去甲基化酶腺病毒载体构建及其在人颌下腺细胞中的表达

目的 构建去甲基化酶(methyl-CpG binding domain 2,MBD2)基因腺病毒载体,并观测其在人颌下腺(human submandibular gland,HSG)细胞中的表达.方法 以HSG细胞总RNA为模板,RT-PCR法扩增MBD2基因全长编码序列,克隆入载体pMD18-T后,亚克隆入pAdT...     

精神分裂症的复发原因分析

精神分裂症高复发率给患者、家庭和社会损失很大。所以，探讨导致复发的原因，对开展精神分裂症防治工作具有积极意义。本文对117例临床痊愈出院的精神分裂症患者进行调查其影响病情稳定的因素，现报告如下。     

miR-124a通过抑制TGF-β通路促进人胎盘间充质干细胞向胰腺祖细胞分化

目的 研究miR-124a参与抑制TGFBR1和BMPR1B的转录后调控,及其对人胎盘间充质干细胞(PMSCs)向胰腺祖细胞分化的影响.方法 用慢病毒过表达miR-124a前体,建立PMSCs中过表达miR-124a细胞模型;转染miR-124a反义寡核苷酸,抑制miR-124a表达;real-time PCR分析miR-124a与其调控的靶基因TGFBR1和BMPR1B的表达调控关系;real-time PCR、Western blot和免疫荧光化学染色检测miR-124a过表达后,胰腺祖细胞特征基因和蛋白表达变化.结果 PMSCs中过表达和抑制表达miR-124a,能反向调控其靶基因TGFBR1和BMPR1B的表达;miR-124a过表达后,胰腺祖细胞特异性基因PDX-1、Nkx6.1、NGN3和β细胞特征基因Insulin的表达量显著上升(P＜0.05),PDX-1和Insulin的蛋白表达水平也同样升高.结论 miR-124a可能通过抑制TGFBR1的表达,阻断TGF-β/TGF-β R信号,使细胞发生间质上皮转化,并可能通过抑制BMPR1B的表达阻碍细胞向成骨方向分化,从而 指导胎盘间充质干细胞向胰腺祖细胞分化.     

女性吸毒者Th1／Th2细胞因子和性激素水平分析

目的：通过测定女性吸食海洛因患者外周血中T细胞亚群Th1／Th2细胞因子和血清中性激素的变化，从分子水平探讨吸食海洛因对女性免疫功能和性激素的影响。方法：取吸毒组和正常对照组清晨空腹静脉血3mL，应用双抗体夹心ABC—ELISA法测定Th1／Th2细胞因子，采用放免法检测血清雌激素（E2）、孕激素（P）。结果：吸毒组30例患者Th1细胞因子（IL-2：1．45±0．48μg／L，TNF-α：0．37±0．14μg／L，INF-γ：2．99±0．55μg／L）和Th2细胞因子（IL-4：23．68±11．22μg／L，IL-10：12．11±5．13μg／L）低于32例健康组Th1细胞因子（IL-2：4．09±0．79μg／L，TNF-β]：0．91±0．35μg／L，INF-γ：5．69±0．91μg／L）、Th2细胞因子（IL-4：54．24士17．21μg／L，IL-10：22．34±7．26μg／L）水平（P〈0.01）；吸毒组患者血清雌激素与孕激素水平显著低于健康组（吸毒组E2：38．71±18．18ng／L。P：0．79±0．53μg／L；健康组分别为79．98±34．42ng／L和2．10±0．86μg／L）（P〈0.01）。结论：海洛因的摄入可导致青年女性性腺激素水平下降和免疫水平全面下降。     

慢性癫痫与抑郁共病大鼠脑白质中髓鞘碱性蛋白MBP的表达变化

目的探讨脑白质髓鞘变化在慢性反复发作性癫痫（SRS）伴发抑郁共病发生中的作用。方法本实验采用幼年期致癫痫发作后进入SRS的大鼠模型,运用行为学实验、髓鞘特异快蓝染色（LFB）和髓鞘碱性蛋白（MBP）免疫组化染色、分子生物学技术等技术,观察癫痫与抑郁共病的发生比率,以及共病鼠髓鞘发育变化的特征,明确二者间是否存在相关性。结果进入SRS期大鼠中高架迷宫和强迫游泳两项行为学联合评估均表现出抑郁样行为特征的比率占25％。癫痫伴抑郁共病鼠脑在胼胝体（cc）、扣带回（cg）等脑白质区域中LFB和MBP免疫阳性信号染色均显示染色强度较正常对照显著减弱（P〈0．01）,RT—PCR检测显示共病组脑白质中MBPmRNA的表达明显降低（P〈0．01）。结论SRS伴抑郁共病大鼠脑白质中存在髓鞘脱失,可能与抑郁行为的发生密切相关。     

不同年龄人角化细胞的衰老特征评价

目的 评价年龄对衰老细胞模型的影响,以建立体外培养的衰老细胞模型。方法 本研究根据供者年龄分为4组,每组3例生物学重复,<10岁、10~20岁、20~30岁和>30岁组。酶消化法体外分离培养不同年龄供体的表皮角化细胞。体外培养至P2代,进行以下检测：β-半乳糖苷酶染色鉴定衰老细胞数量;CCK-8和克隆形成试验检测细胞生长和增殖能力;磷酸化γ-H2A.X免疫荧光染色检测细胞DNA损伤;Western blot法检测分析细胞中周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白表达。结果 各组衰老细胞数占总细胞数百分比分别为0.864%、0.789%、5.472%、8.765%,差异有统计学意义（P=0.000）。随着年龄的增加,HKCs细胞倍增能力下降,倍增时间延长。<10岁组中细胞核Phospho-Histone H2A.X表达细胞数量少,>30岁组人正常角化细胞内DNA双链断裂大量产生。同时,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A（CDKN2A/p16^INK4a）、p21、p53的表达随年龄增加而上调,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 正常人角化细胞的增殖与衰老与人类年龄呈显著正相关,可以作为研究人类衰老的细胞模型。     

海洛因依赖126例临床分析

近年来 ,吸毒贩毒现象在我国有蔓延之势 ,已成为严重的社会问题。１９９７年５月～１９９９年５月我院收治１２６例海洛因依赖者。现将临床资料分析如下。１临床资料１．１一般资料全部病例均符合《中国精神疾病分类与诊断标准第二版 (修订本 )》中鸦片类物质所致精神障碍诊断标准。１２６例中男１０９例 ,女１７例 ,男女之比为６．４：１。最小１９岁 ,最大４５岁 ,平均２８．３岁。其中１９～３５岁１１７例 (９２．９% ) ,３６～４５岁９例 (７．１ % )。未婚５２例 ,已婚６７例 ,离婚７例。文化程度 :文盲１例 (０．８ % ) ,小学４５例 …     

聚肌胞苷酸对人胎盘胎儿源性间充质干细胞细胞因子产生的影响

<正>胎盘来源的间充质干细胞(plancenta derived mesenchymal stem cells,PMSC)越来越多的用于临床治疗[1]。PMSC免疫调节功能可能与抑制树突状细胞、T细胞、B细胞等多种免疫细胞功能,同时释放多种免疫调控因子相关[2]。其中一些免疫调控因子的分泌受到Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)信号通路的调控。因此TLR激活剂可能诱导人胎盘胎儿     

肿瘤间质细胞分泌成纤维生长因子10促进结肠癌细胞侵袭

目的 确定结肠肿瘤间质细胞的旁分泌因子FGF10对肿瘤细胞侵袭的影响。方法 体外分离培养结肠肿瘤间质细胞,ELISA检测其FGF10的表达,并与结肠癌细胞系HCT116和SW480共培养。同时设添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系作为试验对照组。Real-time-PCR检测HCT116细胞侵袭相关基因的表达变化。Western blot法检测共培养后结肠癌细胞系中上皮-间质蛋白表达变化。显微镜下计数透过Matrigel包被Transwell膜的细胞数量检测细胞的侵袭能力。结果 结肠肿瘤间质细胞高表达FGF10生长因子。结肠癌细胞系HCT116和SW480与TAFs共培养系统中,HCT116和SW480细胞中Twist、Snail、Slug、ZEB1基因的表达上调,Vimentin蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下降,侵袭能力较正常培养细胞显著增强。同时添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系表现出同样的表型变化。结论 肿瘤微环境中肿瘤相关间质细胞分泌的FGF10能够增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力。     

氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠成年后少突胶质细胞转录因子Olig2在脑白质区的表达

目的探讨氯化锂-匹罗卡品（lithium-pilocarpine,LI-PILO）点燃幼鼠癫痫持续状态（status epilepticus,SE）,成年后发展为自发反复性癫痫发作（spontaneous recurrent epileptic seizure,SRS）的大鼠脑内转录因子Olig2的表达。方法采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射诱导幼鼠SE模型,应用多道生理信号采集处理系统检测大鼠脑电图（electroencephalogram,EEG）痫样活动波和Nissl染色方法观察神经元鉴定,证实SRS模型大鼠诱导成功;应用免疫组织化学染色技术观察少突胶质细胞（oligodendrocyte,OL）转录因子Olig2变化。结果 SRS模型组脑电图与正常对照组相比,可见频发尖波、棘-慢、尖-慢综合波;海马CA1、CA3和齿状回区Nissl染色显示神经元数目减少,部分细胞变性和坏死。SRS模型组在胼胝体与扣带回区域内Olig2的免疫组织化学染色细胞数量明显减少,与正常对照组相比有显著差异。结论氯化锂-匹罗卡品致痫幼鼠,成年后仍伴有慢性自发反复性癫痫发作的脑内少突胶质细胞转录因子Olig2的表达明显降低。