至 70% ~80%融合时随机分成6 个组, A、B、C、D、E 组分别加入5 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L氯化镉终浓度,每组2 个平行细胞瓶,继续培养24 h,终止培养. F组不加氯化镉,作为对照. 培养24 h后观察细胞形态的变化,并采用MTT试验检测各组光密度值( OD值) ,计算细胞存活率. 结果 对照组、A组、B组的HK-2细胞形态均无明显变化;C组 HK-2 细胞开始发生形态学变化,细胞活力下降. C组、D组、E组HK-2细胞存活率低于对照组(P<0.01),A组、B组HK-2细胞存活率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 20 μmol/L浓度以上的氯化镉对HK-2细胞造成损伤,致细胞形态破坏,细胞存活率降低.     

镉作业观察对象尿镉和肾小管损伤效应标志物6年追踪观察

目的 观察职业性镉作业观察对象尿镉及肾小管损伤效应标志物水平的变化, 比较脱离镉作业6年后镉作业观察对象尿肾小管损伤分子-1(KIM-1)的水平。
方法 选取8例职业性镉作业观察对象, 对2009-2014年度的尿镉、尿β₂-微球蛋白及尿维生素A结合蛋白(即视黄醇结合蛋白)水平进行跟踪观察。2014年用ELISA法检测观察对象及正常对照组尿肾小管损伤分子-1(KIM-1)的水平。
结果 停止镉作业后, 观察组的尿镉平均水平略有下降趋势, 但各年度间差异无统计学意义(P>0.05)。停止镉接触后, 观察组尿β₂-MG水平和尿视黄醇结合蛋白水平一直维持在正常范围。观察组各年度尿β₂-MG水平、尿视黄醇结合蛋白水平差异均无统计学意义(P>0.05)。停止镉接触6年后, 观察组尿KIM-1的水平(1.37 ±0.61) ng/mL, 对照组为(0.62 ±0.35) ng/mL, 两组差异有统计学意义(P < 0.05)。
结论 镉作业观察对象脱离镉接触后, 尿镉水平下降不明显, 传统的肾小管功能损害标志物尿β₂-MG及尿视黄醇结合蛋白水平无明显变化, 但尿KIM-1仍存在异常。
     

Toll 样受体2激动剂对糖尿病肾损害影响的小鼠实验研究

目的：探讨 Toll 样受体2激动剂对糖尿病小鼠肾损害的影响。方法链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立小鼠糖尿病模型。将糖尿病小鼠分成两组,糖尿病对照组（DM 组）和 Toll 样受体2激动剂干预组（干预组）。用免疫组化方法检测小鼠肾脏巨噬细胞的表达。比较干预组与糖尿病对照组小鼠的血清肌酐、尿素氮、尿白蛋白排泄率以及肾脏巨噬细胞的表达。结果干预组血清肌酐、尿素氮水平以及肾脏巨噬细胞的表达均较 DM 组增加（ P <0.01）,伴随蛋白尿的加重。病理学观察结果发现：在 DM 组,可以看到肾小球体积增大,肾小球囊腔缩小,系膜区增宽,基底膜增厚,以及肾小管肥大。在干预组,上述变化更为显著。结论 Toll 样受体2激动剂加重了糖尿病小鼠蛋白尿、肾小球硬化、肾小管损伤、炎症细胞浸润,证实 Toll 样受体2激动剂可加重糖尿病小鼠肾损害。     

肾损伤分子-1 mRNA在染镉肾小管细胞的表达

目的探讨氯化镉对人肾小管上皮细胞肾损伤分子-1(KIM-1)mRNA表达的影响。方法人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)用含10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养液传代培养。根据培养液氯化镉浓度分组(10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)。培养24 h后进行形态观察及生存率检测,用RT-PCR方法检测各组肾小管上皮细胞KIM-1 mRNA的表达。结果氯化镉对人肾小管上皮细胞造成损伤,细胞形态破坏,细胞存活率降低。20μmol/L、40μmol/L浓度氯化镉可增加肾小管上皮细胞KIM-1 mRNA的表达。结论氯化镉可引起人肾小管上皮细胞KIM-1 mRNA表达,预示KIM-1可作为镉致肾小管损伤效应标志物之一。     

苯所致慢性粒细胞白血病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的动态变化

  目的  观察苯所致白血病慢性期患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞（Tregs）的动态变化。
  方法  对确诊苯所致慢性粒细胞白血病患者,在用伊马替尼治疗前及治疗获得主要分子学缓解时进行外周血CD4+CD25+Tregs检测,并分别与健康对照者进行比较。
  结果  应用伊马替尼治疗前,苯所致慢性粒细胞白血病患者外周血CD4+CD25+Tregs表达水平为（7.04 ± 0.36）%,高于健康对照组的（5.10 ± 0.69）%,差异有统计学意义（P < 0.01）,而达到分子学缓解患者的外周血CD4+CD25+Tregs表达水平为（1.31 ± 0.68）%,低于治疗前和健康对照组（P < 0.01）。
  结论  苯所致慢性粒细胞白血病患者应用伊马替尼治疗后外周血CD4+CD25+Tregs随病情的缓解而减少,CD4+CD25+Tregs的检测可以作为苯所致慢性粒细胞白血病治疗缓解的监测指标之一。
     

缺血性肾病患者致终末期肾病影响因素分析

目的评价各种危险因素与缺血性。肾病的关系,从而有效地预防及早期干预,减缓终末期肾病的发生。方法选取收治的33例缺血性肾病患者,收集其生活习惯、既往史、家族史、临床资料、合并症。结果缺血性肾病的发生和年龄、高血压、糖尿病、高血脂、动脉硬化、肥胖、吸烟等因素密切相关。结论缺血性肾病的主要危险因素包括：慢性心功能不全、高血压、高血脂母糖尿病、肺部感染、抗凝治疗、肾动脉血管支架植入。有效地预防及早期干预高血压、糖尿病、高血脂等因素,纠正心功能不全及积极控制感染是降低缺血性肾病和减缓慢性肾衰竭发生的有效途径。     

多发性骨髓瘤微小RNA基因序列突变的检测及其意义

目的 了解多发性骨髓瘤(MM)患者微小RNA(miRNA)基因突变率及其临床意义.方法 采用聚介酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)银染法检测4种人类MM细胞系(KM-3、ARH-77、U266、RPMI8226)、20例MM患者及20例血液学正常者12种miRNA基因突变,实验结果结合临床分析.结果 细胞系KM-3、RPMI8226检测出miRNA-335基因突变;MM患者中检出miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变各1例,总突变率为15.00%(3/20);正常对照组未检出突变.病例组突变者中1例确诊4个月左右死亡,2例取材时已处于疾病终末期.结论 miRNA基因在MM中存在较高的突变率,miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变可能与MM发病机制有关;发生突变的患者(表现)临床预后差,对miR-19a、miR-19b和miRNA-335基因突变的检测可能有助于对MM病程进展和预后的分析.