复方三叶香茶菜片治疗慢性乙型肝炎98例疗效观察

目的 观察复方三叶香茶菜片对慢性乙型肝炎的疗效.方法 用复方三叶香茶菜片治疗慢性乙型肝炎98例,比较治疗前后其ALT,HBV-DNA拷贝值.结果 本品治疗后患者ALT复常和(或)HBV-DNA转阴者占62.24%;血清ALT治疗前后差别显著.结论 复方三叶香荼菜片为治疗慢性乙型肝炎的有效药物,对改善肝功能有一定疗效,并可能具有一定抗病毒作用.     

z-VAD-FMK与Necrostatin-1联合对MODS大鼠器官的保护作用研究

目的：探讨z-VAD-FMK与Necrostatin-1联合对MODS大鼠器官的保护作用.方法：采用失血性休克-内毒素“二次打击”建立大鼠MODS动物模型.将80只雄性SD大鼠随机分为4组：z-VAD-FMK组、Nec-1组、z-VAD-FMK＋Nec-1组、模型组,每组20只,观察72 h死亡率.另取40只雄性SD大鼠随机分为5组：假手术组、z-VAD-FMK组、Nec-1组、z-VAD-FMK＋Nec-1组、模型组,每组8只,分别于注射内毒素和生理盐水后24 h收集血清和肝、肺、肠组织.全自动生化仪检测血清ALT、AST的变化,血气分析仪检测PaO2的变化,ELISA检测血清TNF-α、IL-1β的变化,HE染色观察肝、肺、肠组织的病理学改变.结果：大鼠遭受失血性休克-内毒素“二次打击”后,血清ALT、AST明显升高（P＜0.01）,PaO2显著下降（P＜ 0.01）,血清炎性因子TNF-α、IL-1β水平明显升高（P＜0.01）.光镜下见肝窦明显扩张、淤血,肝小叶结构紊乱,肝细胞部分变性、坏死;肺泡壁结构被破坏,肺间质充血,大量炎性细胞浸润;肠绒毛结构被破坏,部分绒毛顶部细胞、隐窝细胞变性、坏死,大量炎性细胞浸润.而z-VAD-FMK组、Nec-1组及z-VAD-FMK＋Nec-1组ALT、AST升高程度、PaO2下降程度、TNF-α、IL-1β升高程度均显著低于模型组（P＜0.01）,以z-VAD-FMK＋Nec-1组变化最明显.72 h死亡率均较模型组显著降低（P＜0.05）.结论：z-VAD-FMK、Nec-1、z-VAD-FMK＋Nec-1联合治疗均可显著减轻MODS大鼠的器官损伤,联合治疗效果更佳.     

Necrostatin-1对创伤失血性休克大鼠肝脏高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 探讨程序性坏死特异性抑制剂-1(necrostatin-1,Nec-1)对创伤失血性休克大鼠肝脏HMGB-1的影响及其机制.方法 采用创伤失血性大鼠休克模型,将96只雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为假手术组、DMSO组、Nec-1组,每组32只.假手术组仅进行麻醉、分离血管、结扎血管,并不进行创伤失血和再灌注.DMSO组建立创伤失血性休克大鼠模型,再灌注前5min前股静脉给予DMSO溶剂.Nec-1组于再灌注5 min股静脉给予Nec-1(1 mg/kg).于再灌注后分别在2、8、16、24 h各处死动物8只,取动物血清及肝脏组织.检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平;HE染色观察肝脏病理变化;透射电镜观察再灌注后24h后细胞器水平的细胞坏死;酶联免疫分析法(ELISA)分析血清中HMGB-1含量;蛋白质免疫印迹法(western blotting)分别检测肝脏组织中胞质和总蛋白的HMGB-1含量.结果 Nec-1组与DMSO组比较,血清ALT在8 h(P＜0.05)、16 h(P＜0.01)、24 h(P＜0.01)表达较低,Nec-1组血清AST在8 h(P＜0.01)、16h (P ＜0.01)、24h(P＜0.01)表达较DMSO组低;与DMSO组比较,Nec-1组血清HMGB-1在8 h(P＜0.05)、16 h(P＜0.01)、24h (P＜0.01)有明显下降.光镜及电镜下DMSO组及Nec-1组可见肝小叶结构破坏,淤血,炎性细胞浸润及细胞器损伤,Nec-1组肝组织损伤明显减轻;与DMSO组比较,Nec-1组肝细胞中胞质蛋白HMGB-1在8h (P＜0.01)、16h (P＜0.01)、24 h(P＜0.01)有明显下降,Nec-1组总蛋白HMGB-1在8h (P＜0.05)、24 h(P＜0.05)有明显下降.结论 Nec-1可以有效降低创伤失血性休克对肝脏的损伤,减少HMGB-1的释放,有效保护肝细胞.     

肝细胞核因子3β调控小鼠体内HBV转录和复制的实验研究

目的 应用复制型HBV小鼠模型观察肝细胞核因子3β(HNF3β)对小鼠体内HBV转录和复制的调控作用.方法 通过尾静脉高压注射法将复制型HBV重组质粒pHBV4.1和大鼠HNF3β表达质粒pCMVHNF3β导入小鼠体内,用Northern吸印杂交检测小鼠肝组织中HBV 3.5kb、2.4/2.1kb、0.7kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平.结果 经小鼠尾静脉高压注射法体内转染质粒pHBV4.1后,小鼠肝组织中检测到HBV 3.5kb、2.4/2.1kbmRNA转录信号和HBV DNA复制中间体信号;与共转染pHBV4.1和空载质粒pCMVpA对照组相比,共转染pHBV4.1和pCMVHNF3β使HNF3β过量表达,明显降低了小鼠体内HBV RNA转录和DNA复制水平.结论 肝富集转录因子HNF3β对小鼠体内HBV转录和复制具有抑制作用,有可能成为今后抗HBV生物治疗新的靶点.     

Necrostatin －1对创伤失血性休克大鼠肝脏巨噬细胞炎性蛋白－1α表达的影响

目的：探讨程序性坏死特异性抑制剂－1（necrostation－1, Nec－1）对创伤失血性休克大鼠肝脏巨噬细胞炎性蛋白－1α（ MIP－1α）的影响及其机制。方法采用左下肢股骨、胫骨骨折及腹部软组织损伤并失血、再灌注的方法制备大鼠创伤失血性休克模型,将40只雄性SD大鼠按随机数字表法随机分为模型组、DMSO组、Nec－1组、假手术组,每组10只。假手术组仅进行麻醉、分离血管、结扎血管,并不进行创伤失血和再灌注。模型组为创伤失血性休克大鼠模型,不进行任何干预。 DMSO组建立创伤失血性休克大鼠模型,再灌注前5 min前股静脉给予DMSO溶剂。 Nec－1组于再灌注5 min股静脉给予Nec－11 mg／kg。于再灌注后24 h取动物血清及肝脏组织。检测血清丙氨酸氨基转移酶（ ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（ AST）水平;HE染色观察肝脏病理变化;酶联免疫分析法（ ELISA）分析血清MIP－1α含量;RT－PCR技术检测肝脏组织MIP－1αmRNA含量;蛋白质免疫印迹法（ Western blotting）检测肝脏组织MIP－1α含量。结果模型组血清ALT、AST及血清MIP－1α含量与DMSO组比较差异无统计学意义（P＞0．05）, Nec－1组24 h血清ALT、AST及血清MIP－1α含量较模型组及DMSO组有明显下降（P＜0.05）。光镜下模型组及DMSO组可见肝小叶结构破坏、淤血、炎性细胞浸润,Nec－1组肝组织损伤明显减轻。 Nec－1组MIP－1αmRNA及MIP－1α蛋白含量低于模型组及DMSO组（P＜0.05）。结论Nec－1可以有效降低创伤失血性休克对肝脏的损伤,减少MIP－1α蛋白的表达,减少免疫细胞对组织的浸润及破坏。     

中药配合肝动脉栓塞化疗辅助治疗原发性肝癌随机对照试验的质量评价

目的:对中药配合肝动脉栓塞化疗(Transcatheter Arterial Chemoembolization,TACE)辅助治疗原发性肝癌随机对照试验(Randomized controlledtrial,RCT)文献进行评价。方法:对国内外公开发表的有关中药配合TACE辅助治疗原发性肝癌的随机对照试验进行检索,检索数据库包括Cochrane图书馆临床对照试验库,MED-LINE、CBM、CNKI和VIP电子数据库。手工检索中文相关期刊以及附加检索相关会议论文集。质量评价采用Jadad评分量表、CONSORT标准和其他自拟评价指标进行分析。结果:共纳入103篇RCTs,其中Jadad评分得5分有1篇文献,3分1篇,2分10篇,71篇1分,其余20篇均为0分,有3篇文献报告了分配隐藏。按CONSORT标准,仅1篇(0.97%)RCT描述了如何产生随机顺序,没有RCT报道如何执行随机,其中1篇为半随机,有1篇(0.97%)RCT采用安慰剂对照,有54篇(52.43%)报道了终点指标,分别各有2篇(1.94%)报道了双盲和单盲,14篇(13.59%)进行了具体统计量计算,54篇(52.43%)提供了随访记录,7篇(6.80%)报道了阴性结果,16篇(15.53%)报道不良事件,仅有1篇(0.97%)进行样本含量计算与意向性分析(ITT),有2篇(1.94%)进行分层分析,属于多中心的仅有1篇(0.97%),均未进行伦理审批和知情同意。描述了中医证型的有3篇(2.91%)。结论:目前中药配合TACE辅助治疗原发性肝癌临床研究的方法学和报告质量尚低,且多数RCT可能存在选择性偏倚和测量性偏倚,期待更多高质量的随机双盲对照试验为临床应用提供可靠的依据。     

TLR4对肝脏缺血再灌注损伤大鼠肝组织Th17细胞相关细胞因子表达的影响

目的 观察Toll样受体4（TLR4）对肝脏缺血再灌注大鼠肝组织Th17细胞相关因子[IL-17A、IL-23、孤核儿相关受体（RORrt）]表达的影响,并探讨其可能机制.方法 将40只健康雄性SD大鼠分为4组各10只,假手术组只分离同侧的颈总动脉和股动静脉,并进行相应插管注入相同剂量的肝素;模型组、抗TLR4组、同型抗体组均制备创伤失血性休克再灌注肝损伤模型,抗TLR4组、同型抗体组分别于再灌注前10 min经股静脉注入TLR4抗体50μg、同型对照抗体50 μg,整个过程用微量注射器缓慢注射.于12 h后处死取材.采用Western blot法检测各组肝组织TLR4蛋白,ELISA检测IL-17A、IL-23蛋白,观察IL-17A、IL-23、RORrt mRNA,并对模型组、抗TLR4组、同型抗体组IL-17A、IL-23、RORrt进行相关性分析.结果 模型组TLR4蛋白表达较假手术组相比明显升高（P＜0.01）,应用抗TLR4抗体后表达明显减少（P＜0.01）,而同型抗体组较模型组无明显差异（P＞0.05）.与假手术组比较,模型组、抗TLR4组、同型抗体组IL-17A、IL-23蛋白及mRNA表达升高,RORrt mRNA表达升高;与模型组比较,抗TLR4组IL-17A、IL-23蛋白及mRNA表达降低,RORrt mRNA表达降低（P＜0.05或0.01）.IL-23水平与IL-17A水平呈正相关,IL-23 mRNA水平与RORrt mRNA呈正相关.结论 中和TLR4可减少IL-23、IL-17A、RORrt的表达;机制可能是中和阻断TLR4可通过降低IL-23的表达,影响Th17特异性转录因子RORrt,进而降低肝脏缺血再灌注损伤大鼠肝组织Th17/IL-17A的表达.     

中药配合肝动脉栓塞化疗治疗原发性肝癌随机对照试验的Meta分析

目的评价中药配合肝动脉栓塞化疗（TACE）与单纯TACE比较治疗原发性肝癌的有效性和安全性。方法采用Cochrane系统评价方法，计算机检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库、MEDLINE、CBM、CNKI和VIP；同时手检相关期刊和会议论文集，纳人有关中药配合TACE治疗原发性肝癌的随机对照试验，质量评价按照Cochrane系统评价员手册4．2．2版推荐的质量评价标准评价纳入研究质量，并对同质研究进行Meta分析。结果共检索到符合纳人标准的中文文献37篇（2653例患者）。文献质量评价结果显示，除2篇研究质量为B级外，其余35篇均为C级。Meta分析结果显示，中药配合TACE治疗在生存期、近期化疗有效率（CR＋PR）、生存质量、临床症状改善和防止不良反应发生（如防止白细胞下降）等方面均优于单纯TACE治疗。亚组分析发现：TACE次数〈3的亚组在生存期和临床症状的改善方面优于TACE次数〉3的亚组；而TACE次数〉3的亚组在近期化疗有效率（CR＋PR）与生存质量改善方面优于TACE次数〈3的亚组，在防止不良反应发生如防止白细胞下降方面两组效果相似，可能与样本含量较少有关。结论中药配合TACE治疗原发性肝癌优于单纯TACE治疗；TACE次数〈3的亚组在生存期、临床症状改善方面优于TACE次数〉3的亚组。但由于纳入试验的方法学质量普遍较低，期待更多设计合理、严格执行的大样本随机双盲对照试验提供高质量的证据。     

脂多糖诱导持续血小板减少模型的建立及对血小板生成素的影响

目的 建立脂多糖（LPS）诱导小鼠持续内毒素血症血小板减少（TCP）模型,观察小鼠模型平均血小板体积（MPV）、血小板生成素（TPO）的变化。方法 C57/BL小鼠随机分为4组,低剂量LPS 5 mg/kg连续给药组(LL-c 组),低剂量LPS 5 mg/kg单次给药组（LL组）,高剂量LPS 50 mg/kg单次给药组（HL组）,对照组(C组);于给药前测定各组小鼠血小板计数（PLT）和MPV作为基线,观察给药后小鼠PLT、TPO、MPV水平及存活情况。结果 LL-c组小鼠注射LPS后PLT下降,并持续处于基线30%左右的水平,与基线相比较差异均有统计学意义(P＜0.01),LL组与HL组均先降低后升高;LL-c组注射LPS后MPV持续处于增大水平,与基线相比较差异有统计学意义(P＜0.01),HL、LL组MPV均先增大后减小;7 d时LL-c组小鼠TPO高于C组(P＜0.05);LL-c组、LL组与HL组小鼠造模7 d时分别死亡5只、0只、14只。结论 连续低剂量腹腔注射LPS可诱导小鼠持续TCP模型。     

z-VAD-FMK对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨z-VAD-FMK对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响及其机制.方法：30只雄性SD大鼠随机分为3组：假手术组、对照组（DMSO组）、给药组（z-VAD-FMK组）,每组10只.对照组和给药组大鼠采用切除右肾,夹闭左侧肾动脉45 min后再恢复血流的方法制成肾缺血再灌注模型,于模型完成前15 min尾静脉给药;假手术组只切除右肾.模型成功后24 h收集大鼠血清和肾脏组织;测定血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;HE染色观察肾组织病理改变;TUNEL检测肾细胞凋亡;ELISA检测TNF-α、IL-10浓度;Western blot检测caspase-3和caspase-8表达.结果：与对照组相比,给药组Scr与BUN水平明显降低（P＜0.01）;HE染色可见肾小管上皮细胞脱落、间质水肿、炎细胞浸润明显减少;肾小球和肾小管上皮细胞凋亡指数明显降低（P＜0.01）;TNF-α、IL-10表达水平明显降低（P＜0.01）;caspase-3和caspase-8表达明显降低（P＜0.01）.结论：z-VAD-FMK对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡,减轻炎症损伤有关.