肝X受体激动剂对C57/BL6小鼠大脑C型1类尼曼-匹克蛋白表达的影响

目的:研究肝X受体(LXR)激动剂T0901317对C57/BL6小鼠大脑C型1类尼曼-匹克蛋白(NPC1)表达和胆固醇流出的影响.方法:C57/BL6小鼠被随机分成3组,对照组(n=13)给予赋型剂灌胃;处理1组(n=13)给予T0901317(10 mg/kg)灌胃;处理2组(n=13)给予T0901317(20 mg/kg)灌胃.通过高效液相色谱法测定大脑胆固醇含量;采用逆转录聚合酶链反应、蛋白质印迹和免疫组化方法分别检测大脑组织NPC1 mRNA和蛋白质表达.结果:两处理组小鼠大脑胆固醇含量明显少于对照组(P<0.05),其NPC1mRNA和蛋白质表达较对照组明显增高(P<0.05).结论:T0901317减少大脑胆固醇含量可能与其上调NPC1表达有关.     

人胃癌细胞高转移亚系的初步筛选及母亚两系生物学特性的比较

目的 筛选高转移胃癌细胞亚系并与其母系进行生物学特性的比较.方法 利用transwell小室筛选高转移力胃癌细胞亚系,通过HE染色比较母亚两系细胞形态改变;流式细胞仪检测母亚两系细胞周期;免疫细胞化学法检测两系细胞中MMP-9蛋白表达;transwell侵袭小室模型比较母亚两系的迁移能力.结果 利用transwell小室从母系MKN-28中成功筛选出高转移力胃癌细胞亚系MKN-28S, 母亚两系细胞形态上无明显差异,亚系增殖指数(PI)高于母系,且亚系中 MMP-9蛋白表达同母系相比显著增高,显微镜下细胞计数示亚系迁移至膜背面的数量较母系明显增多 (P＜0.05),细胞运动能力明显增强.结论 MKN-28S细胞较MKN-28细胞具有更强增殖能力和更高迁移力.     

鸡内金炮制经验谈

鸡内金为雉料动物的砂囊的角质内壁 ,剥离后 ,洗净晒干 ,研末生用或炒用。主含胃激素 ,蛋白质。具有消食积、止遗尿、化结石的功用。本品经炮制后松泡鼓起 ,利于有效成分的煎出 ,易于粉碎 ,从而增强中医临床疗效。我们在炮制鸡内金的过程中 ,发现由于砂的温度过高 ,明显看到锅内的鸡内金从边缘出现小液泡鼓起卷曲一团的熔融现象 ,同时并伴有锅内青烟腾起 ,砂迅速变黑等现象 (微有鸡屎臭气 )。通过多次实践 ,并仔细观察分析认为主要是砂的温度过高所致 ,因为药物在没有投入拌炒之前 ,由于火力过大 ,砂在锅内滑利的时间过长 ,砂会出现发红现象…     

人类胃癌细胞高侵袭亚系的筛选及其生物学特性研究

目的采用Transwell小室筛选胃癌细胞高侵袭亚系并研究其生物学特性。方法利用Transwell小室筛选高侵袭力胃癌细胞亚系,通过HE染色、Western blotting、Transwell小室模型、免疫组织化学法及生长曲线研究亚系的生物学特性。结果利用Transwell小室反复筛选10次,从MKN-28细胞中筛选出高侵袭力胃癌细胞亚系MKN-28S10。母亚两系细胞形态上无明显差异,但亚系中E—cadherin和TIMP-1蛋白表达同母系相比显著降低（P〈0．05）,显微镜下细胞计数示亚系迁移至膜背面的数量（100．25±0．50／视野）较母系（61．75±2．06／视野）明显增多（P〈0．05）,细胞运动能力明显增强;免疫组织化学结果显示,亚系中NM23-H1的表达明显低于母系（P〈0．05）;亚系体外生长速度快于母系。结论MKN-28S10细胞较MKN-28细胞具有更高侵袭力和更强增生能力。     

子宫炎性肌纤维母细胞瘤5例临床病理特征分析

目的:探讨子宫炎性肌纤维母细胞瘤(UIMT)的临床病理特征及鉴别诊断。方法:分析5例UIMT的临床及病理特征,并复习相关文献。结果:患者发病年龄23~49岁,临床及病理初始考虑为子宫平滑肌肿瘤等其他诊断。肿瘤位于子宫体黏膜下或肌壁间,质地中等或稍细腻、有黏液感。组织形态学以黏液型为主,黏液样变的基质中见梭形细胞稀疏排列,区域密集的梭形细胞呈束状,类似平滑肌瘤,间质炎细胞浸润,局灶肿瘤细胞轻度异型,核分裂象少见。2例肿瘤向周围组织浸润性生长。免疫组化显示5例肿瘤均不同程度表达间变性淋巴瘤激酶(ALK),荧光原位杂交（FISH）检测证实5例肿瘤存在ALK基因重排。患者术后随访均未见转移和复发。结论:UIMT的临床及病理特征与平滑肌肿瘤、子宫内膜间质肿瘤有重叠,建议诊断时应结合组织形态学、ALK免疫组化及FISH检测三者综合判断,以免误诊和漏诊。     

人结直肠癌侵袭及转移机制研究进展

结直肠癌是人类常见恶性肿瘤之一，居恶性肿瘤死亡原因的第二位，近年来发病率呈明显上升趋势。侵袭、转移是恶性肿瘤最重要也是最本质的生物学特征，是恶性肿瘤患者死亡的主要原因，深入理解结直肠癌侵袭和转移分子生物学机制可以加深对结直肠癌侵袭转移调控机制的理解和认识，同时也为结直肠癌侵袭转移的早期诊断和发现治疗靶标提供理论基础。     

乳腺癌细胞凋亡相关基因研究进展

乳腺癌是一种女性常见的恶性肿瘤.全球流行病学研究表明,在女性恶性肿瘤中,乳腺癌的发病率和死亡率高居首位.在我国,乳腺癌的发病率也呈逐渐上升趋势.乳腺癌的发生、发展是一个多基因、多阶段的演进过程,对乳腺癌相关基因的研究目前已成为该领域的热点.     

血管生成素1通过LXRα途径调节THP-1源性泡沫细胞ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出

目的观察血管生成素1(Ang-1)通过LXRα调节THP-1源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)、ABCG1表达和胆固醇流出。方法 160 nmol/L佛波酯诱导人THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,50 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育,使其荷脂形成泡沫细胞,常规体外培养细胞;实验分为对照组和Ang-1处理组;液体闪烁计数仪检测细胞胆固醇流出水平,高效液相色谱检测细胞内脂质成分,实时荧光定量PCR和Western blot检测ABCA1、ABCG1表达;LXRα激动剂T0901317或抑制剂GGPP分别处理THP-1源性泡沫细胞。结果Ang-1显著抑制THP-1源性泡沫细胞胆固醇流出,下调ABCA1、ABCG1表达;LXRα激活剂拮抗Ang-1对ABCA1、ABCG1表达及胆固醇流出的抑制作用。结论 Ang-1可能通过抑制LXRα表达,降低ABCA1和ABCG1表达水平,减少THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出。     

RagB过表达慢病毒载体的构建及应用

目的构建含有RagB的重组慢病毒表达载体,实现RagB基因在C2C12细胞中过表达,并检测熊果酸对该细胞中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)活性的调节作用。方法使用Flag p LJM1 RagB~(WT)、Flag p LJM1RagB~(54L)和Flag p LJM1 RagB~(99L)慢病毒载体作为模板,PCR扩增Flag-RagB~(WT)、Flag-RagB~(54L)和Flag-RagB~(99L),然后将其亚克隆到p WPI载体的Swa I酶切位点之中,进行菌液PCR鉴定;将克隆好的p WPI-RagB~(WT)、p WPI-RagB~(54L)和p WPIRagB~(99L)质粒和病毒包装质粒ps PAX2、p MD2.G按相应的比例转染到293T细胞中,48 h后收集上清液感染C2C12细胞,实现RagB基因在C2C12细胞中过表达;使用亮氨酸和熊果酸单独或共同处理RagB~(99L)过表达的C2C12细胞,Western blot检测m TOR活性。结果使用上清液感染C2C12细胞,荧光显微镜显示感染效率接近100%,Western blot证实RagB蛋白表达明显增高;熊果酸显著抑制RagB~(99L)过表达细胞中m TOR活性。结论通过构建慢病毒载体实现RagB基因在C2C12细胞中过表达,RagB在熊果酸抑制m TOR活性中具有关键作用。